复合微生态制剂与黄芪多糖对肉鸡生长性能、肠道菌群和免疫功能的影响

■王虹玲 刘丹丹 姜诗文 王家庆 汪 琢 孙天利

(1.沈阳工学院生命工程学院，辽宁抚顺113122；2.沈阳农业大学食品学院，辽宁沈阳110161)

随着集约化畜牧业和工业化养殖规模的日益扩大，防病促生长的化学药物及抗生素被广泛应用于饲料添加剂中。抗生素的滥用使细菌耐药性增强，并且造成畜产品中抗生素残留增加，直接危害人类健康。微生态制剂是新型的、无公害的饲料添加剂，具有调整并维持肠道菌群平衡、增强机体免疫力、促进畜禽生长发育的作用，使用方便且无药物残留[1]。目前，单一微生态制剂在肉鸡饲养中应用的报道较多。王全溪等[2]研究表明，在肉鸡饲粮中添加100 mg/kg的乳酸菌素可提高肉鸡的生长性能和抗氧化功能。Kala⁃vathy等[3]用由12种乳酸杆菌的混合制剂饲喂肉鸡，结果显示，肉鸡的日增重和饲料消化率均有所提高，并且乳酸菌制剂有效降低了肉鸡腹脂的沉积。关于单一的免疫增强因子的报道也较多，大量的研究表明，黄芪多糖具有调节免疫，抗病毒、抗肿瘤、抗衰老、抗氧化及降低血糖作用[4]。试验证实，在饲料中添加黄芪多糖可促进肉鸡生长、提高免疫器官指数，具有广阔的研发前景[5]。但是将多种益生菌组成的复合微生态制剂与免疫增强因子联合应用在肉鸡养殖中的报道并不多。为此，本文将复合微生态制剂与黄芪多糖联合使用饲喂肉鸡，旨在探讨由酵母菌、枯草芽孢杆菌、乳酸菌和黄芪多糖组成的复合微生态制剂对肉鸡生长性能、肠道菌群、新城疫抗体效价及免疫器官指数的影响，为其在肉鸡养殖中的应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

复合微生态制剂：酵母菌2×108CFU/g、枯草芽孢杆菌 3×108CFU/g、乳酸菌 1×108CFU/g、黄芪多糖2.5%。其中，酵母菌、枯草芽孢杆菌、乳酸菌购自中国农业微生物菌种保藏管理中心，黄芪多糖购自北京生泰尔生物科技有限公司。

1.2 试验设计与饲粮组成

将400只1日龄雌性健康肉鸡随机分为4组，每组4个重复，每个重复25只。试验预试期5 d，饲喂基础饲粮，正试期37 d。I组为对照组，饲喂基础饲粮；II、III、IV组为试验组，在基础饲粮中分别添加0.1%、0.2%、0.4%的复合微生态制剂及2.5%黄芪多糖。

基础日粮为参照《家禽营养需要》（NRC，1994）中肉鸡的营养标准配制的玉米-豆粕型日粮，其日粮组成和营养水平见表1。

1.3 饲养管理

试鸡各组分笼饲养，自由饮水，人工喂养。严格控制鸡舍内的光照、温度和湿度，按常规方法进行饲养管理和消毒工作，并以常规免疫程序对试鸡进行新城疫及法氏囊免疫。详细记录试验期间各组饲料的消耗情况以及试鸡的体重、健康状况。

表1 基础饲粮组成及营养水平（干物质基础）

1.4 测定指标和方法

1.4.1 生产性能

分别于14、21、28、35、42日龄对禁食12 h的试鸡称重，详细记录各阶段的饲料消耗量，计算出肉鸡的平均日增重、采食量和料重比。

1.4.2 肠道菌群数量

于试鸡14、28、42日龄时，每个重复中随机抽取3只（禁食12 h）称重，宰杀后无菌操作取盲肠内容物，置于灭菌生理盐水中摇匀，梯度稀释。其中大肠杆菌采用麦康凯培养基，乳酸菌采用MRS培养基，置于恒温培养箱，37℃下分别培养24 h和48 h，采用平板培养计数法分别对肠道大肠杆菌和乳酸菌进行计数。

1.4.3 免疫器官指数

于试鸡14、28、42日龄时，每个重复中随机抽取2只（禁食12 h）称重，宰杀后立即无菌解剖，摘取脾脏、胸腺和法氏囊，剔除脂肪后称鲜重，计算脾脏、法氏囊和胸腺的免疫器官指数。

