CyclinD1、Cdk6在子宫内膜腺癌中的表达与临床意义

廖秀芳 林宇静 曹婉维

CyclinD1、Cdk6在子宫内膜腺癌中的表达与临床意义

廖秀芳 林宇静 曹婉维

目的探讨CyclinD1、Cdk6在子宫内膜腺癌中的表达与临床意义。方法应用免疫组织化学，检测30例正常子宫内膜及30例不典型增生子宫内膜和45例子宫内膜腺癌中的CyclinD1与Cdk 6蛋白的表达情况。结果CyclinD1与Cdk 6在不典型增生子宫内膜和子宫内膜腺癌中的表达率与正常子宫内膜组相比有统计学意义(P<0.05)，与子宫内膜腺癌的分化程度，Dukes分期及淋巴结转移呈正相关关系 (P<0.05)。结论CyclinD1与Cdk 6蛋白的过度表达可能在子宫内膜癌的发生、发展、浸润中起重要作用，对判断子宫内膜腺癌的预后有一定的临床意义。

子宫内膜腺癌；CyclinD1；Cdk6；免疫组织化学

子宫内膜腺癌起源于子宫内膜腺体的恶性肿瘤，是最常见的女性生殖系统肿瘤之一，其发病率有逐年升高的趋势。人体肿瘤是一种细胞周期性疾病，其中细胞周期素D1(cyclinD1)和细胞周期依赖激酶6(cyclindependent kinase 6，Cdk 6)被认为是重要的细胞周期因子。CyclinD1可以和CDK6结合形成CyclinD1/ Cdk 6复合物，作为细胞周期的正向调节因子，二者表达异常可导致细胞恶性转化。本研究拟检测cyclinD1和Cdk 6蛋白在子宫内膜腺癌的表达变化，以探讨两者在子宫内膜腺癌的发生、发展、浸润中的作用。

1 材料与方法

1.1组织标本

选取2009年6月至2012年6月中山大学附属第五医院及遵义五院病理科保存的资料完整的均经手术切除和常规病理证实的45例子宫内膜腺癌为实验组，30例正常子宫内膜及30例不典型增生子宫内膜作为对照组。

1.2方法 免疫组织化学染色采用SP法，CyclinD1单抗、Cdk6单抗、SP试剂盒及DAB显色试剂盒均购武汉博士德公司，以PBS代替一抗作空白对照,以已知的结肠癌作阳性对照。

1.3判断标准 Cdk6、CyclinD1阳性着色定位于细胞核，为细胞核出现棕黄色颗粒为阳性细胞，两名病理医生随机抽取20个高倍视野，计数≥500个肿瘤细胞，按阳性细胞所占百分比并参考着色强度分级如下：阴性：阳性细胞数<1O%；阳性：阳性细胞数≥10%。

1.4统计学方法 实验数据采用χ2检验,应用SPSS l3.0软件包,P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

CyclinD1在正常子宫内膜组、不典型增生子宫内膜组、子宫内膜腺癌组中阳性表达率呈逐渐升高的趋势(依次为10.0%、36.7%、71.1%)，子宫内膜腺癌组与不典型增生子宫内膜组相比差异有统计学意义(P<0.05)子宫内膜腺癌组与正常子宫内膜组相比差异有统计学意义(P<0.05)。Cdk6在正常子宫内膜组、不典型增生子宫内膜组、子宫内膜腺癌组中阳性表达率呈逐渐升高的趋势(依次为6.7%、36.7%、66.7%)，子宫内膜腺癌组与不典型增生子宫内膜组相比差异有统计学意义(P<0.05)子宫内膜腺癌组与正常子宫内膜组相比差异有统计学意义(P<0.05)(见表1)。

