浙江省主要青粗饲料霉菌毒素残留检测分析

郑会超，黄 新，吴建良，姜俊芳，宋雪梅，蒋永清

（浙江省农业科学院畜牧兽医研究所，浙江杭州310021）

据联合国粮农组织（FAO）估计，全世界每年大约有5%～7%的粮食和饲料受霉菌侵蚀而发生霉变，营养价值降低，严重失去饲用价值。霉菌产生的毒性代谢产物还会使动物发生慢性或急性中毒，霉菌毒素残留于动物产品中，通过食物链威胁人类健康。饲料中常见且危害较大的霉菌毒素有黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素、呕吐毒素以及伏马毒素等。浙江省位于长江三角洲地区，高温多雨的独特气候条件非常利于霉菌生长繁殖，在饲料作物生长或仓贮期间容易受到霉菌毒素的污染［1－2］。当前对单胃动物如猪、禽等精饲料中霉菌毒素污染的报道较多，而草食家畜如奶牛、肉牛、肉羊中青粗饲料霉菌毒素残留鲜见报道［3－4］。笔者从浙江省牛羊饲养量较大的金华、杭州、湖州、宁波等地抽样采集了代表性青粗饲料样品，检测了黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素A、呕吐毒素以及伏马毒素B1的残留情况，并与国内和欧盟的饲料已生标准进行比较分析，以期为广大草食家畜养殖企业和饲料生产企业提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 样品采集

2012年6～12月从浙江省金华、杭州、湖州、宁波、嘉兴和衢州地区的奶牛场、肉牛场和湖羊场采集了22份青粗饲料样品，详细采样情况见表1。所有样品在65 ℃鼓风恒温烘干后粉碎过1 mm 筛，在－20 ℃冰箱冻存待测霉菌毒素残留。

1.2 分析方法

采用免疫亲和柱净化－柱后光化学衍生高效液相色谱法检测青粗饲料中的黄曲霉毒素，方法的回收率在80%以上，黄曲霉毒素总量的检出限为1.2 μg／kg。采用进口ELISA 试剂盒检测玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素A、呕吐毒素和伏马毒素B1。ELISA 试剂盒由新加坡PRIBOLAB 提供，按试剂盒提供的方法进行测定。酶标板孔中赭曲霉毒素A浓度高于2μg／kg、伏马毒素B1浓度高于1μg／kg，玉米赤霉烯酮浓度高于1μg／kg，呕吐毒素浓度高于20μg／kg视为阳性样品。

2 结果与分析

浙江省主要青粗饲料霉菌毒素污染采样及检测结果见表1和表2。青粗饲料样品中多种霉菌毒素并存的情况较为严重，68.2%的样品中检测到3种及以上霉菌毒素残留，其中鄱阳湖草中5种霉菌毒素并存，野生谷壳中4种霉菌毒素并存。此外，杭州啤酒糟、湖州酱油渣、金华羊草、湖州稻草和嘉兴发酵药渣中并存2种不同的霉菌毒素，豆腐渣中仅检出伏马毒素B1残留。

浙江省青粗饲料中黄曲霉毒素的检出率很低，22份检测样品中仅在鄱阳湖草中检出，其中黄曲霉素G2（AFG2）残留含量3.7μg／kg，黄曲霉毒素B2（AFB2）残留含量6.2μg／kg，未检测到黄曲霉毒素B1（AFB1）和黄曲霉毒素G1（AFG1）残留。目前我国尚未制定青粗饲料样品霉菌毒素标准，只能参考精料标准。我国饲料卫生标准规定以AFB1计，玉米粉，花生饼粕、棉籽饼粕，菜籽饼粕＜50μg／kg；豆粕＜30μg／kg；奶牛精料补充料＜10μg／kg；肉牛精料补充料＜50μg／kg［5］。欧盟，以AFB1计，犊牛和羔羊饲料＜10μg／kg，泌乳奶牛饲料＜5μg／kg，其他牛羊饲料＜50μg／kg［6］。联合国粮农组织（2003）对世界各国关于奶牛饲料中黄曲霉毒素限量标准整理和分析显示，多数国家规定奶牛饲料中黄曲霉毒素总量须＜20μg／kg［7］。目前我国尚未制定青粗饲料样品霉菌毒素标准，只能参考精料标准。可见鄱阳湖草中黄曲霉毒素残留未超出我国及世界上多数国家对牛羊饲料的限量标准。

表1 浙江省主要青粗饲料中霉菌毒素残留含量（风干物质基础）Table 1 Mycotoxins residual content in forages in Zhejiang（air－dry matter basis）

