舒康平喘胶囊的薄层色谱鉴别

李 阳，韩 涛，景 明，吴红彦，赵 磊，余晓晖

(甘肃中医学院，甘肃省高校中(藏)药化学与质量研究省级重点实验室，甘肃兰州 730000)

支气管哮喘是一种由多种细胞特别是嗜酸粒细胞、T淋巴细胞、肥大细胞等参与的气道慢性炎性疾病，属于中医学“哮病”范畴，是严重威胁人类健康的一种主要慢性疾病［1］。舒康平喘胶囊是在中医理论的指导下，根据痰饮理论及哮病的致病因素由纯中药组方而成［2］，该制剂主要由威灵仙、仙鹤草、桔梗、地龙等组成，具有豁痰化痰、宣肺平喘、软坚散结、活血化瘀的作用，主要用于治疗哮喘。通过对舒康平喘胶囊纯中药制剂的研究，以完善和补充中医药对该病的辨证论治规律，更好地保障人群健康。为控制舒康平喘胶囊的质量，保证用药安全有效，对方中的威灵仙、仙鹤草、桔梗、地龙4味药分别进行了薄层色谱定性鉴别研究。

1 材料

ZF7C三用紫外分析仪(上海康华生化仪器制造厂);硅胶G(青岛海洋化工有限公司);齐墩果酸对照品(中国药品生物制品检定所，110709—200505);其他所用试剂均为分析纯。舒康平喘胶囊(由甘肃中医学院科研实验中心自制)，对照药材购自于兰州复兴厚药材有限责任公司，经甘肃中医学院杨扶德老师鉴定均为正品。

2 方法及结果

2.1 威灵仙薄层定性鉴别［3-8］

2.1.1 制备对照品溶液 精密称取适量齐墩果酸对照品，用无水乙醇配成0.45 mg/mL对照品溶液，备用。

2.1.2 制备供试品溶液 取舒康平喘胶囊内容物粉末4 g，加乙醇50 mL，加热回流2 h，滤过，滤液浓缩至约20 mL，加盐酸3 mL，加热回流1 h，加水10 mL，放冷，加25 mL石油醚(60～90℃)，振摇，蒸干溶剂，用10 mL无水乙醇将残渣溶解，为供试品溶液，备用。

2.1.3 制备对照药材溶液 取威灵仙对照药材1 g，按2.1.2项下方法制得对照药材溶液。

2.1.4 制备阴性样品液 按样品处方配比，称取不含威灵仙的其他药材，模拟生产工艺制成缺威灵仙的阴性对照胶囊，按2.1.2项下方法制成阴性样品液。

2.1.5 薄层色谱及结果 依照药典中薄层色谱法［3］，将以上供试品溶液、对照药材溶液、对照品溶液、阴性样品溶液各吸取约4μL，在同一硅胶G板上分别点样，环己烷-丙酮-醋酸乙酯(5∶2∶1)展开，取出待晾干后喷以显色剂(10%的硫酸乙醇溶液)，在105℃加热至斑点清晰显色。与对照药材色谱对照，供试品色谱在相应位置上显出相同颜色的斑点，阴性样品没有产生干扰。见图1。

2.2 仙鹤草薄层定性鉴别［3-4，9-11］

2.2.1 制备供试品溶液 取舒康平喘胶囊粉末4 g，加石油醚(60～90℃)30 mL，超声提取30 min，过滤，滤液挥干溶剂，残渣加2 mL三氯甲烷溶解，得到供试品溶液［3］。

2.2.2 制备对照药材溶液 取仙鹤草对照药材1 g，按2.2.1项下方法制备得对照药材溶液。

图1 威灵仙薄层鉴别

2.2.3 制备阴性样品溶液 按样品处方配比，称取不含仙鹤草的其他药材，模拟生产工艺制成缺仙鹤草的阴性对照胶囊，按2.2.1项下方法制成阴性样品液。

2.2.4 薄层色谱及结果 依照药典中薄层色谱法［4］，将以上供试品溶液、阴性样品溶液各吸取4μL，对照药材溶液吸取3μL，于同一硅胶G板上分别点样，使用环己烷-醋酸乙酯-冰醋酸(25∶5∶1)展开，取出待晾干后喷以显色剂(10%硫酸乙醇溶液)，在105℃加热至斑点清晰显色。与对照药材色谱对照，供试品色谱在相应位置上显出相同颜色的斑点，阴性样品没有干扰。见图2。

