部分血小板参数缺失时小红细胞/裂红细胞对XS1000i血细胞分析仪血小板计数的影响

钟青,许业栋,吴永国,刘文毅,肖静,胡国刚

(松岗人民医院检验科,广东深圳518105)

部分血小板参数缺失时小红细胞/裂红细胞对XS1000i血细胞分析仪血小板计数的影响

钟青,许业栋,吴永国,刘文毅,肖静,胡国刚

(松岗人民医院检验科,广东深圳518105)

目的探讨XS1000i血细胞分析仪部分血小板参数缺失时小红细胞/裂红细胞对血小板计数的影响.方法对XS1000i血细胞分析仪分析后MCV<80fl且部分血小板参数缺失的标本再使用PENTRA120Retic血细胞分析仪计数血小板、显微镜计数血小板及瑞氏染色镜检.结果PLT>100X109/L时,XS1000i与PENTRA120Retic、显微镜计数血小板的差异有统计学意义(P<0.01),PLT<100X109/L时,XS1000i与PENTRA120Retic、显微镜计数血小板的结果差异无统计学意义(P>0.01);当MCV分别为70~80fl,60~70fl,<60fl时,XS1000i均高于显微镜计数血小板的结果,差异有统计学意义(P<0.01).显微镜检查结果发现:101例标本均检出小红细胞或(和)裂红细胞,其中60例伴有大血小板或(和)巨血小板,4例伴有大血小板和血小板聚集.结论对于电阻抗血细胞分析仪,当MCV<80fl且部分血小板参数缺失时的标本应用显微镜或ICSH推荐的参考方法计数血小板,同时染色镜检异常血细胞的形态、数量及分布.

血液分析仪;血小板计数;小红细胞;裂红细胞;血小板参数

XS-1000i血细胞分析仪是Sysmex公司开发的一款体积最小的机型,可检测WBC,RBC,HGB, HCT,MCV,MCH,MCHC,PLT,NEUT%,LYMPH%, MONO%,EO%,BASO%,NEUT#,LYMPH#,MONO#, EO#,BASO#,RDW-SD,RDW-CV,PDW,MPV,PCT,PLCR24个参数,还提供IG%,IG#2个研究参数,以及红细胞直方图、血小板直方图、白细胞分类散点图,极大地满足了各种规模的医院对临床标本检测的需求.在实际运用过程中,经常遇到某些血液疾病如地中海贫血、缺铁性贫血及某些慢性病贫血等标本中的部分血小板参数如PDW(血小板体积分布宽度)、MPV(平均血小板体积)、PCT(血小板比容)、P-LCR(大型血小板比率)的检测结果为"----",且血小板直方图异常(如图1,2),这给临床疾病的诊疗和检验报告的规范带来诸多不利[1].笔者使用多种方法对该类标本的血小板进行检测,包括XS1000i、PENTRA120Retic、显微镜计数法、瑞氏染色镜检等,现将检测结果报告如下.

图1 血小板直方图

图2 血小板直方图

1 材料与方法

1.1 仪器XS-1000i全自动血液分析仪,由sysmex公司生产;PENTRA120Retic全自动血液分析仪,由HORIBA公司生产;Olympus-CX31显微镜,由Olympus公司生产;血球计数板,上海市求精生化试剂仪器有限公司生产.

1.2 试剂XS-1000i血细胞分析仪原装配套试剂及质控品,PENTRA120Retic血细胞分析仪原装配套试剂及质控品,EDTA-K2抗凝管由广州阳普医疗科技股份有限公司提供,瑞氏染液由珠海BASO公司提供,血小板计数稀释液(1%草酸铵稀释液)按照《中华医学检验全书》[2]进行配制.

1.3 标本来源来自于2011年4月18日至2011年5月12日就诊的门诊及住院病人的静脉血(n= 101),严格按照仪器原始操作手册和《全国临床检验操作规程》[3]进行真空采血管采集,标本采集后颠倒混匀10次,肉眼可见标本适量、无凝固、无凝块、无溶血.

1.4 方法

1.4.1 严格按照血细胞分析仪的要求定期对XS-1000i血液分析仪、PENTRA120Retic血液分析仪进行校准,每天仪器开机后进行质控检测,在各校准参数和质控参数均符合相关标准后,再对各标本进行自动检测.

1.4.2 采集的静脉血先用XS1000i血细胞分析仪进行自动检测,根据检测结果,对MCV<80fl且无MPV、PCT、PDW、P-LCR参数的标本先用PENTRA120Retic血液分析仪进行自动检测,然后用显微镜计数法计数血小板,同时进行血涂片制备和染色,标本采集后在4小时内完成以上检测.

