血清胸苷激酶1表达水平在对恶性肿瘤患者诊断及疗效评价中的临床价值

韩 亮 刘 勇

胸苷激酶1(thymidine kinase 1,TK1)是1种存在于细胞质中的激酶，含量高低与细胞的增殖程度相关[1]。健康人群血清中TK1浓度极其微量或检测不到，而恶性肿瘤患者血清中TK1水平显著升高，可达2～100倍[2]。我们采用免疫印记增强化学发光法检测恶性肿瘤患者化疗前后血清中TK1表达水平，并与健康人群进行对比，以探讨其在对恶性肿瘤诊断及疗效评价中的作用。

1 材料与方法

1.1 一般资料

收集2011年6月至2012年6月徐州市中心医院收治的，有明确细胞学或病理学诊断证实的100例恶性肿瘤患者血清。100例中肺癌35例，大肠癌10例，胃癌10例，乳腺癌15例，卵巢癌10例，恶性淋巴瘤5例，软组织肉瘤5例，其他肿瘤10例。患者年龄40～70岁，平均年龄(56.7±11.6)岁。门诊健康体检者20例，年龄30～65岁，平均年龄(46.8±10.7)岁。所有入选者排除黄疸、急性感染、胃溃疡或出血、女性月经期及脂血、溶血等因素；恶性肿瘤患者均有临床或影像学可测量病灶，健康体检者排除肿瘤。

1.2 方法

空腹采静脉血2 ml，3 h内以4000 r/min离心8～10 min分离血清，-20°冰箱保存备检。TK1浓度测定采用免疫印记增强化学发光法，具体操作按照试剂盒说明书进行。TK1测定值以2.0 pmol/L为标准阈值，>2.0 pmol/L为异常。

1.3 疗效评定

化疗2个周期后，按WHO标准统一评价[3]，分完全缓解、部分缓解、稳定和进展

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 不同实验组间TK1浓度测定结果比较

恶性肿瘤组血清TK1浓度显著高于健康人群组，2个周期化疗后，部分缓解组的TK1浓度明显下降，与化疗前及化疗后进展组比较有统计学差异，见表1。

表1 各组TK1浓度比较

2.2 不同实验组间TK1阳性检出率比较

恶性肿瘤患者化疗前TK1的阳性检出率明显高于健康人群组，与2周期化疗后进展组及部分缓解组间差异亦有统计学意义，见表2。

表2 各组TK1阳性检测率比较(例,%)

2.3 ROC曲线分析血清TK1浓度在恶性肿瘤早期诊断中的价值

本实验中，TK1检测恶性肿瘤的灵敏度为74%，特异度为95%。经ROC分析，其曲线下面积为0.943，95%可信区间为(0.891，0.994)，经检验，差异有统计学意义(P<0.001)。结果表明：TK1对恶性肿瘤的早期诊断具有较高的准确性，见图1。

图1 TK1诊断恶性肿瘤的ROC曲线分析

3 讨论

早在上个世纪60年代，Weissman等已证实TK是胸腺嘧啶核苷合成DNA的关键酶[4]。后期的研究表明，TK有TK1和TK2二种同工酶，其中，TK1的水平与细胞周期中的S期(DNA合成期)的DNA合成密切相关，被称为是DNA合成期的特殊酶。TK1参与细胞周期的调控，并与细胞分裂密切相关。在1个完整细胞增殖周期中，TK1在G1期(DNA合成前期)时含量比较低，到S期以后逐渐升高，至G2期(DNA合成后期)时达到最高[5,6]。TK1水平与细胞增殖状态密切相关，可以作为细胞增殖标记物来检测细胞的增殖活性[7]。同时，基于恶性肿瘤细胞的高增殖特点，TK1还可作为1种敏感特异的肿瘤标记物来反映恶性肿瘤的增殖状态[8～10]。目前，TK1不仅作为恶性肿瘤的疗效判断和预后指标，同时也是恶性肿瘤筛查和诊断的良好标志物[11,12]，在肺癌、乳腺癌、膀胱癌、大肠癌等恶性肿瘤中已有相关报道[13,14]。

本实验表明，TK1在恶性肿瘤患者中的浓度是(3.65±2.31)pmol/L，与健康人群组相比，其差异有显著性(P<0.01)；其作为恶性肿瘤的辅助筛查指标，特异度为74%，灵敏度为95%，ROC曲线下面积为0.943，可信度较高。与本实验结果相近，国内一项纳入35000例患者的大宗研究结果同样显示，血清TK1可以作为1个可靠的指标，对恶性肿瘤有着预测及早期诊断的意义[15]。同时，在化疗过程中，TK1的表达水平变化与肿瘤的控制率有一定的关系，表现为，肿瘤部分缓解组的TK1水平下降，而进展组的TK1水平升高，其原因与肿瘤细胞的增殖程度高低有关。本实验结果与相关文献的报道一致[16～18]。

TK1的表达水平与某些肿瘤的预后存在密切联系。Sergej等的研究证实，在慢性淋巴细胞白血病患者中，血清高TK1浓度提示患者预后不佳，部分患者发展为大B细胞淋巴瘤[19]。Yan Xu等的研究证实，组织中TK1表达强度与病理学基质侵犯程度有一定相关，两者联合，可以更好的判断分期为T1的肺腺癌患者的预后，高TK1表达的患者提示预后不佳[20]。在本实验中，可以发现，随着肿瘤病期的发展，血清TK1浓度有升高趋势，但因为入组病例数不足，且大部分病例均为中晚期患者，因而不能够进行统计学分析。今后的研究可以通过纳入足够的病例数，判定分析两者间的关系。

综上所述，血清TK1表达水平对恶性肿瘤的诊断及疗效评价具有重要的参考价值，在临床上可以作为恶性肿瘤患者常规的血清学标志物检查指标。

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