迪瑞尿液检验工作站和显微镜镜检对尿中红细胞、白细胞检测结果的对比分析

2014-02-09 09:10:27张磊
实验与检验医学 2014年5期
关键词:全自动显微镜分析仪

张磊

(濉溪县医院检验科,安徽濉溪235100)

迪瑞尿液检验工作站和显微镜镜检对尿中红细胞、白细胞检测结果的对比分析

张磊

(濉溪县医院检验科,安徽濉溪235100)

目的探讨迪瑞尿液检验工作站(由H-800全自动尿液分析仪和FUS-200全自动尿有形成分分析仪组成)、涂片显微镜检测尿红细胞(RBC)、白细胞(WBC)结果的对比性分析。方法随机选取我院479例住院患者尿液标本,分别用H-800全自动尿液分析仪、FUS-200全自动尿有形成分分析仪、涂片显微镜检测尿红细胞(RBC)、白细胞(WBC),对比性分析两个参数结果。结果三种方法对尿液中的RBC、WBC检出率较一致。(1)H-800全自动尿液分析仪:RBC敏感性为93.3%,特异性为95.5%,假阴性率6.7%、假阳性率4.5%、符合率94.2%;WBC敏感性为77.5%,特异性为99.3%,假阴性率22.5%、假阳性率0.7%、符合率97.5%。(2)用FUS-200全自动尿有形成分分析仪与显微镜镜检对比:RBC敏感性为80.0%,特异性为99.3%,假阴性率20.0%、假阳性率0.7%、符合率96.2%;WBC敏感性为95.0%,特异性为99.1%,假阴性率5%、假阳性率0.9%、符合率98.8%;H-800全自动尿液分析仪与FUS-200全自动尿有形成分分析仪对RBC、WBC检查结果对比分析P<0.05,表示两种检测方法差异有统计学意义。由H-800全自动尿液分析仪、FUS-200全自动尿有形成分分析仪组合而成的尿液检验工作站对尿中红细胞和白细胞的检出率,可达93.7%、96.7%。结论H-800全自动尿液分析仪、FUS-200全自动尿有形成分分析仪两种仪器操作简便、快速、检测项目多,重复性好;对于尿液中红细胞、白细胞检测,尿液检验工作站做筛检实验须结合尿沉渣显微镜检查结果进行综合判断。临床应根据患者的病因和症状,采用多种方法有机结合进行诊断,以提高检测的准确率,避免漏检和贻误,为临床提供可靠的检测结果。

尿液检验工作站;显微镜镜检;红细胞;白细胞

尿液分析是为泌尿系统疾病及其它系统相关疾病提供重要诊断依据的常规检测项目,目前最常用的方法是干化学法和人工光学显微镜检查,本院在2012年新添置了由迪瑞H-800全自动尿液分析仪和迪瑞FUS-200全自动尿有形成分分析仪组成的尿液检验工作站。H-800全自动尿液分析仪是利用干化学法的原理来检测尿液的,具有操作简便、快速、但检测结果受到诸多干扰因素的影响,易产生假阴性和假阳性结果,只能作为过筛实验[1]。尿有形成分检查方法中也存在某些难以避免的干扰因素。光学显微镜镜检虽操作复杂费时,但对于检测尿液中的有形成分具有很大的临床意义,可以作为尿液有形成分检查的金标准[2]。本文用三种检测方法同时检测479例尿液中的红细胞、白细胞,并对结果进行对比性分析,以了解单一分析仪及组合状态下对尿中红细胞、白细胞检测性能,现报告如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源随机选取的479例尿液标本均为安徽省濉溪县医院2013年7月至2013年12月住院的患者,其中男性202例,女性277例,患者年龄1~97岁,平均年龄55.1岁,尿液标本均是用洁净一次性尿杯留取中段尿,1h内完成检测。

1.2 仪器与试剂长春迪瑞H-800全自动尿液分析仪及该机专用11项测试带。按要求进行室内质控和加样测试,操作步骤严格按照说明要求进行;(1)长春迪瑞FUS-200全自动尿有形成分分析仪及其配套试剂;(2)奥林巴斯CH30光学显微镜;玻片;所用的试剂条均为原装配套产品。

1.3 检测方法用一次性洁净尿杯收集患者中段尿液10ml左右,用尿液检验工作站对尿液进行自动进样分析,完成以后的尿液于离心管中1500r/ min离心5min,弃去上清液留取0.2ml左右沉渣,然后吸取一滴于玻片上做显微镜镜检,观察10个高倍镜视野,计算出镜下细胞的平均数。所有的操作步骤都遵循《全国临床检验操作规程》第3版。