CyclinD1、Cdk6阳性表达与子宫内膜腺癌分化程度低，Dukes分期晚及淋巴结转移显著相关(P<0.05)。见表2。

表1 cyclinD1和Cdk6蛋白在不同的子宫内膜中的表达情况

表2 CyclinD1、Cdk6的表达与临床病理学特征的关系

3 讨论

肿瘤是一种细胞周期性疾病，细胞增殖周期由不同CyclinD和CDK在G1/ S 期和G2/ M 期两个关键的调节位点进行自控性调节，当G1/ S 期和G2/ M 期两个调节位失控，有可能导致细胞不断增殖而导致恶性转化。CyclinD是一种原癌基因，分为D1、D2、D3，是G1期的主要调控蛋白，CyclinD1合成并与相应的cdk4/6相结合所产生的蛋白激酶活性是G1期所必需的。当CyclinD1过表达会导致G1期缩短。有研究表明，CyclinD1在甲状腺癌、乳腺癌、肝细胞癌、骨肉瘤等组织中有过表达[1]，提示CyclinD1基因和蛋白的表达异常与肿瘤的发生、发展有相关性。cdk6 是G1期的重要调控分子一，它能够特异性地与周期蛋白D 结合形成复合物。有学者认为，cdk6 对细胞分化的抑制作用[2]。在前列腺癌、骨髓瘤、肝癌、卵巢癌、黑色素瘤、Kaposi肉瘤等肿瘤中有过表达，于江等[3]研究表明，细胞周期正性调控因子CDK6蛋白过表达导致的G1期调控异常涉及了与子宫内膜样腺癌的发生、发展。表明DK6参与肿瘤的发生、发展。有研究表明，CyclinD1、cdk6的异常高表达有可能在胃癌的发生、发展中发挥重要作用[4]。

本研究Cdk6、CyclinD1在正常子宫内膜组、不典型增生子宫内膜组、子宫内膜腺癌组中阳性表达率呈逐渐升高的趋势，且差异有统计学意义，这与正常子宫内膜-内膜不典型增生-子宫内膜腺癌疾病的自然进展演变过程相一致，表明Cdk6、CyclinD1蛋白可能参与子宫内膜由良性演变为恶性的过程。Cdk6、CyclinD1阳性表达与子宫内膜癌分化程度，Dukes分期、与淋巴结转移呈正相关关系，表明Cdk6、CyclinD1的过度表达导致的细胞异常增殖不仅涉及子宫内膜腺癌的起始阶段，在使子宫内膜腺癌组织具有侵袭和转移的能力过程中同样起着重要的作用，在子宫内膜腺癌前病变和癌组中检测Cdk6和CyclinD1蛋白，可作为临床早期诊断和科学评价肿瘤预后、指导临床治疗的指标，可能为子宫内膜腺癌基因治疗的研究提供新途径。

[1] GoodgerNM,GannonJ,HuntT,Mor ganPR. Cellc yclere gulatory proteins: anoverviewwithrelevancetooralcancer. Oral Oncol,1997,33 (2)：61，273.

[2] 朱红琴.周期蛋白依赖性激酶6与肿瘤和细胞分化.生命的化学,2009,28(1):52-54.

[3] 于江，王炎.子宫内膜样腺癌中PTEN、CDK6蛋白的表达及临床意义.华南国防医学杂志,2009,23(5):44-46.

[4] 姜可伟,王杉.胃癌组织中细胞周期素D1和细胞周期蛋白质依赖激酶6的表达与预后的关系.中华普通外科杂志,2005,20(12)：800-802.

CyclinD1andCdk6ProteinsExpressioninEndometrioilCarcinomaanditsclinicalsignificancen

LIAOXiu-fang,LINYu-jing,CAOWan-wei.

ThefifthHospitalAffiliatedtoZhongshanUniversity,Guangdong519000,China

ObjectiveTo study the expression of CyclinD1and Cdk6 proteins in endometrioil carcinoma and its clinical significance.MethodsThe expression of CyclinD1and Cdk6 proteins were tested by S-P immunohistochemist ry on tissues of normal endometrium (30 cases),atypical endometrioil hyperplasia (30 cases) and endometrioil carcinoma (45 cases).ResultsBoth the CyclinD1and Cdk6 positive rates in atypical hyperplasia of endometrium and in cancer were significantly higher than that in normal endometrium (P<0.05).And the differentiation of endometrioil carcinoma,Dukes staging and lymph node metastasis are positively related(P<0.05).ConclusionCyclinD1 and Cdk6 protein excessive expression may be in endometrioil cancer occurrence,development,and play an important role in the invasion,to judge the prognosis of endometrioil carcinoma has a certain clinical significance,but also may be as a valuable tumor markers.

Endometrioil cancer； CyclinD1； Cdk6； Immunohitochemistry

519000 珠海市中山大学附属第五医院妇产科(廖秀芳),病理科(林宇静 曹婉维)