胃腺癌组织中P53、Ki－67的表达及其临床意义

李 慧 时 阳 孙 逊 王丽波 孟祥伟 (吉林大学第一医院胃肠内科，吉林 长春 3002)

胃癌发生、发展是多因素、多阶段、多基因变异的病理过程，其形成是由数个基因改变累积的多步骤过程组成，包括癌基因的激活和肿瘤抑癌基因的失活〔1〕。其中P53基因是迄今发现与人类肿瘤关系最为密切的抑癌基因，其突变或缺失可导致细胞恶化〔2〕。Ki-67是判断细胞增殖活性的重要指标〔3〕。本文探讨胃癌组织中P53和Ki-67蛋白表达的关系及与胃癌生物学行为的相关性。

1 材料与方法

1.1 一般资料 收集2009年1月至2011年6月吉林大学第一医院经术后病理证实为胃腺癌的住院患者290例，其中男216例(74.4%)，女74例(25.6%)，年龄28～83岁，平均58.3岁。术前均未行放化疗。胃癌TNM分期采用2003国际抗癌联盟(UICC)制定的TNM标准。组织分型采用Lauren分型(肠型、弥漫型、混合型)和 Borrmannan分型(0/Ⅰ/Ⅱ和Ⅲ/Ⅳ)。P53、Ki-67试剂盒均采用福州迈新生物技术开发有限公司的即用型免疫组化EliVision Plus试剂盒;抗体选用鼠抗人P53蛋白免疫组化单克隆抗体，鼠抗人Ki-67抗原免疫组化单克隆抗体。

1.2 P53及Ki-67测量方法 采用EliVision Plus免疫组织化学染色方法检测胃腺癌中P53和Ki-67的蛋白表达，均按照试剂盒说明书的染色步骤进行，所有标记均设阳性对照并用正常血清代替一抗做阴性对照。P53和Ki-67阳性染色为棕黄色颗粒，均为核表达，P53阳性细胞以40倍高倍镜下记数共1 000个细胞的阳性细胞数所占比例为标准，＜10%为(－)，≥10%为阳性;Ki-67阳性细胞以50倍高倍镜下记数1 000个细胞的阳性细胞数所占比例为标准，＜50%为(－)，≥50%为(+)。

1.3 统计学处理 采用SPSS16.0软件进行χ2检验。

2 结果

2.1 胃腺癌中P53和Ki-67蛋白的表达 290例胃腺癌中P53阳性表达136例，阳性表达率为46.9%(136/290);Ki-67阳性表达228例，阳性表达率为78.6%(228/290)。

2.2 胃腺癌中P53和Ki-67蛋白表达阳性率与临床病理指标的相关性 290例胃腺癌中P53蛋白阳性表达与肿瘤部位、Lauren分型、Borrmannan分型、分化程度、有无远处转移相关(均P＜0.05)，而与患者性别、年龄、肿瘤大小、浸润深度、TNM分期、淋巴结转移无相关性(均P＞0.05);Ki-67蛋白阳性表达与Lauren分型、Borrmannan分型、分化程度、浸润深度、淋巴结转移相关(均P＜0.05)，而与患者性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、TNM分期、有无远处转移无相关性(P＞0.05)。见表1。

2.3 胃腺癌中P53和Ki-67蛋白表达的关系 290例胃腺癌中P53和Ki-67双阳性121例，双阳性47例，仅P53阳性15例，仅Ki-67阳性107例，两者呈正相关(r=0.292，P＜0.05)。

表1 胃腺癌中P53和Ki-67蛋白表达阳性率与临床相关指标的关系〔n(%)〕

3 讨论

胃癌的发生、发展是一个多阶段、多基因参与的复杂过程，癌基因的激活和抑癌基因的失活与肿瘤的发展有密切联系。野生型P53基因是细胞生长的负调控因子，具有稳定基因组、调节转录、抑制细胞周期进展、促进凋亡以及抑制血管形成等抑癌功能〔4〕;可因突变、缺失、重排等形式失活，失去对细胞生长、凋亡、DNA修复等调节作用，由抑癌基因变为癌基因〔5〕;在正常组织用常规免疫组化难以检测出，而突变后P53蛋白稳定性增强，半衰期延长，可被检测到。国内外研究表明，胃癌、肺癌、肝癌、乳腺癌、结直肠癌等肿瘤均存在P53蛋白过表达〔6〕。