1.4 临床评价标准和评价指标用奥林巴斯CH30光学显微镜检测结果作为临床评价标准,分别与尿液流水线的FUS-200和H-800两种检测方法进行比较,H-800全自动尿液分析仪结果参考值:隐血(BLD)阴性,白细胞(LEU)阴性;尿沉渣显微镜计数参考区间遵循《全国临床检验操作规程》第3版[3],RBC:0~3/HP,WBC:0~5/HP;FUS-200全自动尿有形成分分析仪的参考区间遵循厂家规定:RBC:0~17/μl,WBC:0~28/μl,超出规定范围则视为阳性。

1.5 统计学处理数据采用SPSS19.0统计软件做统计学分析,进行配对χ2检验,P<0.05表示差异有统计学意义;运用Kappa检验判断结果的符合率一致性分析。

2 结果

通过用H-800全自动尿液分析仪、FUS-200全自动尿有形成分分析仪以及显微镜检查三种方法对479例尿液进行检验,本文以光学显微镜镜检法作为参考对照标准。

2.1 H-800全自动尿液分析仪与显微镜镜检对比见表1、表2。

表1 H-800全自动尿液分析仪与显微镜镜检RBC结果对比

表2 H-800全自动尿液分析仪与显微镜镜检WBC结果对比

2.2 用FUS-200全自动尿有形成分分析仪与显微镜镜检对比见表3、表4。

2.3 H-800全自动尿液分析仪与FUS-200全自动尿有形成分分析仪对RBC WBC结果对比分析见表5、表6。

3 讨论

在本结果中发现,H-800全自动尿液分析仪检测具有使用方便、所需尿量少、重复性好、准确性好、便于实现自动化测定等优点,扩大了尿液检查的内涵,极大的提高了工作效率。但是由于该仪器采用干化学方法,尿液成分复杂,项目繁多,其检测原理各不相同,所以影响因素很多,易出现假阴性和假阳性结果[4];FUS-200全自动尿有形成分分析仪其主要特点是采用高速频闪光源和高速显微摄像技术的光学系统,每个检测标本利用流式细胞仪技术在鞘流液的包裹下进入流动池内,其厚度和位置正好符合显微镜的焦距范围内,标本以平坦对的层流形式流经物镜镜头前面,根据鞘流原理,任何粒子通过时都会以最大的面积直接对准镜头的观测,每个显微镜视野被高速频闪光源(40次/s)瞬间拍摄,由CCD相机拍摄820副含有有形成分的图像,再由计算机进行图像分析等技术,对尿中有形成分的大小、对比度、形状、质地特征进行提取,运用形态识别软件进行有形成分的分类和定量报告。每种成分均可在显示屏上显示其形态,并可任意选取可疑的成分进行人工智能识别技术复核,是一种全新的分析技术。FUS-200全自动尿有形成分分析仪检测时尿液无需离心,可以实现尿液分析的全自动化和标准化,具有高效、简便快速、无携带污染和结果较为准确的性能。对阴性样本过筛结果可靠,但是在阳性样本有形成分识别上有一定的差异。当尿液样本中含有真菌、结晶时,FUS-200全自动尿有形成分分析仪有可能误判为红细胞,而有些脱落的上皮细胞误判为白细胞等都会使结果出现假阳性的结果。而H-800全自动尿液分析仪检测结果均为阴性,此时就需要经过光学显微镜镜检复查,得出准确结果。

表3 用FUS-200全自动尿有形成分分析仪与显微镜镜检RBC结果对比

表4 用FUS-200全自动尿有形成分分析仪与显微镜镜检WBC结果对比

表5 H-800全自动尿液分析仪与FUS-200全自动尿有形成分分析仪检测RBC

表6 H-800全自动尿液分析仪与FUS-200全自动尿有形成分分析仪检测WBC

合理建立尿有形成分显微镜复检的规则,规范化与标准化尿液检查工作[5]。(1)H-800与FUS-200的检测结果有较高的符合一致性(RBC:93.7%; WBC:96.7%)。如果均为阴性时不需要复检;如果均为阳性并且阳性量级相当时,不需要复检[6]。(2) FUS-200检查RBC阳性而H-800检查为阴性时,大多数情况是尿液中存在不同数量体积较小的结晶、真菌、细菌所致,对结果产生干扰[7]。(3)H-800检查RBC为不同程度的阳性而FUS-200检查为阴性的,原因:①可能尿液中存在类过氧化酶的物质,其具有与血红蛋白相同的氧化色原的作用,而造成潜血实验假阳性,②也可能有技术操作人员能力有限,误判所致;③进行FUS-200检测时,由于留取尿液样本量过少的,为了满足仪器的需要,就需要对样本进行生理盐水稀释,从而导致尿有形成分分析时单位体积内RBC数量较少,结果出现假阴性,样本需要复检鉴别。

