气相色谱法测定平菇中16种有机磷农药残留量

周长红

（云南省临沧市临翔区农产品质量安全检测站，云南 临沧 677000）

平菇在栽培种植过程中会发生虫害，如蚊蝇的幼虫、蛆、螨害[1]等，一般采用农药防除这些害虫。有机磷农药是最常用的一类农药，约占全部农药的70%[2]。施用有机磷农药虽然可以防除这些害虫，但如果施药方法不当，会在平菇上留下农药残留，一旦这些农药残留进入人体，会对人体健康造成影响。因此，建立平菇中多种有机磷农药残留的测定方法，在指导平菇栽培种植上正确使用有机磷农药、防止有机磷农药残留超标的平菇上市销售以及保障人体健康等都具有重要的意义。一般测定有机磷农药残留量的方法有气相色谱法[3－5]、液相色谱法[6,7]、气相色谱质谱联用法[8,9]、液相色谱质谱联用法等[10,11]。本文在参考以上文献的基础上，采用乙腈萃取平菇样品中的16种有机磷农药残留，然后用DB－17中极性石英毛细管柱分离，气相色谱－火焰光度检测器（GC－FPD）测定平菇中的16种有机磷农药残留量，方法简单、快捷、准确且有实用价值。

1 材料与方法

1.1 主要仪器与试剂

Agilent 6890N型气相色谱仪，带火焰光度检测器、石英毛细管柱，DB－17型 (30 m×0.53 mm×1.0 μm)；飞利浦HR2864型捣碎机；美国DIAX900型匀浆机（13 500 R·min－1）；美国OA－SYS型氮吹仪；QL－861旋涡混匀器。丙酮（分析纯），重蒸后使用；氯化钠、乙腈均为分析纯。150 mL锥形瓶、100 mL具塞量筒、10 mL刻度试管、150 mL烧杯等。

标准溶液敌敌畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、氧化乐果、二嗪磷、乐果、甲基对硫磷、毒死蜱、对硫磷、水胺硫磷、对硫磷、丙溴磷、三唑磷、伏杀硫磷、亚胺硫磷等，浓度均为1 000 μg·mL－1，购于天津环境监测中心。

1.2 气相色谱条件

进样口温度220℃；检测器温度250℃；柱温为程序升温，即150℃保留1 min，以8.0℃·min－1升至250℃，保持10 min；载气为氮气，纯度＞99.999%，流速10 mL·min－1；燃气为氢气，纯度＞99.999%，流速为75 mL·min－1；助燃气为空气，流速为100 mL·min－1；进样方式为不分流进样，自动进样器进样；进样量为1.0 μL。

1.3 实验材料

实验材料为平菇，2010年7月21日购于昆明市江岸小区农贸市场。

1.4 标准溶液的配制及标准曲线的绘制

取标准品溶液（浓度为1 000 μg·mL－1）1 mL移入25 mL的容量瓶，用丙酮稀释后定容至25 mL，配制成浓度为40 μg·mL－1的标准储备液。氧化乐果、伏杀硫磷、亚胺硫磷各取5 mL，其余13种有机磷标准储备液各取2.5 mL，移入50 mL容量瓶，用丙酮定容至50 mL，即得浓度为 2.0 μg·mL－1（氧化乐果、伏杀硫磷、亚胺硫磷浓度为4.0 μ·mL－1）的16种有机磷农药的混合标准溶液，再用丙酮稀释，配制成 0.05 μg·mL－1、0.1 μg·mL－1、0.2 μg·mL－1、0.4 μg·mL－1、0.6 μg·mL－1、1.0 μg·mL－1等系列浓度，分别测定其对应的峰面积，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线。

1.5 试验步骤

将平菇样品放入捣碎机中捣碎，准确称取25 g样品放入150 mL锥形瓶中，加入乙腈50 mL，在匀浆机中高速匀浆40 s，过滤到装有7 g～10 g氯化钠的具塞量筒中，振摇1 min，静置约0.5 h，使水相和乙腈相分层，取上层乙腈相液10 mL，置于150 mL烧杯中。

用滴管将量筒中剩余的乙腈相取出，弃掉，留水相层。用移液管取水相10 mL放入25 mL具塞试管中，加入10 mL乙腈，在旋涡混匀器上提取1 min，静置15 min后取上层乙腈相9 mL并入150 mL烧杯中，将烧杯放到水浴锅上（水浴温度80℃）并通入氮气，使乙腈蒸发近干，取出烧杯使杯内的温度降至室温，加入2 mL的丙酮溶解样品，盖上铝箔，备用。

将上述样液完全转移至10 mL的刻度试管中，再用约3 mL丙酮，分3次冲洗烧杯，并转移至刻度试管中，最后定容至5 mL，在旋涡混匀器上混匀，倒入2 mL进样瓶中，上机分析。

