外周血循环DNA在卵巢癌中研究进展

闫立志宋芳郝金奇余艳琴

(1.包头医学院，014060；2.内蒙古包钢医院，010059)

卵巢癌是严重威胁女性健康的的恶性肿瘤之一，由于缺少有效的早期诊断方法，其死亡率一直居妇科肿瘤之首，且发病率呈逐年上升的趋势。由于卵巢癌发病隐匿，早期症状不明显，缺乏有效的早期诊断方法和筛查指标，确诊的卵巢癌患者约70%已属晚期[1]。目前，临床最常用的诊断指标是血清学标志CA-125，多用于卵巢癌诊断及疗效观察[2]。但CA-125敏感性和特异性在卵巢癌不同分期、分型各不相同，预后判断价值是有限的，迫切需要寻找新型生物标志物[3]。循环DNA检测对卵巢癌的特异性基因进行确定具有重要的临床意义，是一种很有潜力的指标，有可能成为卵巢癌的早期诊断、疗效评估和预后判断等方面新的肿瘤标志物。

1 循环DNA研究进展

循环DNA是一种存在于血液及体液中的游离DNA。循环DNA在20世纪40年代前就已被发现[4]，由于缺乏高灵敏性和高特异性的分离方法，在较长时期内血中游离DNA与疾病相关性的研究进展缓慢，直到在近二十年PCR等检测技术的应用，使得这一领域有了较快的发展。正常人血液中存在微量游离DNA，在某些疾病状态下，循环DNA有不同程度的增高，尤其在肿瘤患者循环DNA浓度明显高于正常人[5]。伴有转移的肿瘤患者其浓度高于病灶局限者[6]。在癌症患者的血浆中检测循环DNA有利于早期癌症的诊断和预测肿瘤的发生；母体血浆中的定量分析循环DNA可用于检测某些胎儿发育异常；在移植监测和移植排斥反应的评估方面也取得了新的进展；在创伤和烧伤的严重程度分层等循环DNA研究也已经取得了可喜的成果，这些研究都提示循环DNA与疾病有着相关性[7]。Jylhv J等[8]调查发现循环DNA与一些代谢性疾病发病风险密切相关，使用荧光检测等高灵敏度技术定量检测循环DNA，发现高水平的循环DNA与代谢疾病风险和早期动脉硬化相关。Nicolaides等[9]研究母体血液循环DNA，证实循环DNA的染色体选择性测序分析可以筛查胎儿染色体非整倍体性，而且具有相当高的灵敏度。Huang等[10]研究肝癌患者循环DNA中检测细胞周期蛋白依赖性激酶4A(INK4A)启动子甲基化，发现与良性肝病相比肝细胞癌INK4A甲基化现象明显，表明了循环DNA在肝癌的诊断等方面是一种很有潜力的生物标志物。在疾病的预后监测及复发检测，Wroclawski等[11]人研究病理确诊或怀疑为前列腺癌血浆循环DNA，评估其在前列腺癌的诊断和潜在的预后价值。研究发现，一些肿瘤患者血浆中循环DNA具有与肿瘤组织中DNA相一致的分子遗传学改变，如DNA链稳定性的下降、癌基因与抑癌基因的突变、抑癌基因启动子的高甲基化以及微卫星不稳定与杂合性缺失等[12]。Gormally等[13]研究发现循环DNA可在疾病诊断之前就被检测出来，在很大程度上增加了其作为肿瘤诊断、复发监测指标的可能性。此外，研究还显示血中循环DNA与肿瘤的转移有密切的联系[14]。

2 循环DNA在卵巢癌中的应用

卵巢癌90%～95%为原发性，由于卵巢癌早期症状表现多不明显，不易被发现，易转移，预后差等特点，在妇科恶性肿瘤死亡率最高，但如果能够早期诊断、及时治疗，卵巢癌Ⅰ期5年存活率可达90%以上，Ⅱ期在70%～80%。循环DNA作为很有潜力的肿瘤标志物，有助于卵巢癌早期诊断、预后判断及肿瘤转移风险分析[15-16]。检测外周血中微量循环DNA的改变可反映肿瘤原发灶的特征。Kamat等[6]定量提取血浆循环DNA，荧光染色法定量，比较良、恶性肿瘤患者与健康人血浆循环DNA水平，存在显著差异。此外，研究表明循环DNA在监测卵巢癌疗效的评价及转移的风险评估有着重要的临床应用价值，肿瘤远处转移与血浆循环DNA水平具有一定的相关性，血中循环DNA水平较高的患者，发现转移肿瘤病灶的几率同样较高[17]。因此检测卵巢癌患者血浆DNA有可能作为一种反映患者分期以及预后的分子标志而应用于临床实践，有可能成为一种新的恶性肿瘤标志物。

3 循环DNA检测的优势

肿瘤标记物测定在卵巢癌的早期诊断及病情监测中有着重要的价值[18-20]。循环DNA作为一种很有潜力的指标，有较好重现性，在癌症的早期具有一定敏感性。标本获取方面比较便利，可连续采集易于随访追踪，避免了直接利用肿瘤标本进行分子生物学检测。肿瘤病理标本不仅标本来源存在一定的局限性，此外，还可避免细针穿刺包块吸取细胞而引起囊液外溢及癌细胞扩散的风险。

4 结语

综上所述，循环DNA检测具有标本采集便利、快捷、稳定性好等优点，对无症状的卵巢癌患者有可能成为早期诊断指标。通过定量分析循环DNA还可诊断肿瘤微小转移和早期复发，为疗效评价、制定治疗方案及预后判断提供了证据，提高卵巢癌治愈率。但作为一个有效的肿瘤标志物还存在不足之处，比如特异性不够理想，易产生假阳性等。因此，循环DNA发展成为一个有效的可用于临床常规检测肿瘤标志物还需进一步的研究。

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