图2 仙鹤草薄层鉴别

2.3 桔梗薄层定性鉴别［3-4，12-14］

2.3.1 制备供试品溶液 取舒康平喘胶囊粉末4 g，加7%硫酸乙醇-水(1∶3)混合液20 mL，回流提取3 h，冷却后，用20 mL三氯甲烷振摇提取2次，合并三氯甲烷液，加30 mL水洗涤2次，弃去洗液，三氯甲烷液中加无水硫酸钠脱水，过滤，蒸干滤液，残渣加1 mL甲醇溶解，为供试品溶液。

2.3.2 对照药材溶液的制备 称取桔梗对照药材1 g，按2.3.1项下制备对照药材溶液。

2.3.3 制备阴性样品溶液 按样品处方配比，称取不含桔梗的其他药材，模拟生产工艺制成缺桔梗的阴性对照胶囊，按2.3.1项下方法制成阴性样品液。

2.3.4 薄层色谱及结果 依照药典中薄层色谱法［4］，将以上供试品溶液、对照药材溶液、阴性样品溶液各吸取5μL，同一硅胶G板上分别点样，石油醚(30～60℃)-醋酸乙酯(30∶10)展开，取出待晾干后喷以显色剂(10%硫酸乙醇溶液)，在105℃加热至斑点清晰显色。与对照药材色谱对照，供试品色谱在相应位置上显出相同颜色的斑点，阴性样品没有产生干扰。见图3。

图3 桔梗的薄层色谱鉴别

2.4 地龙薄层定性鉴别［3-4，15-17］

2.4.1 制备供试品溶液 取5 g舒康平喘胶囊粉末，加30 mL三氯甲烷，使用超声提取30 min，过滤，水浴上蒸干溶剂，残渣用1 mL三氯甲烷溶解，制成供试品溶液。备用。

2.4.2 制备对照药材溶液 称取1 g地龙对照药材，按2.4.1项下方法制备得对照药材溶液。

2.4.3 制备阴性样品溶液 按样品处方配比，称取不含地龙的其他药材，模拟生产工艺制成缺地龙的阴性对照胶囊，按2.4.1项下方法制成阴性样品液。

2.4.4 薄层色谱及结果 依照药典中薄层色谱法［4］，分别吸取3μL上述供试品溶液、对照药材溶液和阴性样品溶液，于同一硅胶G板上分别点样，使用苯-醋酸乙酯-甲酸(8∶2∶0.2)展开，取出待晾干后喷以显色剂(10%硫酸乙醇溶液)，在105℃加热至斑点清晰显色，或在检测波长365 nm紫外灯下观察。显色结果，与对照药材色谱对照，供试品色谱在相应位置上显出相同颜色的斑点;紫外灯(365 nm)下检视时，在与对照药材相应的位置有橙红色荧光斑点。见图4。

图4 地龙的薄层色谱鉴别

3 讨论

3.1 对威灵仙的鉴别试图采用甲苯-乙酸乙酯-甲酸(20∶3∶0.2)、苯-三氯甲烷-冰醋酸(10∶2∶0.2)等为展开剂，展开时分离效果不好，斑点不明显，且阴性有干扰;后改用环己烷-丙酮-醋酸乙酯(5∶2∶1)为展开剂，分离效果好，斑点圆整且无干扰，Rf值适中。

3.2 仙鹤草的鉴别曾参考宫瘤消胶囊的样品处理方法和鉴别条件［10］，但供试品色谱中无与对照药材相应的斑点;后以丹芩颗粒中仙鹤草的薄层鉴别为参考［9］，进行样品处理，以环己烷-醋酸乙酯-冰醋酸(25∶5∶1)为展开剂，分离效果好，斑点清晰，无干扰。