1.6 方法回收率及检出限的测定

称取不含上述16种有机磷农药的平菇样品4份，每份25 g，其中1份为对照，其余3份分别加入浓度为2.0 μg·mL－1（氧化乐果、伏杀硫磷、亚胺硫磷浓度为4.0 μg·mL－1）的16种有机磷农药混合标准工作液1.25 mL，摇匀，放置30 min后按照上述处理方法和仪器条件进行回收率测定，方法检出限按3倍信噪比计算。

2 结果与讨论

2.1 色谱图

2.1.1 平菇样品基质色谱图

平菇样品基质色谱图见图1。

由图1可以看出，平菇样品基质色谱图基线平稳，对16种有机磷农药的测定没有影响。

2.1.2 平菇样品中添加16种有机磷标样色谱图

在平菇样品中添加16种有机磷农药标准，使样品中氧化乐果、伏杀硫磷、亚胺硫磷的浓度为0.2 mg·kg－1，其余13种有机磷农药的浓度为0.1 mg·kg－1，然后按1.4处理样品得到的色谱图见图2。

2.2 保留时间和标准曲线

16种有机磷农药保留时间及标准曲线的线性回归方程、相关系数见表1。

表1 16种农有机磷农药保留时间及线性回归方程、相关系数

由表1可以看出，相关系数为0.9959～0.9999，说明标准曲线线性相关性好，满足定量分析需要。

2.3 16种有机磷农药保留时间以及在平菇样品中的回收率、相对标准偏差及检出限测定结果

在不含农药残留的平菇样品中添加16种有机磷农药标准液，使样品中氧化乐果、伏杀硫磷、亚胺硫磷浓度为0.2 mg·kg－1，其余 13 种有机磷农药的浓度为 0.1 mg·kg－1，然后按1.4处理样品，测定16种有机磷农药在平菇样品中的回收率、相对标准偏差及检出限，结果见表2。

表2 16种有机磷农药在平菇中的回收率、相对标准偏差及检出限测定结果

由表2可见，在平菇基质样品中添加16种有机磷农药，其平均回收率介于75.2%～105%之间，相对标准偏差小于 9.9%，检出限为 0.004 mg·kg－1～0.03 mg·kg－1。

2.4 讨论

本文试验采用乙腈提取样品中的16种有机磷农药残留，然后用DB－17石英毛细管柱分离，火焰光度检测器测定。标准曲线线性相关性好，16种有机磷农药的平均回收率、相对标准偏差和检出限测定结果表明，方法具有较好的准确度、精密度和灵敏度，满足测定多农药残留时对准确度、精密度和灵敏度的要求[12]。方法同时具有操作简单、分析速度快等优点。采用以上方法，对100余份平菇样品中的16种有机磷农药残留量进行了测定，得到满意结果。

[1]管道平，胡清秀.食用菌农药残留限量与产品质量安全[J].中国食用菌，2008，27(2)：3.

[2]仲维科，郝戬，孙梅心.我国食品的农药污染问题[J].农药，2000，39(7)：1－4.

[3]晋玉霞，白红进，孙红专.毛细管气相色谱法快速测定粮食中多种有机磷农药残留[J].中国卫生检验杂志，2006，16(3)：303,379.

[4]林文华，罗惠明，菜颖.气相色谱法测定蔬菜、水果中多种有机磷农药残留[J].中国卫生检验杂志，2008，18(1)：73－74.

[5]于静，周正香，朱蕾.GC－NPD标准加入法测定有机磷的实验室比对方法[J].农药，2008，47(9)：657－660.

[6]刘铮铮，李丽，王静，等.高效液相色谱－柱前衍生法测定水中有机磷除草剂[J].中国环境监测，2009，25(5)：35－38.

[7]叶江雷，弓振斌，林芳.茶叶中水胺硫磷、亚胺硫磷、甲基对硫磷和伏杀硫磷农药残留的高效液相色谱法测定[J].厦门大学学报，2007，46(3)：441－444.

[8]周爽.用GC－MS法测定食品中11种有机磷农药的残留[J].中国卫生检验杂志，2008，18(3)：442－443.

[9]杨基峰，左慧敏，何旭元.茶叶中有机磷农药残留量的GC－MS测定[J].分析实验室，2006，25(7)：67－70.

[10]张庆斌，张睿，王海涛.高效液相色谱法串联质谱法对栀子中11种有机磷农药残留的检测[J].分析测试学报，2010，29(1)：73－76.

[11]刘敏，端裕树，宋苑苑，等.分散固相萃取－液相色谱－质谱检测蔬菜水果中氨基甲酸酯和有机磷农药[J].分析化学研究报告，2006，34(7)：941－945.

[12]农业部农药检定所.农药残留量实用检测方法手册（第一卷）[M].北京：中国农业出版社，1995.