1.4.3 经严格培训且有理论、实践经验的检验人员进行细胞形态学检查选择理想的区域进行镜检(理想红细胞分布区域是红细胞之间相近排列而不重叠),用油镜观察血膜体尾交界处的细胞形态[4].小红细胞/裂红细胞>2%有诊断价值[5](注:小红细胞:直径小于6μm,大血小板:直径5~7.5μm,巨血小板:直径大于7.5μm[6].)

1.5 分组

1.5.1 按XS1000i血细胞分析仪血小板的检测结果分为高、低2组,高值组(n=98):PLT>100X109/L,低值组(n=3):PLT<100X109/L;

1.5.2 按XS1000i血细胞分析仪MCV的检测结果分为3组:(a)MCV:70~80fl,n=21,(b)MCV:60~70fl, n=59,(c)MCV:<60fl,n=21

1.6 统计:使用SPSS Statistics 17.0统计软件进行统计,进行配对样本t检验,数据以均值±标准差()表示,P<0.01表示差异有统计学意义.

2 结果

2.1 XS1000i与显微镜计数法对血小板计数结果的比较,XS1000i与PENTRA120Retic对血小板计数结果的比较分别见表1和表2.从表1可以看到,高值组XS1000i比显微镜计数法的结果要偏高,相关系数为0.749,P=0.000,差异有统计学意义,而低值组XS1000i与显微镜计数法检测的PLT结果接近,相关系数为0.988,P=0.099,差异无统计学意义,可能与标本量(n=3)过少有关.

表1 XS1000i与显微镜计数法血小板计数结果的比较

表2 XS1000i与PENTRA120Retic血小板计数结果的比较

从表2可以看到,高值组XS1000i比PENTRA120Retic的结果偏高,相关系数为0.858,P= 0.000,差异有统计学意义,而低值组XS1000i与PENTRA120Retic检测的PLT结果相近,相关系数为0.962,P=0.176,差异无统计学意义,也可能与标本量(n=3)过少有关.

2.2 XS1000i与显微镜计数法对MCV不同标本的血小板计数结果比较见表3.从表3可以看到,各组的血小板检测结果均是XS1000i比显微镜计数法高,P值均<0.01,差异有统计学意义.

表3 XS1000i与显微镜计数法对MCV不同标本的血小板计数结果比较

2.3 显微镜检查结果101例标本均检出小红细胞或(和)裂红细胞,其中60例伴有大血小板或(和)巨大血小板(如图3),4例伴有大血小板和血小板聚集,其余37例标本未见血小板异常.

图3 外周血裂红细胞、大血小板和巨血小板形态(X1000)

3 讨论

XS1000i血细胞分析仪是利用流体聚焦法分析红细胞和血小板计数,使用3个界标(2~6fl,12fl, 12~30fl)检测血小板的颗粒大小分布,改善了血细胞计数的精确度和重现性,防止产生假性血小板脉冲.但出现小于30fl的小红细胞或细胞碎片时,这些小红细胞和碎片会当成血小板计数,导致血小板假性偏高.

小红细胞(MCV<80fl)一般出现在缺铁性贫血、铁粒幼细胞贫血、血红蛋白病(如:珠蛋白合成障碍性贫血)、遗传性球形细胞增高症及慢性疾病所引起的贫血中,而这些增生性贫血易出现红细胞碎片,因此极易干扰PLT的检测[7].一般裂红细胞增多见于微血管病性溶血性贫血、血栓性血小板减少性紫癜、溶血尿毒症综合征、恶性高血压、创伤性心血管性溶血性贫血等[8].

从表1和表2可以看出,当血小板减少时,两台血细胞分析仪之间以及血细胞分析仪与显微镜计数法计数血小板的差异无统计学意义(P>0.01),相关系数分别是0.962、0.988,显示了良好的相关性,小红细胞/裂红细胞对血小板计数无明显影响,可能与本次检测标本量过少有关.Trabuio等使用多种方法对原发性血小板减少性紫癜的血小板计数(PLT<20X109/L)进行比较显示了良好的相关性[9],与本文结果一致.当血小板>100X109/L时,两台血细胞分析仪之间以及血细胞分析仪与显微镜计数法计数血小板的相关系数分别是0.858、0.749,P值均为0.000(P<0.01),差异有统计学意义,小红细胞、裂红细胞等对血小板计数有明显的影响.

从表3可以看到,各组的血小板检测结果均是XS1000i比显微镜计数法高,P<0.01,,差异有统计学意义,与梁瑞莲[10]季明德[11]、张霞等[12]的研究结果一致.所有101例标本经显微镜涂片检查均检出小红细胞或(和)裂红细胞,部分标本还伴有大血小板/巨血小板/血小板聚集现象等等.因此在使用阻抗法检测血小板/红细胞的血细胞分析仪如XS1000i、PENTRA120Retic时,若部分血小板参数缺失,应注意红细胞碎片、有核细胞的细胞质碎片、冷球蛋白、细菌、真菌、油脂等[13]的脉冲信号可能视为血小板信号而干扰实验结果,造成实验误差,导致血小板的假性升高[14,15],这时要进行显微镜计数法计数血小板或使用ICSH推荐的参考方法计数血小板,同时进行血涂片检查并在检验报告单上注明异常细胞的形态、数量和分布等等.