3.3 地龙中含有多种氨基酸(如鸟氨酸、赖氨酸、丝氨酸等)、中性脂(胆甾醇等)、结合脂(胆碱缩醛磷脂等)等成分，实验中曾参照药典中地龙项下的方法和条件进行薄层色谱分析［4］，结果在阴性中均有干扰，后参照文献改为鉴别地龙中的次黄嘌呤［15］，阴性无干扰，且分离较好。

3.4 地龙的薄层鉴别试图采用甲苯-丙酮(9∶1)、醋酸乙酯-冰醋酸-水(8∶2∶1)、环己烷-三氯甲烷-水(8∶3∶0.3)、环己烷-冰醋酸-水(8∶2∶1)等为展开剂，在紫外(365 nm)下检视阴性均有干扰;后调整为苯-乙酸乙酯(9∶1)展开，喷10%硫酸乙醇溶液显色，阴性无干扰，但斑点分离效果不佳，Rf值偏小;经摸索最终选定苯-醋酸乙酯-甲酸(8∶4∶0.2)为展开剂，斑点清晰，分离效果好，无干扰。

3.5 本研究结果表明，各薄层色谱所得斑点清晰，分离度良好，专属性强，阴性样品无干扰，重现性好，方法简便易行，可作为该制剂质量控制的方法。

［1］齐继成.世界抗哮喘药物研究开发最新进展［J］.中国医药技术与市场，2007，7(2):31-41.

［2］韩 涛，王佳蕾，韩 澎，等.舒康平喘胶囊治疗支气管哮喘的药效学研究［J］.中医研究，2008，21(3):12-14.

［3］国家药典委员会.中华人民共和国药典:2005年版一部［S］.北京:化学工业出版社，2005.

［4］国家药典委员会.中华人民共和国药典:2010年版一部［S］.北京:中国医药科技出版社，2010.

［5］熊慧林，郑茂鑫.薄层扫描法测定威灵仙中齐墩果酸的含量［J］.中国中药杂志，2007，32(4):357-359.

［6］钟保恒.威灵仙药材薄层色谱鉴别方法的改进［J］.中国民族民间医药，2009，18(9):30-31.

［7］陈 华，何锦钧.养血通络片质量标准研究［J］.中国药业，2010，19(12):39-40.

［8］赵明宏，安 晔，石 磊，等.祛痹止痛凝胶剂的制备及质量控制［J］.中国药师，2011，14(3):369-372.

［9］田成旺，张铁军，龚苏晓，等.丹芩颗粒薄层鉴别研究［J］.时珍国医国药，2007，18(11):2720-2721.

［10］周本宏，黄付伟，冯 琪，等.宫瘤消胶囊中仙鹤草和白花蛇舌草的薄层色谱鉴别［J］.中国药师，2007，10(11):1147.

［11］杨璐璐，秦兴卫，宁亚功，等.黄地吉仙片的质量标准研究［J］.云南中医学院学报，2009，32(4):17-20.

［12］柯发敏，张开莲，钟明镜.咽炎含片中药材的薄层色谱研究［J］.中药与临床，2010，1(3):27-28.

［13］叶志强，闫 桦，余卫兵.咳喘定口服液的质量控制［J］.中国药业，2012，21(6):31-32.

［14］笔雪艳，刘晓凤，张清波，等.桔梗药材及饮片的质量标准研究［J］.中医药信息，2011，28(6):69-71.

［15］张保国，张大禄.动物药［M］.北京:中国医药科技出版社，2003

［16］许 威，吴 虹，沈 晨，等.天麻醒脑胶囊的质量控制［J］.安徽中医学院学报，2012，31(1):54-57.

［17］丁红梓，谈碹忠.黄龙止咳口服液质量标准研究［J］.中国中医药信息杂志，2011，18(10):60-62.