化浊解毒方与吡格列酮对胰岛素抵抗大鼠糖脂代谢的影响

章清华,吴深涛,闫冬雪,周 静,周 祥,史翠娟

(1.天津中医药大学第一附属医院,天津300193;2天津市南开医院,天津300100)

胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)是2型糖尿病发生发展的主要因素之一,导致胰岛素抵抗的机制复杂,早期的研究发现,脂质代谢异常及其脂毒性既是胰岛素抵抗的结果,又是胰岛素抵抗的重要致病因素。前期临床研究表明,化浊解毒法及方药——化浊解毒颗粒在对抗糖、脂毒性相关胰岛素抵抗方面疗效确切。[1]本研究通过研究化浊解毒方和吡格列酮对胰岛素抵抗大鼠的干预作用,进一步探讨其对糖脂代谢的影响,明确其作用机制。

1 材料与方法

1.1 动物及饲料 6周龄雄性SPF级SD大鼠(中国医学科学院医学动物研究所提供)。普通饲料由华荣科技有限公司提供,高脂饲料依照文献资料[2]配制,即普通饲料中加入20%的脂肪(50%猪油和50%蛋黄粉)和20%蔗糖。

1.2 药物及试剂 化浊解毒方颗粒(组成:黄连、大黄、僵蚕、枳实、清半夏、柴胡、黄芩、干姜 、佩兰等),天津中医药大学第一附属医院药厂制备,批号101003,实验时用蒸馏水配制成所需浓度的溶液;链脲佐菌素(STZ)购自美国Sigma公司;胰岛素放免试剂盒购自中国原子能科学研究院同位素研究所。

1.2 方法

1.2.1 实验动物和分组 选取6周龄雄性SD大鼠,适用性喂养1周后,将SD大鼠高脂饲料喂养10周后,按25 mg/kg体重的剂量一次性尾静脉注射STZ(溶于0.1 mmol/L柠檬酸缓冲液,pH4.4)。造模成功的标准为:于72 h后禁食12 h,用20%葡萄糖溶液2 g/kg灌胃,0和120 min血糖分别大于7.0和11.1 mmol/L。将造模成功的大鼠随机分为实验组(化浊解毒方组)、吡格列酮组、模型组,每组16只。空白组大鼠始终以普通饲料喂养。

1.2.2 给药方法 实验组予化浊解毒颗粒按生药3g/(kg·d)灌胃给药,吡格列酮组按0.3 mg/(kg·d)灌胃给药,模型组与空白组灌服生理盐水,连续处理8周。

1.2.3 血清采集及观察指标 各组大鼠在灌胃治疗前目内眦静脉丛取血,治疗8周后经腹主动脉取血。检测空腹血糖(FBG)、血浆胰岛素(INS)、三酰甘油(TG)、胆固醇(CHOL),计算胰岛素敏感指数(insulin sensitive index,ISI),血糖、三酰甘油及胆固醇采用全自动生化分析仪检测;血清胰岛素采用放免法测定,其中ISI=Ln[1/(FBG×FINS)]。

1.3 统计学处理 采用SPSS 15.0软件进行统计分析,计量资料数值以( x±s)表示,多组间资料比较用单因素方差分析。

2 结果

见表1。

表1 各组血糖、胰岛素、三酰甘油、总胆固醇水平及ISI( x±s)

3 讨论

过多的三酰甘油在胰岛中堆积会对胰岛β细胞产生毒性作用,引起继发性的胰岛素分泌障碍,降低了其他组织对胰岛素的敏感性,所以三酰甘油在体内过剩时,则导致糖尿病、肥胖等[3]。控制高脂血症可改善胰岛β细胞分泌功能和减少胰岛素抵抗,对胰岛β细胞脂性凋亡具有一定的保护作用,改善糖代谢[4]。

吡格列酮为过氧化物酶增值活化受体γ(PPARγ)激动剂。PPARγ于脂肪组织中有高水平表达[5],在脂肪细胞分化、脂代谢、糖代谢及胰岛素抵抗、炎性反应等方面起着重要的作用,动物及临床研究发现,应用PPARγ激动剂噻唑烷二酮类(TZDs),可使血高密度脂蛋白(HDL)升高,低密度脂蛋白(LDL)、三酰甘油(TG)降低,纠正脂质代谢紊乱。在胰岛素抵抗的动物模型和临床研究中,TZDs通过增加胰岛素敏感性而刺激肌肉葡萄糖的利用和抑制肝糖元的输出,降低血糖[6]。本研究中,经吡格列酮治疗后,模型鼠血糖、血脂及胰岛素敏感指数均得到明显改善。

浊毒是导致2型糖尿病发病的重要因素,并贯穿糖尿病病变之始终[7-9],对应的化浊解毒法及方药在前期临床研究中,证明其在抗糖、脂毒性相关胰岛素抵抗方面疗效确切,该方以古方升降散化裁,清代医家杨栗山谓其“盖取僵蚕、蝉蜕,升阳中之清阳;姜黄、大黄,降阴中之浊阴,一升一降,内外通和,而杂气之流毒顿消矣”(《寒温条辨》卷四);更以黄连清胃肠之热,合大黄为君清热解毒,荡涤浊邪;加柴胡、黄芩为臣清利少阳,泻肝胆而疏理脾胃;白芍柔肝敛阴,辅佐以不伤阴。枳实理气导滞行浊;清半夏降浊合黄连辛开苦降,疏畅中焦;佩兰和胃化浊消脾瘅;干姜辛温以暖中焦,两者相合亦制它药之苦寒,全方共奏化浊解毒,清肝和胃之功。本研究中,经化浊解毒方治疗后,模型鼠血糖、血脂及胰岛素敏感指数改善明显,且与吡格列酮组相比,在降低三酰甘油方面,化浊解毒方具有更好的效果。

化浊解毒方改善糖代谢,改善胰岛素抵抗,除降糖本身因素外,还可能与其降低三酰甘油,减少脂毒性有关,其减少脂毒性的机制,可能不仅限于类似吡格列酮的激活PPARγ,需要进一步的研究进行探索。

[1]吴深涛,武娜杰,张罡,等.化浊解毒法对2型糖尿病葡萄糖毒性作用的临床观察[J].天津中医药,2005,22(2):11.

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[7]吴深涛.糖尿病中医病机新识[J].中国中医基础医学杂志,2005,11(11):808-811.

[8]吴深涛.论浊毒与糖尿病糖毒性和脂毒性的相关性[J].中医杂志,2004,45(9):647-649.

[9]吴深涛,闫冬雪.从浊毒论糖尿病血脂异常之防治[J].中华中医药杂志,2009,24(8):1047-1049.