老年宫颈癌患者Bmi-1蛋白检测的临床意义

桂 影 黄志红 王丽娟 (河南大学护理学院，河南 开封 475004)

宫颈癌是老年女性常见的一种恶性肿瘤，发生率仅次于乳腺癌〔1，2〕。肿瘤的发病机制极其复杂，目前仍不清楚，探明其发生、发展的机制可以为防治提供准确的治疗靶点〔3〕。多梳基因-1(Bmi-1)为多梳基因家族成员，研究显示Bmi-1蛋白在多种实体肿瘤中高表达，参与了肿瘤的发生、发展过程，是一个新近发现的癌基因〔4，5〕，本研究观察老年宫颈癌患者标本中Bmi-1蛋白的表达及其相关的临床意义。

1 材料与方法

1.1 临床病例资料 2008年9月至2011年12月我院妇产科治疗的老年宫颈癌患者宫颈组织标本90例，均经病理诊断证实，年龄60～79〔平均(71.4±5.9)〕岁。按照TNM分期分为Ⅰ(n=18)、Ⅱ(n=26)、Ⅲ(n=24)、Ⅳ(n=22)四期。另取30例我院因子宫良性病变切除的宫颈组织作为正常对照。

1.2 主要试剂 Bmi-1蛋白抗体购自美国Cell Signalling公司，即用型SP免疫组化超敏试剂盒及DAB显色试剂盒购自深圳达科为生物科技有限公司。

1.3 Bmi-1蛋白的免疫组化染色 石蜡切片常规脱蜡，3%过氧化氢甲醇溶液室温浸泡切片10～15 min，高压修复抗原，1%小牛蛋白室温孵育切片10～15 min封闭非特异性结合，1∶100稀释Bmi-1蛋白抗体，4℃湿盒孵育过夜，二抗室温孵育30 min，DAB试剂盒显色，常规苏木精复染，封片，镜下观察。染色阳性判断参照孟秀香等〔6〕的方法，简述如下:阳性细胞于细胞核呈黄色或棕黄色，高倍镜下随机选择5个视野，每个视野计数100个细胞，阳性细胞≥10%为阳性表达，＜10%则判定为阴性表达。

1.4 统计学处理 采用SPSS16.0统计软件进行χ2检验。

2 结果

2.1 Bmi-1蛋白在宫颈癌组织中的表达 Bmi-1蛋白阳性染色主要定位于细胞核，宫颈癌及正常组织中均可检测到Bmi-1蛋白的表达，Bmi-1蛋白在宫颈癌组织中的阳性率〔62例(68.9%)〕，明显高于正常对照组〔7例(23.3%)〕(P＜0.01)。

2.2 宫颈癌组织中Bmi-1蛋白表达与临床病理指标的关系Bmi-1蛋白的表达与患者的年龄无相关性(P＞0.05)，而与肿瘤的分化程度、淋巴结转移和临床TNM分期之间存在显著相关性(P＜0.05)。见表1。

表1 宫颈癌患者不同临床病理指标中Bmi-1蛋白率的比较〔n(%)〕

3 讨论

研究宫颈癌的发病机制，明确相关致病基因，有利于宫颈癌的早期诊断和预后判断〔7〕。肿瘤的发生、发展是一个逐步的多阶段的过程，与癌基因的激活与抑癌基因的失活密切相关，Bmi-1基因是几年来在协同c-myc原癌基因转化细胞导致肿瘤形成过程中发现的一个新的癌基因，进一步的研究显示其与人类的多种肿瘤密切相关，例如胃癌、肺癌、乳腺癌等，并且在一些肿瘤中可以预示患者的预后〔8〕，本研究提示Bmi-1蛋白可能参与宫颈癌的致病过程。Bmi-1蛋白调控细胞增殖的机制主要是下调抑癌基因p16和p14，使细胞G1-S期检测点的功能丧失，从而导致细胞恶性克隆性增生。张爱荣等〔9〕在胃癌中的研究显示Bmi-1蛋白参与了胃癌的发生、发展过程，并且在胃癌的浸润、转移及预后等方面发挥着重要的影响。本研究提示Bmi-1蛋白在宫颈癌的恶性程度判定上是一个敏感指标，且可以作为评估患者预后的一个检测指标。Zhang等〔10〕使用基因检测Bmi-1 mRNA在宫颈癌中的表达变化，也发现了Bmi-1对宫颈癌的诊断和预后具有一定的参考价值，具体Bmi-1蛋白在宫颈癌中表达上调的机制以及其所影响的下游靶基因都还有待进一步的研究。

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9 张爱荣，梁丽梅，许 颖，等.Bmi-1蛋白在胃癌组织中的表达及其与胃癌患者术后生存的相关性〔J〕.中国老年学杂志，2011;31(18):3612-3.

10 Zhang X，Wang C，Wang L，et al.Detection of circulating Bmi-1 mRNA in plasma and its potential diagnostic and prognostic value for uterine cervical cancer〔J〕.Int J Cancer，2012;131(1):165-72.