天南星提取物的抗炎作用及机制研究

李 杨，陆 倩，钱金栿*

（1.大理学院，云南大理 671003；2.大理学院药学与化学学院，云南大理 671000）

天南星为天南星科天南星属植物，以块茎入药，其中云南资源最为丰富。其味苦、辛温、有毒，具有燥湿化痰、祛风止痛、散结消肿等功效，用于咳嗽，眩晕，惊风等；外用治痈肿，蛇虫咬伤〔1〕。天南星具有抗肿瘤、抗惊厥、镇痛、镇静、祛痰、抗心律失常、抗氧化、杀灭钉螺、抗菌和抗炎等多种药理活性〔2-5〕。但目前尚未见报道天南星提取物对急、慢性炎症的作用研究，本实验对天南星提取物抗炎作用及机制研究进行初步探讨，以期为其临床应用和新药开发提供实验依据。

1 实验材料

1.1 药材 实验用天南星采自云南大理苍山，经大理学院药学与化学学院夏从龙副教授鉴定为天南星科天南星属植物天南星（Arisaemaerubescens（Wall.）Schott）。

1.2 实验动物 昆明种小白鼠，6～8周龄，体重18～22 g，雌雄各半。由昆明医科大学实验动物中心提供，动物合格证号：SCXK（滇）2011-0004。

1.3 实验仪器及试剂 紫外分光光度仪（TU-1901，北京谱析通用仪器有限责任公司）；旋转蒸发仪（R-210，瑞士Buchi公司）；电子天平（AL204-1C，梅特勒-托利多仪器有限公司）；低速离心机（上海手术器械厂）；醋酸（上海申博化工有限公司，批号：1103101）；二甲苯（汕头市达濠精细化学品有限公司，批号：20080919）；阿司匹林肠溶片（南京白敬宇制药有限责任公司，批号：110904）。

2 实验方法

2.1 天南星提取物样品的准备 取天南星植株地下部分块茎经清洗、去皮、切片、干燥、粉碎，经95%乙醇回流提取，再经70%乙醇回流提取，过滤，减压浓缩得醇提取物，加水溶解后经乙酸乙酯萃取，得到乙酸乙酯提取物。取天南星块茎粉末经蒸馏水回流提取，过滤，得天南星水提取物。取天南星果实粗粉，经甲醇回流提取6次，过滤后合并滤液，减压浓缩得甲醇提取物，加水溶解后经石油醚萃取，得到石油醚提取物。将上述提取物分别冷冻干燥后备用〔6〕。

将上述提取物用生理盐水溶解后，加入0.5%CMC-Na（羧甲基纤维素钠）后制成口服制剂，加入凡士林后搅拌均匀得外涂制剂（凡士林加热熔化，放置，冷却至50℃左右）。

2.2 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响 取小鼠60只，雌雄各半，随机分为空白对照（生理盐水）组、阳性对照（阿司匹林）组、果实石油醚提取物组，块茎醇提取物组、块茎乙酸乙酯提取物组和水提取物组，每组10只。灌胃给药，连续3 d，末次给药1 h后，于每只小鼠左耳双面均匀涂抹二甲苯0.02 mL，右耳不涂作为对照，30 min后颈椎脱臼处死，用6 mm打孔器分别在双耳相同位置打下耳片并称重，以同一小鼠左右两耳片重量差值为肿胀度，并计算肿胀抑制率〔7-8〕。

肿胀抑制率=〔（空白对照组肿胀度-给药组肿胀度）/空白对照组肿胀度〕×100%

2.3 对小鼠棉球肉芽肿增生的影响 昆明种小鼠60只，分组同“2.2”项。将10 mg棉球种植于小鼠皮下，自手术后每日足部涂药1次，连续7 d。末次给药后24 h后颈椎脱臼处死，剥离棉球肉芽组织，置恒温70 ℃烘箱烘至恒重，计算肉芽肿重量（mg）〔9-10〕。

肉芽肿重量=肉芽肿干重-棉球重量

2.4 对醋酸致小鼠毛细血管通透性的影响 取小鼠60只，分组同“2.2”项。灌胃给药，1 次/d，连续7 d，末次给药1 h后，尾静脉注射0.5%伊文思蓝生理盐水溶液0.1 mL，并立即腹腔注射0.6%醋酸0.1 mL/10 g，20 min后颈锥脱臼处死，5 mL生理盐水冲洗，洗液以3000 r/min离心15 min，取上清液于590 nm处测吸光度〔11〕。