尿液红细胞检查结果中,479例样本5例样本H-800阴性而镜检阳性可能由于尿中含有过氧化物酶样的物质,从而产生假阴性。有报道指出尿液中若存在高浓度的维生素C、青霉素、亚硝酸盐或其他还原物质也可导致干化学法检测红细胞结果呈现假阴性[8]。H-800全自动尿液分析仪(干化学试法)的原理,其检测隐血的原理是根据血红蛋白的亚铁血红素具有过氧化物酶样活性,可催化分解氧化物,释放新生态氧,使邻联甲苯胺氧化呈色,其色泽的深浅与尿液中血红蛋白或红细胞量呈正比。在FUS-200的RBC检测中,479例样本中18例与显微镜镜检不符,不符合率3.8%。由于显微镜镜检只能检测出完整红细胞,离心对尿液有形成分的影响很大,让红细胞的数量减少,从而出现假阴性结果。而FUS-200检测不需要离心可直接检测样本,这就可能是其红细胞检出率接近于甚至好于显微镜镜检的原因。在本文中三种方法对RBC检测结果同时是阳性和阴性的为92.3%(442/ 479),符合一致性较高。

对于白细胞检测而言,H-800全自动尿液分析仪(干化学法)的原理是基于中性粒细胞胞质内含有的酯酶作用于带膜块中的吲哚酚酯,使吲哚酚酯释放吲哚酚,后者与重氮盐反应产生紫色,以其颜色深浅换算成白细胞数。本本文中H-800检测WBC的假阴性率22.5%,其主要原因可能与干化学法测定白细胞原理有关。此外,尿中H-800阳性而显微镜镜检阴性,可能是由于尿液渗透压、酸碱度、药物(头孢拉定和庆大霉素)及离心等因素所导致。H-800检测WBC假阴性率为0.7%,可能是尿液在膀胱中贮存时间过长或者离心过快等原因导致白细胞破坏,酯酶释放入尿中所致。FUS-200检测WBC阳性,而H-800检测阴性时,大部分是由于尿液中WBC是以单核细胞和淋巴细胞为主,而干化学是针对中性粒细胞的酯酶反应,从而呈现假阴性结果[9]。H-800检测WBC为不同程度阳性,FUS-200检测为阴性的例数,可能是WBC破碎所致,需要复检鉴别。另外,FUS-200全自动尿有形成分分析仪检出的4例假阳性标本经人工审核及镜检发现,小圆上皮细胞和移行上皮细胞体积膨大变性在光学显微镜下WBC的形态特点非常相近且容易误判,特别是女性患者白带增多,冬季盐类结晶析出等原因使结果呈现出假阳性[10]。本研究中三种方法对WBC检测结果同时是阳性和阴性的为96.5%(462/479),符合一致性较高。

综上所述,尿液分析对于泌尿系统疾病的诊断、鉴别、治疗和预后有重要的临床意义和参考价值。H-800尿干化学分析仪、FUS-200全自动尿有形成分分析仪、以及显微镜镜检检测RBC和WBC受到诸多干扰因素的影响使结果呈现假阳性或假阴性结果。通过本结果分析证实,三种检测方法有各自的优缺点,H-800操作简便、快速、但检测结果受到诸多干扰因素的影响,易产生假阴性和假阳性结果,只能作为过筛实验。FUS-200全自动尿有形成分分析仪具有检测速度快,操作简单,批量进样以及图像传出真实等优点,与光学显微镜镜检结果具有很高的符合率和良好的一致性,对尿液中的红细胞和白细胞识别具有高特异性和高灵敏度,报告结果规范,有很大的临床实用价值。光学显微镜镜检时需要尿液少,是一种操作简单、检出率和精确度高的方法,但是显微镜法在用于大群疾病筛查时操作比较复杂,工作效率低,需要投入大量的人力,并且离心尿液对尿有形成分产生影响,检测结果也受技术人员主观因素和技术水平影响较大。因此,要加强尿液分析检测的规范化和标准化,必须把H-800尿干化学分析仪、FUS-200全自动尿有形成分分析仪以及显微镜镜检三者结合起来,相互补充,只有这样才能提高尿液检测的准确性和可靠性,为临床提供准确的参考、诊断和治疗依据。

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R446.12+1

A

1674-1129(2014)05-0552-004

10.3969/j.issn.1674-1129.2014.05.023

2014-03-07;

2014-07-14)

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