吴映梅 王明力 李姗姗
摘要 [目的]研究科学的方法制作出的薏苡仁饮料的抗氧化活性。[方法]以薏苡仁为主要原料研制饮料,通过测定饮料清除1,1.二苯基.2.三硝基苯肼(DPPH)自由基和超氧阴离子自由基(O2-·)的能力对薏苡仁饮料的抗氧化能力进行评价。[结果]试验表明,制得的薏苡仁饮料,1 ml饮料清除DPPH自由基的能力相当于0.15 mg的抗坏血酸,对O2-·清除率为28.6%。[结论]薏苡仁饮料中的抗氧化物质具有一定的抗氧化活性,薏苡仁饮料是一种优质的保健饮料,对人体有一定的保健功能。
关键词 薏苡仁饮料;DPPH自由基;超氧阴离子自由基;抗氧化活性
中图分类号 S609.9 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2014)16-05246-02
薏苡仁[Coix lacryma.jobi L.var.ma.yuen(roman)stapf]是我国传统的药食两用资源,含有丰富的营养及保健价值。根据近几十年来国内外的研究表明,薏苡仁主要的活性成分为薏苡仁油,其能够有效减少癌细胞,以薏苡仁油为主要原料生产的康莱特注射液已用于临床抑癌,配合放疗和化疗有一定的增效作用[1-3]。薏苡仁含油脂类物质约7.2%[4],对薏苡仁油脂的化学成分进行分析,薏苡仁油中的甘油三酯达87%以上,甘油三酯中有12种物质得到鉴定,其主要的脂肪酸为油酸和亚油酸[5-6]。此外,薏苡仁营养价值很高,含有丰富的蛋白质、氨基酸、多糖类化合物和维生素等[7]。
薏苡仁油中的不饱和脂肪酸、其他营养物质如维生素都具有抗氧化的作用,对于提高机体的免疫力和抗衰老方面有很大功效。但是在饮料的加工过程中,会对这些抗氧化物质及其抗氧化能力造成破坏。国内外的研究常通过对DPPH自由基、羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O2-·)的清除作用来评价抗氧化能力[8-10]。笔者通过与抗坏血酸的抗氧化能力对比,测定饮料清除DPPH自由基的能力,通过邻苯三酚的自氧化反应测定饮料对O2-·的清除率,研究了薏苡仁饮料的抗氧化能力,以此验证薏苡仁饮料的保健活性,开发出一种健康且营养的新型饮料。
1 材料与方法
1.1 材料 薏苡仁:贵州兴义;白砂糖、蜂蜜,均为市售;香麦粉末香精,北京北方霞光食品添加剂有限公司。主要试剂:抗坏血酸对照品,Sigma公司,批号A7506,纯度≥99%;1,1.二苯基.2.三硝基苯肼(DPPH),TCI公司,纯度>97%;三羟甲基氨基甲烷(Tris),Sigma公司;邻苯三酚、盐酸,均为分析纯,天津市光复精细化工研究所;α.淀粉酶(>3 700 U/g)、β.环糊精、羧甲基纤维素(CMC)、果胶、海藻酸钠、黄原胶、卡拉胶,均为食品级:广州食品添加剂有限公司。
主要设备仪器:JM.L50A胶体磨、温州市七星乳品设备厂; AL204电子天平,梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司;UV.2550紫外分光光度计,日本岛津公司;3K18离心机,Sigma公司。
1.2 饮料加工工艺流程 原料处理→酶解→离心→混合调配→灌装→灭菌→成品。
1.3 饮料加工操作要点
1.3.1 原料处理。选择颗粒饱满,无虫蛀的薏苡仁在180 ℃下烘烤30 min,然后浸泡5~9 h,料水比为1∶ 3 g/ml,待薏苡仁浸泡到组织软化后进行磨浆,料水比为1∶ 9 g/ml。
1.3.2 酶解。用0.001 7%的α.淀粉酶在60 ℃下酶解10 min,在100 ℃下滅酶10 min。
1.3.3 离心。将酶解所得乳液冷却后置于离心机中进行离心,转速2 500 r/min,离心10 min。