研究所示P53的表达与年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、Lauren分型、Borrmannan分型、临床分期等密切相关，本研究结果与此基本一致〔7〕。在性别及肿瘤大小上不同结果可能是由于病例标本数量及检测手法等不同所致。Deveci等〔8〕报道42例胃腺癌中P53表达48%，男性、低分化、小肿瘤(≤3 cm)、有明显炎症反应和有淋巴管浸润阳性率更高，大多数P53阳性和＞5个淋巴结转移的胃癌患者预后更差。对于Lauren分型，相关研究表明〔9〕，P53阳性表达率肠型显著高于弥漫型和混合型，与本研究结果一致。P53参与胃癌的发生、发展，促进了胃癌的浸润、转移，可作为评价胃癌患者预后的一项参考指标。

Ki-67与肿瘤的发生、发展、浸润转移及预后有密切联系;目前常用来反映肿瘤细胞增殖活性，评价肿瘤预后。

本研究显示，Ki-67阳性表达率越高，肿瘤细胞恶性程度越高;一些外国学者研究显示〔10〕，相比 EGC、AGC、P53 表达，Ki-67标记指数对肿瘤细胞增殖的预后价值更突出。国内外一些研究表明〔3〕：Ki-67在男性、Lauren 分型中肠型、Borrmannan 0/Ⅰ/Ⅱ、浸润肌层/浆膜层、管状腺癌/印戒细胞癌显著高于女性、Lauren分型中弥漫型、BorrmannanⅢ/Ⅳ、浸润黏膜层/黏膜下层、黏液腺癌中的表达，与本研究大体一致。以上研究表明Ki-67表达率越高，胃腺癌细胞生长速度越快、恶性程度越高，患者预后越差。但Elpek等〔11〕用免疫组化评估Ki-67与临床病理指标的关系时发现，Ki-67与临床病理特征之间没有任何联系，不能预测预后。本研究表明P53阳性表达的胃腺癌细胞有更强的增殖活性，更强的浸润转移能力及较差的预后;P53与Ki-67表达呈显著正相关，且两者均与胃腺癌的浸润转移有关，阳性表达的患者预后较差。

1 Kim MA，Lee HS，Yang HK，et al.Clinicopathologic and protein expression differences between cardia carcinoma and noncardia carcinoma of the stomach〔J〕.Cancer，2005;103(7)：1439-46.

2 Lin ZY，Zhuang W，Liu GJ，et al.P53 condon 72 polymorphism and gastric cancer：a meta analysis of the literature〔J〕.Int J Cancer，2007;121：1481-6.

3 易 伟，胡志前，龚振斌.Ki67抗原和P53蛋白在胃癌中的表达及其临床意义〔J〕.中国普通外科杂志，2006;15：664-7.

4 Stiewe T.The P53 family in differentiation and tumorigenesis〔J〕.Nat Rev Cancer，2007;7(3)：165-8.

5 Pietsch EC，Sykes SM，McMahon SB，et al.The P53 family and programmed cell death〔J〕.Oncogene，2008;27(50)：6507-21.

6 Zhang HK，Zhang QM，Zhao TH，et al.Expression of mucins and E-Cadherin in gastric carcinoma and their clinical significance〔J〕.World Gastroenterol，2004;10(20)：3044-7.

7 Kim IH，Sohnss，Kwon KY，et al.Prognostic significance of immunohistochemical expression of P53 and retinoblastoma gene protein in Curatively resected gastric cancer〔J〕.Korean J Intern Med，2005;20：1-7.

8 Deveci MS，Denvci G.Prognostic value of P53 protein and MK-1 expression in gastric carcinoma〔J〕.Gastric Cancer，2007;10(3)：112-3.

9 Akiyama S，Tsuchiya T，Endoh Y，et al.Molecular characterization of undifferentiated-type gastric carcinoma〔J〕.Lab Invest，2001;181：593-8.

10 Aoki R，Yasuda M，Torisu R，et al.Relationship between lymph node metastasis and E-cadherin expression in submucosal invasive gastric carcinomas with gastric-phenotype〔J〕.J Med Invest，2007;54(1-2)：159-67.

11 Elpek Go，Gelen T，Aksoy NH，et al.Microvessel count，proliferating cell nuclear antigen and Ki-67indices in gastric adenocarcinoma〔J〕.Korean J Gastroenterol，2005;45(6)：394-400.