HPLC法测定布洛芬钠有关物质

齐 勇，聂 磊

（1.山东大学药学院，山东济南250012；2.山东新华制药股份有限公司，山东淄博255000）

HPLC法测定布洛芬钠有关物质

齐 勇1，2，聂 磊1

（1.山东大学药学院，山东济南250012；2.山东新华制药股份有限公司，山东淄博255000）

目的采用高效液相色谱法测定布洛芬钠有关物质。方法仪器：高效液相色谱仪（紫外检测器）；色谱柱：Supelco discovery C18（4.0 mm×150 mm，5μm）；流动相：水（用H3PO4调pH为2.5）－乙腈（66∶34）；检测波长：214 nm；柱温：（30±0.5）℃；流速：2 mL·min－1；进样体积：5μL。结果布洛芬钠主峰与杂质B主峰分离度为3.0，分离良好；布洛芬钠盐检测限为0.100 6μg·mL－1，定量限为0.503μg·mL－1；杂质B检测限为0.06μg· mL－1，定量限为0.24μg·m L－1；精密度：样品杂质含量测试结果的RSD＝0＜2.0%。结论该方法灵敏、简单、准确，适用于布洛芬钠有关物质的测定。

高效液相色谱法；布洛芬钠；有关物质

布洛芬钠是布洛芬的钠盐产品，与布洛芬一样，具有解热镇痛及抗炎作用。用于扭伤、劳损、下腰疼痛、肩周炎、滑囊炎、肌腱及腱鞘炎、牙痛和术后疼痛、类风湿性关节炎、骨关节炎以及其他血清阴性（非类风湿性）关节疾病［1］。可以减轻中度疼痛，如关节痛、肌肉痛、偏头痛、头痛、牙痛、痛经、神经痛，也可用于减轻普通感冒或流行性感冒引起的发热［2］。相关质量标准没有对其有关物质的测定方法做出规定。本文建立了布洛芬钠有关物质的HPLC测定方法，该方法操作简便、准确度高及重现性好，为布洛芬钠有关物质的准确定量提供参考。

1 实验部分

1.1 仪器 岛津LC－20AT高效液相色谱仪，色谱柱为Supelco discovery C18（4.0 mm×150 mm，5 μm）。

1.2 试药及溶液配制 2－（4－正丁基苯）丙酸（杂质B），批号：7.0，EDQM官方购买；布洛芬钠，批号：1308002，山东新华制药生产；苯戊酮，批号：A0105592；乙腈为色谱纯；磷酸、磷酸二氢钾、氢氧化钠均为分析纯试剂。

稀释液：称取磷酸二氢钾约6.8 g，用水溶解至1 000 mL，用50%氢氧化钠溶液调pH至7.2，再加1 000 mL甲醇，混匀［3］。

2－（4－正丁基苯）丙酸溶液：量取2－（4－正丁基苯）丙酸对照品1.0 mL，加乙腈稀释至10.0 mL，取此溶液1.0 mL用稀释液稀释到10.0 mL，摇匀。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 采用等度洗脱方式，流动相：水（用H3PO4调pH为2.5）－乙腈（66∶34）；检测波长：214 nm；柱温：（30±0.5）℃；流速：2 mL· min－1；进样体积：5μL；记录至布洛芬主峰保留时间的2倍。

2.2 专属性 取布洛芬钠120 mg，加2－（4－正丁基苯）丙酸溶液1.0 mL，用稀释液制成100.0 mL，进样测定，布洛芬钠主峰与2－（4－正丁基苯）丙酸峰分离度为3.0，分离良好。取布洛芬钠分别在紫外光照、高温、酸、碱、氧化条件下破坏，按本方法分别进行测定［4］，结果表明，未破坏的样品与紫外光照、高温、酸化、碱化破坏后的样品单个最大杂质均为0.06%，总杂质均为0.17%，杂质个数均为5个。氧化破坏后的样品单个最大杂质为0.50%，总杂质为1.24%，杂质个数为11个，布洛芬钠在紫外光照、高温、酸、碱条件下杂质数量及含量无明显变化，在氧化条件下杂质个数及含量增加显著，证明布洛芬钠在氧化条件下有明显的降解。本方法对各杂质分离良好，对测定无干扰，专属性符合要求，图谱见图1～7。

图1 分离度色谱图

图2 未破坏样品色谱图

图3 紫外光照破坏色谱图

图4 高温破坏色谱图

图5 酸化破坏色谱图

2.3 精密度 取样品0.12 g，置100 mL容量瓶中，用稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀。连续进样6次，6次杂质含量测试结果的RSD为0＜2.0%，精密度符合要求［5］，测试数据见表1。

表1 精密度测试数据

2.4 检测限与定量限

图6 碱化破坏色谱图

图7 氧化破坏色谱图

2.4.1 布洛芬钠的检测限和定量限 取布洛芬钠稀释进样测定，按3倍信噪比计算，布洛芬钠的检测限为0.100 6μg·mL－1；取布洛芬钠稀释进样测定，按10倍信噪比计算，布洛芬钠的定量限为0.503μg·mL－1。