免疫器官指数（mg/g）=免疫器官重量/活体重。

1.4.4 新城疫抗体效价

于试鸡14、28和42日龄时，每个重复随机选取2只，采颈动脉血，分离血清，并进行倍比稀释，采用V型血凝板检测血清中的血凝抑制抗体效价[6]。

1.5 数据统计与处理

应用SPSS 17.0统计软件中的ANOVA过程进行单因子方差分析，采用LSD法进行多重比较，P＜0.05为差异显著，结果用“平均值±标准误”表示。

2 结果分析

2.1 复合微生态制剂对肉鸡生长性能的影响(见表2)

表2 复合微生态制剂对肉鸡生长性能的影响

由表2可知，复合微生态制剂的添加对肉鸡平均日增重和料重比有不同程度的影响。其中，试验Ⅱ组在试验初期对肉鸡平均日增重作用效果不明显，随着日龄的增加，效果逐渐显著（P＜0.05）。试验各阶段，与对照组相比，各试验组有提高平均日增重降低料重比(各别组的数值除外)的趋势；其中，试验组Ⅲ对肉鸡生长性能的作用效果最好，平均日增重、提高了4.93%～14.41%（P＜0.05）；料重比降低了6.23%～16.57%（P＜0.05）。与对照相比，试验 IV 组除 14～21 d，21～28 d外，在其他日龄阶段均可显著提高肉鸡平均日增重（P＜0.05），但在降低料重比方面无明显作用趋势。

由此可见，在提高肉鸡平均日增重和降低料重比方面，Ⅲ组的效果最好。

2.2 复合微生态制剂对肉鸡盲肠菌群数量的影响(见表3)

从表3可知，添加复合微生态制剂以后，肉鸡盲肠内乳酸菌的数量均高于对照组，其中，Ⅱ组在各试验阶段乳酸菌数量与对照相组比分别提高了14.68%、6.65%和1.77%；Ⅲ组与对照组相比分别提高了16.12%、7.74%和4.30%；复合微生态制剂Ⅱ组和Ⅲ组均能显著降低肉鸡盲肠大肠杆菌的数量（P＜0.05），在14、28、42日龄阶段分别比对照组降低了5.81%、3.47%、2.05%和5.18%、4.59%、3.98%。除14 d外，试验Ⅳ组在改善肉鸡肠道菌群方面作用效果不显著（P＞0.05）。由此可见，试验Ⅲ组在改善肉鸡肠道菌落平衡方面效果最好。

表3 复合微生态制剂对肉鸡盲肠乳酸菌和大肠杆菌数量的影响(lg CFU/g)

2.3 复合微生态制剂对肉鸡免疫器官指数的影响(见表4)

由表4可知，复合微生态制剂Ⅲ组可显著提高肉鸡的免疫器官指数（P＜0.05）。Ⅱ组在提高肉鸡脾脏和法氏囊指数方面具有显著作用（P＜0.05）。在试验末期（42日龄），Ⅱ组脾脏指数、法氏囊指数和胸腺指数分别比对照组提高了14.10%、30.88%和6.29%。Ⅲ组与对照组相比，分别提高了16.03%、54.41%和21.71%。复合微生态制剂Ⅳ组能够提高肉鸡脾脏指数，但作用效果不显著（P＞0.05）；在法氏囊指数和胸腺指数方面，Ⅳ组和对照组相比有下降的趋势。试验结果表明，添加的复合微生态制剂浓度过高反而会影响肉鸡免疫器官的发育，Ⅲ组作用效果最好。

表4 复合微生态制剂对肉鸡脾脏指数、法氏囊指数和胸腺指数的影响(mg/g)

2.4 复合微生态制剂对肉鸡血清新城疫抗体效价的影响(见表5)

表5 复合微生态制剂对肉鸡血清新城疫抗体效价的影响(mg/g)

从表5可知，复合微生态制剂试验Ⅱ组和Ⅲ组均能提高肉鸡血清新城疫抗体效价，且Ⅲ组作用效果最好。在试验各日龄阶段，Ⅲ组数值均显著高于对照组（P＜0.05），比对照组提高了14.62%～30.17%。Ⅱ组与对照组相比提高了2.51%～11.81%。试验Ⅳ组对肉鸡新城疫抗体效价的影响有下降的趋势。由此可见，一定浓度复合微生态制剂可以提高肉鸡新城疫抗体表达水平，且Ⅲ组效果最好。

