高效液相色谱法测定盐酸西布曲明滴丸的含量

万维香，朱鹏祥

(江苏省泰州市人民医院，江苏 泰州 225300)

盐酸西布曲明为作用于中枢的口服体重调节剂，药理作用为抑制去甲肾上腺素和5－羟色胺的再摄取，增强生理性饱腹感，从而减少能量的摄入，并通过生热作用增加能量消耗[1]。该药物在临床上已得到广泛应用，但尚无滴丸剂上市，亦无滴丸剂研究的相关报道。笔者采用高效液相色谱(HPLC)法[2]对盐酸西布曲明滴丸的含量进行了研究，为质量控制提供快速、有效的分析手段，该法准确可靠，操作简便易行，现报道如下。

1 仪器与试药

岛津LC－10ATvp型高效液相色谱仪，岛津LC－10Avp型紫外检测器，岛津CLASS－VP色谱工作站，CP124S型电子分析天平(Sartorius，德国)。甲醇为色谱纯，水为重蒸水;盐酸西布曲明对照品(南京长澳制药有限公司，批号080103，纯度99.4%);盐酸西布曲明滴丸(正大清江制药有限公司，批号分别为20080302，20080303，20080304);盐酸西布曲明空白滴丸(正大清江制药有限公司)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:DiamonsilTMODS 柱(250 mm ×4.6 mm，5μm)，奥泰alltima ODS柱(250 mm×4.6 mm，5μm)，大连依利特 ODS2柱(250mm ×4.6 mm，5 μm);流动相:磷酸二氢钾溶液(磷酸调节pH=3.0) － 甲醇(3 ∶7);检测波长:223 nm;流速:1.0mL/min;进样量:20μL。

2.2 溶液制备

取经105℃干燥至恒重的盐酸西布曲明对照品约10mg，精密称定，置100mL容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。取样品20丸，精密称定质量，计算平均丸重，研细，精密称取适量(约相当于盐酸西布曲明10mg)，置100mL容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。精密称取盐酸西布曲明空白滴丸细粉51.0 mg，置100mL容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

专属性试验:在拟订的色谱条件下，分别吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照品溶液20μL，注入液相色谱仪，色谱图见图1。结果表明，阴性对照品溶液在与对照品溶液和供试品溶液色谱相对应的位置上无吸收峰，该法的专属性良好。

图1 高效液相色谱图

线性关系考察:精密量取对照品溶液(0.998 g/L)，制成质量浓度分别为 10.0，49.9，99.8，199.6，499.0 μg/mL 的对照品溶液。各精密量取20μL注入液相色谱仪，记录色谱图，测定峰面积。以峰面积值(A)对质量浓度(C)进行线性回归，得回归方程为A=49971C－355，r=0.99998(n=5)，结果表明，盐酸西布曲明质量浓度在10.0～499.0μg/mL范围内与峰面积有良好的线性关系。

精密度试验:精密量取盐酸西布曲明对照品溶液(100.0μg/mL)，重复进样6次，记录色谱图。结果峰面积的 RSD=0.25%(n=6)，表明方法的精密度良好。

稳定性试验:取同一供试品溶液，室温放置，分别于0，2，6，12，24 h时进样测定，记录色谱图峰面积的 RSD=0.37%(n=5)，表明供试品溶液在24 h内稳定。

重复性试验:取同一批样品，研细，精密称取6份，依法测定含量。结果的 RSD为0.73%(n=6)，表明方法重复性良好。

加样回收试验:分别精密称取原料药，加入处方量辅料，分别配制低(80%)、中(100%)、高(120%)3个质量浓度的样品，置100mL容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，得供试品溶液，每个质量浓度配制3份，共9份，各精密量取20μL注入液相色谱仪，记录色谱图。结果见表1。

表1 盐酸西布曲明加样回收试验结果(n=9)

2.4 样品含量测定

随机取样品20丸，依法制备供试品溶液。精密量取对照品溶液和供试品溶液20μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算结果乘以1.057，即得。结果见表2。

3 讨论

耐用性试验考察了流动相、色谱柱、流速的轻微变动，对分离度等结果的影响。结果表明，在测定条件下，流动相、色谱柱、流速和柱温的轻微变动对试验结果影响不大，系统耐用性良好。

盐酸西布曲明为叔胺类化合物，为新型减肥药，具有疗效确切、副作用小等特点。现参照有机胺类药物的分析方法，建立了盐酸西布曲明滴丸的高效液相色谱含量测定方法，可作为盐酸西布曲明滴丸的质量控制标准。

本试验先用223 nm作为测定波长，且考虑本品的溶解性和检测波长，选用磷酸二氢钾溶液－甲醇(3∶7)作为流动相。为改善峰形，本试验对缓冲液的pH及缓冲盐的浓度进行了考察，结果表明，以磷酸二氢钾2.72 g，加水900mL溶解，加三乙胺10mL，用磷酸调节pH至3.0，加水稀释至1 000mL时峰形较好。

本试验方法操作简便、专属性好、灵敏度高，可用于盐酸西布曲明滴丸的含量测定。

表2 样品含量测定结果(n=3)

[1]WS－240(X －207)－2000，国家药品标准(试行)[S].

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[M].北京:化学工业出版社，2005:附录 29.