2.4.2 2－（4－正丁基苯）丙酸（杂质B）的检测限和定量限 取2－（4－正丁基苯）丙酸稀释进样测定，按3倍信噪比计算，2－（4－正丁基苯）丙酸的检测限0.06μg·mL－1；取2－（4－正丁基苯）丙酸稀释进样测定，按10倍信噪比计算，2－（4－正丁基苯）丙酸的定量限0.24μg·mL－1［6］。

2.5 溶液稳定性 取布洛芬钠样品溶液在溶液制备后的0、2、4、8、12和24 h，分别进样测定，统计有关物质测定结果，各项杂质含量变化均＜0.02%，可认为布洛芬钠样品溶液在24 h内杂质含量无显著性变化，溶液在24 h内是稳定的，测试结果见表2。

表2 溶液稳定性测试数据

2.6 布洛芬钠样品测定 分别取连续5个批号的布洛芬钠120 mg，加稀释液溶解稀释至100 mL，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液1 mL，加流动相稀释至100 mL，取1 mL上述溶液稀释至10 mL，作为对照溶液。按上述色谱条件测定，按主成分自身对照法计算杂质含量，测定结果见表3。

表3 布洛芬钠有关物质的测定

3 讨论

3.1 在布洛芬钠质量标准中，单个最大杂质要求≤0.10%，总杂质要求≤0.30%，从“2.6”项下的检测数据可以看出，单个最大杂质已接近限度，因此建立布洛芬钠有关物质检测方法对其有关物质进行质量控制是十分必要的［7］。

3.2 在布洛芬钠的生产原料布洛芬的质量标准中，《美国药典》规定：杂质2－（4－正丁基苯）丙酸不得过0.1%，其他单个杂质不得过0.1%，总杂质不得过0.3%。在参考上述规定的基础上，从严要求限度，制定本次布洛芬钠有关物质的限度为：单个最大杂质≤0.10%，总杂质≤0.30%，“2.6”项下的实验结果表明，5批布洛芬钠样品均符合规定［8］。

3.3 本文只对杂质2－（4－正丁基苯）丙酸进行了研究，没有对其他杂质进行进一步分析，下一步工作中将对其他杂质进行研究，达到对布洛芬钠有关物质进行更好地质量控制。

4 结论

用HPLC法测定布洛芬钠有关物质，回收率高，重现性好，测定结果准确可靠，该法适用于布洛芬钠有关物质含量的测定。

［1］ 李成平，施青红，李立，等.高效液相色谱手性流动相法拆分布洛芬对映体［J］.药物分析杂志，2005，25（4）：426－428.

［2］ 李玮玲.双氯芬酸二乙胺的有关物质测定［J］.药物分析杂志.2013，33（9）：1546－1550.

［3］ 税庆华，钱雪，朱启登.布洛芬搽剂中有关物质中的HPLC法测定［J］.2006，25（1）：24－26.

［4］ 于如嘏.分析化学（下册）［M］.第2版.北京：人民卫生出版社，1986：386－387.

［5］ 国家食品药品监督管理局.药物研究技术指导原则（2005年）［M］.北京：中国医药科技出版社，2005：17－27.

［6］ 余永铭，余仲平.有关物质检查方法研讨［J］.中国药品标准，2003，4（3）：11－12.

［7］ 李琼，刘毓宏.高效液相色谱法测定酮基布洛芬［J］.药物分析杂志，2005，25（8）：994－995.

［8］ 贺秀婷，翟光喜，皇甫传青，等.HPLC法测定布洛芬缓释胶囊有关物质［J］.药学研究，2013，32（2）：85－87.

Determ ination of the related substances in ibuprofen sodium by HPLC

QIYong1，2，NIE Lei1
（1.School of Pharmaceutical Sciences，Shandong University，Jinan 250012，China；2.Shandong Xinhua Pharmaceutical Co.，Ltd.，Zibo 255000 China）

ObjectiveTo establish an HPLCmethod for the determination of the related substances in ibuprofen sodium.MethodsInstrument：HPLC（UV detector），column：Supelco discovery C18（4.0 mm×150 mm，5μm），mobile phase：water（adjusted pH to 2.5 with phosphoric acid）－acetonitrile（66∶34），the detection wavelength was 214 nm，the column temperaturewas（30±0.5）℃；The flow ratewas2 mL·min－1and the inject volume was5μL.ResultsThemain peak of ibuprofen sodium was separated from impurity B completely，the resolution was3.0；The limitof detection（LOD）of ibuprofen sodium was0.100 6μg·m L－1，and its limit of quantitation（LOQ）was0.503μg·m L－1；The LOD of impurity B was 0.06μg·mL－1，and its LOQ was 0.24μg·mL－1；Precision：the RSD of test results of sample impuritieswas 0＜2.0%.ConclusionThemethod was highly selective，simple and accurate，and was suitable for the determination of related substances in ibuprofen sodium.

HPLC；Ibuprofen sodium；Related substances

R927.1

A

2095－5375（2014）08－0446－003

山东省自然科学基金（No.ZR2011HM080）

齐勇，男，研究方向：药物分析，E－mail：43934617＠qq.com

聂磊，男，博士研究生，副教授，研究方向：中药质量评价，Tel：0531－88382330，E－mail：nielei2004＠sdu.edu.cn