3 实验结果

3.1 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响 天南星块

茎醇提取物、乙酸乙酯提取物、天南星果实石油醚提取物与生理盐水组相比，小鼠耳廓肿胀度明显下降（P＜0.01）。与阿司匹林组比较，天南星乙酸乙酯提取物差异无统计学意义，提示其能显著抑制二甲苯致小鼠耳肿胀。见表1。

表1 天南星提取物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响（±s，n=10）

表1 天南星提取物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响（±s，n=10）

注：与生理盐水组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与阿司匹林组比较﹟P＜0.05，﹟﹟P＜0.01。

组别 剂量/(g/kg) 肿胀度/mg 肿胀抑制率/%生理盐水 - 1.92±0.69 -阿司匹林 0.30.86±0.53** 55天南星块茎醇提取物 201.30±0.43**﹟ 32天南星块茎乙酸乙酯提取物 200.99±0.35** 48天南星块茎水提取物 201.54±0.47*﹟﹟ 18天南星果实石油醚提取物 201.24±0.62**﹟ 35

3.2 对小鼠棉球肉芽肿增生的影响 与生理盐水组比较，天南星块茎醇提取物、乙酸乙酯提取物、水提取物、天南星果实石油醚提取物肉芽肿质量显著下降（P＜0.01），说明上述几组对小鼠棉球肉芽肿有明显的抑制作用。见表2。

3.3 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响 与生理盐水组比较，天南星块茎乙酸乙酯提取物、天南星果实石油醚提取物（P＜0.01）以及天南星块茎醇提取物（P＜0.05）伊文思蓝渗出量显著下降，提示能抑制冰醋酸所致的小鼠毛细血管通透性。见表3。

表2 天南星提取物对小鼠棉球肉芽肿增生的影响（±s）

表2 天南星提取物对小鼠棉球肉芽肿增生的影响（±s）

注：与生理盐水组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与阿司匹林组比较﹟P＜0.05，﹟﹟P＜0.01。

组别 剂量/(g/kg) n 肉芽肿干质量/mg生理盐水 - 887.52±11.89阿司匹林 0.31031.18±9.46**天南星块茎醇提取物 201050.26±8.21**﹟﹟天南星块茎乙酸乙酯提取物 201045.87±9.20**﹟﹟天南星块茎水提取物 201057.12±9.64**﹟﹟天南星果实石油醚提取物 201049.54±8.82**﹟﹟

表3 天南星提取物对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响（±s）

表3 天南星提取物对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响（±s）

注：与生理盐水组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与阿司匹林组比较﹟P＜0.05，﹟﹟P＜0.01。

组别 剂量/(g/kg) n 吸光度/A生理盐水 - 100.25±0.04阿司匹林 0.390.04±0.06**天南星块茎醇提取物 20100.08±0.01*﹟﹟天南星块茎乙酸乙酯提取物 20100.05±0.07**﹟天南星块茎水提取物 20100.18±0.03﹟﹟天南星果实石油醚提取物 2090.06±0.05**﹟﹟

4 讨论

炎症发展一般分为三期，早起以毛细血管扩张、通透性亢进为主，中期表现为血小板吸附及白细胞游走，晚期为肉芽组织增生〔12〕。二甲苯致小鼠耳肿胀模型和毛细血管通透性实验属于炎症反应的早期，棉球肉芽肿试验属于炎症反应的晚期〔13〕。

前期研究了天南星提取物不同给药方式对于致炎动物的影响。对于炎症早期（二甲苯致小鼠耳廓肿胀）模型，天南星提取物内服、外涂均表现出显著的抗炎作用。对于炎症晚期（棉球致小鼠肉芽肿）模型，天南星提取物内服无明显作用，而外涂则表现出显著的抗炎作用；这也和传统及现代临床对天南星使用的表述相符（如“生南星可治疗腮腺炎、外涂可治疗肋软管炎，天南星复方口服，治疗急性牙周炎、牙周脓肿。”等）。天南星这种药效作用的差异性可能和给药途径、药物的作用机制与作用靶点等有关系，提示有必要做进一步深入的探讨和研究。

实验表明天南星块茎醇提取物、乙酸乙酯提取物，天南星果实石油醚提取物均能明显抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀度；对小鼠棉球肉芽肿增生都有抑制作用（外涂）；且能明显抑制冰醋酸所致的小鼠毛细血管通透性。说明上述提取物对于炎症前期、炎症后期均显示明显的作用，抗炎作用可能与抑制毛细血管通透性有关。通过本次研究细化了天南星抗炎的活性部位，为其临床应用和进一步研究开发提供实验依据。

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