赭曲霉毒素的检出率为18.2%，仅从鄱阳湖草、青贮笋壳、啤酒糟和野生谷壳中检出赭曲霉毒素。我国饲料卫生标准规定配合饲料和玉米中赭曲霉毒素残留须＜100μg／kg［8］。欧盟规定配合饲料中，猪＜50μg／kg，家禽＜100μg／kg，其他饲料＜250μg／kg［9］。可见4个阳性样品的赭曲霉毒素残留均低于我国及欧盟对牛羊配合饲料赭曲霉毒素残留的限量标准。

玉米赤霉烯酮、呕吐毒素和伏马毒素的检出率较高，分别为90.9%、72.7%和90.9%。我国饲料卫生标准规定配合饲料，玉米中玉米赤霉烯酮含量须＜500μg／kg，限定呕吐毒素犊牛配合饲料＜1 mg／kg，泌乳期动物配合饲料＜1mg／kg，牛配合饲料＜5 mg／kg，尚未对饲料伏马毒素残留进行限定［8－10］。欧盟规定犊牛、奶牛、绵羊、山羊补充料和完全饲料玉米赤霉烯酮含量须＜500μg／kg，限定呕吐毒素犊牛、羔羊补充料和完全饲料＜2mg／kg，猪配合饲料＜0.9 mg／kg其他动物＜5 mg／kg，限定伏马毒素犊牛和羔羊＜20mg／kg，成年反刍动物＜50mg／kg。可见，呕吐毒素的超标率较高，压块玉米秸、野生谷壳、毛豆秆和金华稻草的呕吐毒素含量超出我国犊牛和泌乳动物配合饲料限定标准，而玉米赤霉烯酮、呕吐毒素和伏马毒素阳性样品均低于我国及欧盟对牛羊饲料残留限量标准。

表2 浙江省主要青粗饲料中霉菌毒素残留汇总Table 2 Total residues of mycotoxins in forages in Zhejiang

3 讨论

霉菌毒素在浙江省青粗饲料中的超标率不高，人们重点关注的黄曲霉毒素的检出率也不高，与荷兰和捷克研究人员的调查结果相似［11－12］。不过浙江省及欧洲国家生鲜牛奶中黄曲霉毒素M1的检出率和超标率并不乐观［13－14］，提示除了青粗饲料外，还需关注精饲料黄曲霉毒素污染状况。浙江省青粗饲料中玉米赤霉烯酮的检出率很高，玉米赤霉烯酮被微生物降解后，其代谢产物对奶牛的危害更大［15］，提示在草食家畜实际饲养中尚需要密切关注玉米赤霉烯酮含量。草食家畜能够依靠瘤胃微生物降解呕吐毒素、伏马毒素和赭曲霉毒素，这三种毒素从饲料转移到牛奶的转化率较低［16－18］。压块玉米秸、野生谷壳、毛豆秆和金华稻草中呕吐毒素含量超出我国对犊牛和泌乳动物饲料的限量标准，提示尚需关注浙江省青粗饲料的呕吐毒素残留。伏马毒素和赭曲霉毒素在浙江省青粗饲料中的残留量平均值远远低于饲料卫生限定标准，表明浙江省的气候条件不利于青粗饲料生长及储存期间产毒烟曲霉和赭曲霉的生长，提示该两种毒素在浙江省草食家畜生产中的暴露风险较低。

综上，玉米赤霉烯酮是浙江省青粗饲料霉菌毒素的首要风险因子，呕吐毒素次之。青贮玉米是奶牛场的当家青粗饲料，占全混合日粮的30%以上；鄱阳湖草中5种霉菌毒素并存；压块玉米秸的呕吐毒素含量超标。因此，浙江省青粗饲料需重点关注青贮玉米、鄱阳湖草及压块玉米秸的霉菌毒素残留。

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［5］中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局.GB 13078－2001饲料卫生标准［S］.北京：中国标准出版社，2001.

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［8］中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局.GB 13078.2－2006 饲料卫生标准饲料中赭曲霉毒素A 和玉米赤霉烯酮的允许量［S］.北京：中国标准出版社，2006.

［9］European Commission.Commission Recommendation of 17 August 2006On the presence of deoxynivalenol，zearalenone，ochratoxin A，T－2and HT－2and fumonisins in products intended for animal feeding（2006／576／EC）［S］.Official Journal of European Union，2006，L 229：7－9.

［10］中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局.GB 13078.3－2007 配合饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的允许量［S］.北京：中国标准出版社，2007.

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［18］European Food Safety Authority.Opinion of the Scientific Panel on Contaminants in the Food Chain on a request from the Commission related to fumonisins as undesirable substances in animal feed［S］.The EFSA Journal，2005，235：1－32.