1.3.4 混合调配。加入白砂糖、蜂蜜、β.环糊精、香精和稳定剂进行调配。
1.3.5 灌装、灭菌。趁热灌装,在100 ℃下灭菌20 min。
1.4 薏苡仁油清除DPPH自由基能力的测定
1.4.1 抗坏血酸标准品储备液的制备。精密称取抗坏血酸标准品8.8 mg,置于100 ml的棕色容量瓶中,加入适量无水乙醇使其溶解后并定容至刻度,即得0.5 mmol/L的标准品储备液。
1.4.2 DPPH标准品储备液的制备。精密称取0.004 g的DPPH标准品于100 ml的棕色容量瓶中,用无水乙醇溶解并稀释至刻度,得到浓度为0.1 mmol/L的DPPH标准溶液。
1.4.3 样品储备液的制备。 吸取1 ml的饮料,用无水乙醇定容到50 ml。
1.4.4 标准曲线的制定。分别量取1.0、2.0、3.0、4.0 ml的抗坏血酸标准品储备液于10 ml的棕色容量瓶中,加无水乙醇至刻度,稀释成系列浓度0.05、0.10、0.15、0.20 mmol/L的标准溶液。分别移取DPPH标准液84 ml于5个棕色反应瓶中,在其中4个加入各浓度抗坏血酸标准溶液6 ml,振荡均匀后,在波长515 nm处测定吸光度,每隔1 h记录一次吸光值,测定4 h,空白为无水乙醇[11]。
1.4.5 薏苡仁饮料DPPH清除能力的测定。50 ml的样品储备液加入20 ml的DPPH标准溶液,振荡均匀后,在波长515 nm处测定吸光度,每隔1 h记录一次吸光值,测定4 h空白为无水乙醇,薏苡仁油DPPH清除能力的计算以抗坏血酸作为对照。
1.5 薏苡仁饮料对O2-·的清除作用 采用邻苯三酚自氧化反应为产生O2-·模型,用紫外和可见分光光度法试验饮料对模型中产生的O2-·的清除作用[12]。O2-·的清除率用下式计算:式中,Fo为对照溶液吸光度随时间的变化率;Fx为样品溶液吸光度随时间的变化率。
2 结果与分析
2.1 薏苡仁饮料清除DPPH自由基能力结果分析
2.1.1 抗坏血酸清除DPPH溶液吸光度的变化。当吸光值达到稳定后,建立了不同浓度抗坏血酸与DPPH溶液分光光度变化的标准曲线,见图1。由图1可见,不同浓度抗坏血酸清除DPPH溶液吸光度变化标准曲线方程为y=-1.932x+1.004 6,R2=0.999 6。
2.1.2 薏苡仁饮料清除DPPH自由基的能力。 薏苡仁饮料在4 h内清除DPPH溶液吸光度变化见图2。从图2可见,加有薏苡仁饮料的DPPH溶液在3 h后,其吸光度值基本保持稳定(A=0.733),以抗坏血酸清除DPPH溶液吸光度变化标准曲线方程作为对照,薏苡仁饮料中的薏苡仁油的抗氧化能力相当于0.141 mmol/L的抗坏血酸,经计算,即1 ml薏苡仁饮料的抗氧化能力相当于0.15 mg的抗坏血酸,表明薏苡仁饮料具有一定的抗氧化活性。
2.2 薏苡仁饮料清除O2-·能力结果分析 5 min內,标样和样品溶液的吸光度随时间的变化分别如图3、4所示。 由图3和图4的线性方程可见,标样的吸光度随时间的变化率Fo为0.000 7,样品溶液的吸光度随时间的变化率Fx为0.000 5。经计算,1 ml薏苡仁饮料对O2-·的清除率为28.6%。
3 结论
用科学方法加工而成的薏苡仁饮料,经过对其抗氧化能力的研究表明,1 ml的饮料相当于0.15 mg的抗坏血酸清除DPPH自由基的能力,对O2-·的清除率为28.6%。试验结果表明,虽然经过加工过程的损失和破坏,薏苡仁饮料中的抗氧化物质仍具有一定的抗氧化活性。因此,薏苡仁饮料是一种优质的保健饮料,对人们的身体有有效的保健功能。
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责任编辑 徐丽华 责任校对 况玲玲