[1]闵迅,陈丽华,骆科允.XT-1800i血细胞分析仪不能提供完整血小板参数的原因及对策[J].现代检验医学杂志,2008,23:38.

[2]李影林.中华医学检验全书[M].北京:人民卫生出版社,2000:202.

[3]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京:东南大学出版社,2006:121-122.

[4]丛玉隆,尹一兵,陈瑜.检验医学高级教程[M].北京:人民军医出版社,2010:108.

[5]王永才.血液骨髓细胞检验诊断学[M].大连:大连出版社,1995:21-22.

[6]刘志洁,黄文源,刘方文.临床血液学及细胞学图谱[M].第3版.北京:科学出版社,2006:70-83.

[7]邹汉良,祝玲玲,蒋明,等.XS-800i血细胞分析仪对地中海贫血患者血小板参数检测的影响分析[J].国际检验医学杂志,2009,30 (7):639-640.

[8]王鸿利.实验诊断学[M].北京:人民卫生出版社,2005:35.

[9]Trabuio E,Valverde S.Antico F,et al.Performance of automated platelet quantification using different analysers in comparison with an immunological reference method in thrombocytopenic patients [J].Blood Transfus,2009,7(1):43-48.

[10]梁瑞莲,周远青,唐跃华,等.小红细胞对不同原理血液分析仪的血小板计数的影响[J].国际检验医学杂志,2009,30(7):699.

[11]季明德,顾万健.Sysmex XT-2000i检测血小板直方图分布异常时仪器计数与手工计数的比较[J].医学检验与临床,2007,18:69.

[12]张霞.影响Sysmex-1800i血液分析仪血小板计数因素复检原则的探讨[J].中国医药导报,2010,7(15):73

[13]Zandecki M,Genevieve F,Gerard J.Spurious counts and spurious results on haematology analysers:a review.Part I:platelets[J].Int J Lab Hematol,2007,29:4-20.

[14]彭文红,乐家新,兰亚婷,等."微孔故障"影响血小板计数及直方图变化的探讨[J].陕西医学检验,2001,16(3):30-31.

[15]Tatsumi N,Tsuda I,Funahara Y.Assessment of hematological data obtained by the aperture impedance method in blood from patients with thalassemia or hemoglobinpoathy[J].ICMR Annals,1998,8(1): 49-60.

Effect of microcytes/schistocytes on platelet count when deficiency of portion platelet parameters measured by XS1000i Hematology analyzer

ZHONG Qing,XU Yedong,WU Yongguo,et al.Department of Laboratory Medicine,Songgang People's Hospital,Shenzhen Guangdong 518105,China

ObjectiveTo investigate the effect of microcytes/schistocytes on platelet count when deficiency of portion platelet parameters measured by XS1000i hematology analyzer.MethodsAfter analyzed by XS1000i hematology analyzer,the samples which have MCV<80fl and loss partial platelet parameters were re-measured with the PENTRA120Retic hematology analyzer,microscopic platelet count and,Wright staining for platelets.ResultsWhen PLT>100X109/L,there were statistically significant differences in the platelet counts among XS1000i,PENTRA120Retic and microscopic counting(P<0.01);when PLT<100X109/L,there were no statistically significant differences in the platelet counts among XS1000i PENTRA120Retic and microscopic counting(P> 0.01).When MCV was 70~80fl,60~70fl and<60fl,respectively,the platelet counts of XS1000i were higher than those of microscopic counting,the difference was statistically significant(P<0.01).The results of microscope examination were as follows:all 101 specimens were detected and had microcytes or(and)schistocytes,of which 60 cases were accompanied with large platelets and/or giant platelets,and 4 cases were accompanied with large platelets and platelet aggregation.ConclusionsThe samples with MCV< 80fl and missing partial platelet parameters when analyzed by impedance hematology analyzer should be re-measured with the reference method recommended by ICSH or microscopic platelet counting,meanwhile,detect the morphology,number and distribution of abnormal blood cells by staining and microscopic examination.

Hematology analyzer;Platelet count;Microcyte;Schistocyte;Platelet parameters

R446.11+1

A

1674-1129(2014)03-0264-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2014.03.011

2013-10-29;

2014-2-25)

钟青,女,1970年出生,主管技师,主要研究方向为临床血液学.

许业栋,男,1967年出生,副主任技师.