3 讨论

3.1 复合微生态制剂对肉鸡生长性能的影响

本研究将不同浓度的复合微生态制剂和2.5%的黄芪多糖配伍添加到肉鸡饮水中，结果表明，0.2%的复合微生态制剂和2.5%的黄芪多糖有助提高肉鸡的平均日增重，降低料重比。这是因为复合微生态制剂中存在的有益微生态成分可有效地补充各种消化酶，加强机体对饲料中营养成分的消化吸收，提高饲料利用率[7]；改善肠道微生态环境，进而提高肉鸡的生长性能[8]。胡顺珍等[9]将乳酸菌和芽孢杆菌组成的复合微生态制剂添加到肉鸡饲粮中，饲喂42 d后，肉鸡的平均日增重显著高于对照组（P＜0.05），料重比显著低于对照组（P＜0.05）。金鹿等[10]也通过试验证实，在饲料中添加复合微生态制剂与抗生素能使试验组肉鸡的平均日增重提高13.97%，显著高于对照组（P＜0.05），均与本试验的研究结果一致。

3.2 复合微生态制剂对肉鸡肠道菌群数量的影响

复合微生态制剂中的酵母菌和枯草芽孢杆菌可以为乳酸菌的生长创造有利的厌氧环境，乳酸菌代谢产生的乳酸会降低肠道pH值，进而抑制肠道中大肠杆菌等病原微生物的定植和生长，在动物肠道内建立正常的微生物区系，促进动物生长繁殖。董秀梅等[11]研究显示，饲粮中添加复合微生态制剂可显著地增加肉鸡肠道内乳酸菌和肠球菌的数量，抑制肠道内大肠杆菌的增殖。黄芪多糖作为免疫增强因子，具有增强免疫力、抗氧化、抗病毒等作用。黄芪多糖与复合微生态制剂联合使用时，可作为糖类物质被乳酸菌、酵母菌和枯草芽孢杆菌所利用，使肠道内有益菌大量繁殖；同时黄芪多糖进入肠道后会和大肠杆菌、沙门氏菌等有害菌抢占有利的定植位点，从而抑制病原菌的定植。魏炳栋等[12]研究表明，饲粮中添加黄芪多糖能够显著促进三黄肉鸡盲肠双歧杆菌和乳杆菌的增殖，抑制大肠杆菌的生长。本试验将复合微生态制剂与黄芪多糖配伍饲喂肉鸡，结果显示，0.2%的复合微生态制剂和2.5%的黄芪多糖能在14日龄和28日龄时显著提高肉鸡盲肠内乳酸菌的数量（P＜0.05），并且显著降低了肠道中大肠杆菌的数量（P＜0.05）。

3.3 复合微生态制剂对肉鸡免疫器官指数的影响

免疫器官的发育状态及机能强弱直接决定着禽类的免疫水平[13]，脾脏、法氏囊和胸腺分别是机体重要的外周免疫器官、体液免疫器官和淋巴器官，参与全身的细胞免疫和体液免疫，是体内产生抗体的重要器官。免疫器官指数可以作为衡量禽类机体免疫能力的重要指标，免疫器官重量的增加表明机体免疫能力的增强。本试验结果表明，添加0.2%复合微生态制剂和2.5%的黄芪多糖后，14、28日龄和42日龄肉鸡的脾脏指数、法氏囊指数和胸腺指数均显著高于对照组（P＜0.05），与柳志余[14]所报道的结果相符。

3.4 复合微生态制剂对肉鸡血清新城疫抗体效价的影响

多年来，新城疫一直是严重危害养鸡业的主要传染病之一。目前，通常选用新城疫血凝抑制抗体水平来评价肉鸡的体液免疫情况。新城疫抗体水平反映鸡新城疫疫苗免疫后机体特异性体液免疫反应[15]。研究表明，在基础饲粮基础上添加黄芪多糖、益生菌制剂后，可明显提高雏鸡血清新城疫抗体效价[16]。黄芪多糖可通过升高细胞蛋白激酶活性来影响机体免疫细胞的信号转导，进而发挥其免疫调节作用[17]。试验证实，复合微生态制剂中的有效成分可刺激机体免疫系统，使机体的免疫功能始终处在较高的活性状态，从而延长B细胞抗体分泌能力，延缓抗体滴度下降速度[18]。本试验结果表明，饲喂0.2%的复合微生态制剂和2.5%的黄芪多糖，能显著提高肉鸡血清新城疫抗体效价（P＜0.05），增强肉鸡免疫力。

4 结论

①0.2%的复合微生态制剂和2.5%的黄芪多糖添加在肉鸡试验中应用效果最好，能增强肉鸡的生长性能，显著提高平均日增重，降低料重比。并且在改善肠道菌群结构方面具有明显效果，可增加益生菌的数量，抑制肠道病原菌的生长。

②适量添加复合微生态制剂可以提高肉鸡法氏囊、胸腺以及脾脏等免疫器官指数，增加新城疫抗体效价，从而提高肉鸡免疫力。