化学发光免疫分析技术在跟踪儿童乙型肝炎疫苗免疫效果中的动态观察

李华荣

化学发光免疫分析法(CLIA)是把免疫反应与发光反应结合起来的一种定量分析技术。既具有发光检测的高度灵敏性，又具有免疫分析法的高度特异性。该技术其灵敏度高于包括放射免疫(RIA)、酶联免疫(EIA)在内的传统检测方法。在以往评定乙型肝炎(乙肝)疫苗免疫效果，检测人群中乙肝表面抗体(抗-HBs)阳性率及浓度值没有理想的定量检测手段，只能采取定性或半定量方法，使之在制订乙肝免疫规划时受到制约。吉林省白城市疾控中心2011年8月首次应用化学发光免疫分析新技术，跟踪儿童乙肝疫苗免疫效果的动态指标。使吉林省白城市3～11岁儿童抗-HBs的阳性率及抗体浓度双项指标得以量化，为乙肝免疫规划工作提供了科学、客观、动态的参考数据。下面就其新技术应用情况简述如下。

1 材料与方法

1.1 仪器设备 化学发光免疫分析仪，由安图实验仪器(郑州)有限公司生产，产品型号Lumo，化学发光法抗-HBs检测试剂盒由郑州安图生物工程股份有限公司生产。

1.2 检测对象 采用多阶段、分层、整群抽样方法，对2003～2010年出生儿童为检测对象。在注射疫苗前检测抗-HBs浓度，由专职护士采取静脉血3 ml，送检验室检测，检测结果以＜10 mIU/ml为阴性，对乙肝病毒(HBV)感染无保护性，需注射乙肝疫苗。≥10 mIU/ml为阳性，对普通人群具有足够的保护作用［1］。暂时无需注射乙肝疫苗。除此之外，要登记其姓名、性别、出生年月、乙肝疫苗初免完成情况 、初免注射乙肝疫苗剂量、乙肝患病家族史等相关内容。2年期间，共检测3～11岁儿童1248名，其中男性575名，女性673人，男女性别比为1∶1.17。

1.3 检测方法 将3 ml静脉血离心沉淀，取无溶血、无乳糜的血清检测。使用上述专用仪器，专用试剂盒，严格按操作规程检测。试剂盒效期内使用。

2 结果

2.1 被检测儿童，抗-HBs阳性率达73.56%，抗-HBs≥10 mIU/ml，平均浓度771.63 mIU/ml，并随着年龄增长双项指标均呈下降趋势，见表1。

表1 1248名儿童抗-HBs阳性、浓度值检测结果

3个年龄组间抗-HBs阳性率，经统计学处理χ2=51.86，P＜0.01差异有统计学意义。

2.2 男女性别间抗-HBs阳性率及抗体浓度值检测结果，见表2。

表2 1248名儿童男女性别间抗-HBs阳性、抗体浓度检测结果

男女性别间阳性率经统计学处理，χ2=1.36，P＞0.05，差异无统计学意义。

3 讨论

进入21世纪以来，乙肝疫苗不但在新生儿中普种，并已在成人中广泛应用，其免疫效果已经得到了充分肯定。随着卫生知识的普及及人群对身体健康的关注，人们逐渐认识到，用注射疫苗预防疾病是最经济、最有效的手段。实践证明通过接种乙肝疫苗而产生的保护性抗体不但可以预防乙肝，又可以减少因乙肝而引起的肝硬化、肝癌的发生。可以说，它不但是乙肝疫苗，它也是肝硬化疫苗、肝癌疫苗。

吉林省白城市于1991年按卫生部《全国乙肝疫苗免疫接种方案》的要求，已把乙肝疫苗纳入新生儿计划免疫方案。乙肝计划免疫20年来，对于儿童的抗-HBs免疫效果，一直没有确切的量化指标。本次检测方法采用最先进的化学发光免疫分析技术，搜集2年来的1248名3～11岁儿童血清样本，跟踪检测，使本市儿童乙肝计免结果科学客观地反映出来，为今后制定免疫规划提供了科学依据。

乙肝传播途径主要是血液、胎传和接触性传播。经口腔传播乙肝的问题已经得到证实［2］。白城市中小学生吃“小饭桌”的比较多，又有生日聚会或经常光顾德克士、肯德基快餐、街头食品作坊等餐饮场所，除需预防血液传播和母婴途径传播外，更要防止“密切接触”中的经口传播乙肝。这就需要计免工作者对儿童中抗-HBs浓度值＜10 mIU/ml的阴性易感者实施加强免疫措施。对于抗-HBs≥10 mIU/ml的儿童，什么时间需加强乙肝疫苗免疫则视其抗-HBs浓度的高低而定，浓度值越高，加强免疫的时间可适当延长。此次检测结果显示，在男女性别的抗-HBs阳性率分别为71.48%和75.33%，χ2=1.36，P＞0.05，其差异无统计学意义，这一结果与相关报道不相一致［3］，可能存在地区间差异，或者与使用的疫苗生产厂家不同及与抽样误差有关。

在乙肝计划免疫实施以前，我国人口平均乙肝表面抗原(HBsAg)感染率为10%［4］，可谓是“肝炎大国”，计免实施后的2009年白城市3～5岁儿童HBsAg感染率就降至0.55%［5］取得骄人的计划免疫成果。然而，这不应该是引为骄傲的理由，要想巩固这一成果是要付出艰辛的努力。因为通过本次检测结果得知，虽然新生儿出生后按免疫程序接种了3针5 μg乙肝疫苗。并且到3～5岁时保护性抗体阳性率仍达83.38%，抗体浓度在878.04 mIU/ml。但是随着年龄的增长，到6～8岁、9～11岁两个年龄段时，乙肝抗体保护率下降至78.00%和62.34%，抗-HBs平均浓度值分别降至732.48 mIU/ml和704.36 mIU/ml，并且各年龄组间抗-HBs阳性率差异有统计学意义，(χ2=51.86，P＜0.01)。这说明出生后虽然全程接种了乙肝疫苗，但当生长至3～5岁、6～8岁、9～11岁三个年龄段时分别有 16.62%、22.00%和37.66%的儿童有感染HBV的风险。全国高等医药院校教材，《传染病学》第八版，认为接种后随着时间的推移，部分人抗-HBs水平会逐渐下降，如果少于10 mIU/ml，需加强注射一次［6］，为了掌握这部分人的抗-HBs水平，就必须实施跟踪监测，以掌握其抗-HBs的动态指标，适时加强注射乙肝疫苗，提高这部分易感者的抗-HBs免疫水平是我们疾控工作者需要努力的目标。

［1］郑州安图生物工程股份有限公司.乙型肝炎病毒表面抗体定量检测试剂盒(化学发光法)说明书，2013.

［2］薛承岩.经口腔途径传播和感染乙型肝炎病毒的调查.中华流行病学杂志，1988(1):21-22.

［3］林平，朱灵芝.365名小学生接种国产酵母乙肝疫苗5年免疫效果观察.疾病控制杂志，2004，8(1):79.

［4］骆抗生.乙型肝炎基础与临床.北京:人民卫生出版社，1997:187.

［5］刘权，周湛，崔柏峰，等.白城市3～5岁儿童乙型肝炎疫苗免疫效果评价.中国计划免疫，2007，13(1):53.

［6］李兰娟，任红.传染病学.北京:人民卫生出版社，2013:43.