四逆汤及其组分配伍对心力衰竭大鼠血流动力学的影响1）

翟建英，靳 冉，朱晓光，张思玉，张广平

心力衰竭（HF）是各种心脏病发展的终末阶段，也是导致患者死亡的主要原因之一。随着社会老龄化以及高血压、冠心病、糖尿病、肥胖等心血管危险因素和基础疾病的增加，HF发病率也呈上升趋势[1]。中医治疗HF历史悠久，在中医古籍中多有类似记载。如《伤寒论》中的少阴病寒化证与HF的某些临床表现相类似，后世也常用经方作为治疗HF的基本方，其中以四逆汤为代表[2]。本研究制作大鼠HF模型，并采用四逆汤全方及其不同组分配伍进行干预，观察大鼠心功能的变化，旨在从方剂配伍角度揭示中医经方治疗HF的药理作用，并为深入认识方剂配伍的药效变化规律提供实验参考。

1 材料与方法

1.1 实验动物 雄性SD大鼠，体重200g～250g，购于中国药品生物制品检定所实验动物资源中心，合格证号：SCXK（京）2009－0017。

1.2 实验主要仪器 16道生理记录仪（美国BIOPAC公司）、Millar导管（型号：SPR－320，美国 MILLAR INSTRUMENTS.INC公司）。

1.3 实验药物与试剂 盐酸阿霉素（批号：1004E1）购自深圳万乐药业有限公司，附子（黑顺片 批号：0905058）购自四川新荷花中药饮片有限公司，甘草（炙甘草 批号：0905200）购自北京人卫中药饮片厂，干姜（批号：10010606）购自北京人卫中药饮片厂，地高辛（批号：091104）购自上海信谊药厂有限公司。

1.4 药物制备 各组中药饮片分别加10倍量水浸泡45min，水沸腾后第1次煎煮30min，第2次加6倍量水，水沸后煎煮30 min。4层纱布过滤，合并2次煎液，将滤液水浴（70℃）浓缩，所得生药含量如下：附子相当于1.43g生药／mL，附子配甘草 （5∶2）相当于0.76g生药／mL，附子配干姜（5∶3）相当于3.33g生药／mL，四逆汤（附子∶干姜∶甘草＝5∶3∶2）相当于1.58g生药／mL。上述各药制备完成后，置4℃冰箱冷藏保存。给药前附子、附子配干姜、附子配甘草及四逆汤组均用蒸馏水稀释到附子含量为0.34g生药／mL；地高辛也用蒸馏水稀释到0.003 7mg／mL备用。

1.5 动物模型制备与分组方法 大鼠随机分为7组：正常组、模型组、地高辛组、附子组、附子配干姜组、附子配甘草组、四逆汤全方组。参照文献[3]制作HF大鼠模型，正常组尾静脉注射生理盐水，其余各组尾静脉注射盐酸阿霉素4mg／kg，共计3次，每5d1次，即在第1天、第6天和第11天造模。造模同时开始灌胃给药，体积为10mL／kg，正常组和模型组给予相同体积蒸馏水。

1.6 心功能检测方法 各组均在第12天给药后1h进行心室内插管检测大鼠血流动力学指标。大鼠经乌拉坦1g／kg腹腔注射麻醉，仰卧位固定，分离右侧颈总动脉2cm左右，结扎远心端，近心端用动脉夹暂时夹闭，在结扎线下方，用眼科剪剪一小斜口，将Millar导管由动脉壁切口向心脏方向缓慢推入左心室，固定导管，连接16道生理记录仪，测定左室收缩压（LVSP）、左室舒张末期压力（LVEDP）、左心室内压最大上升速率（＋dp／dtmax）和左心室内压最大下降速率（－dp／dtmin）。

1.7 统计学处理 采用SPSS10.0软件进行数据统计。计量资料以均数±标准差（±s）表示，先行正态性检验和方差齐性检验，符合正态分布采用单因素方差分析，不符合正态分布采用非参数检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 各组大鼠心率比较 与正常组比较，模型组心率减慢（P＜0.01）。与模型组比较，地高辛组、四逆汤组、附子配干姜组和附子配甘草组大鼠心率均显著增快（P＜0.0 5或P＜0.01）。详见表1。

表1 各组大鼠心率比较（±s） 次／min

表1 各组大鼠心率比较（±s） 次／min

组别 n 心率正常组7 422.85±33.61模型组 7 337.40±100.091）地高辛组 7 436.63±49.313）四逆汤组 7 448.65±26.493）附子组 7 354.92±37.52附子配干姜组 7 430.89±33.623）附子配甘草组 7 406.45±43.562）与正常组比较，1）P＜0.01；与模型组比较，2）P＜0.05，3）P＜0.01

2.2 各组大鼠左心室内压比较 与正常组比较，模型组LVSP显著降低（P＜0.01）。与模型组比较，地高辛组、四逆汤组和附子配干姜组LVSP均显著增加（P＜0.05或P＜0.01）。各组间LVEDP无明显差异。详见表2。

表2 各组大鼠左心室内压的比较（±s） mmHg

表2 各组大鼠左心室内压的比较（±s） mmHg

组别 n LVSP LVEDP正常组7 120.72±15.05 －4.66±2.93模型组 7 91.96±24.621） －1.94±4.86地高辛组 7 116.60±9.802） －4.23±1.12四逆汤 7 125.89±21.583） －4.78±0.58附子组 7 96.84±22.92 －5.05±28.65附子配伍干姜组 7 118.95±12.183） －4.63±0.69附子配伍甘草组 7 105.45±12.85 －4.03±1.67与正常组比较，1）P＜0.01；与模型组比较，2）P＜0.05，3）P＜0.01

2.3 各组大鼠左心室内压最大变化速率的比较 与正常组比较，模型组＋dp／dtmax、－dp／dtmin（绝对值）显著降低（P＜0.01），提示模型组心肌舒缩性能明显下降。与模型组比较，地高辛组、四逆汤组和附子配干姜组＋dp／dtmax显著升高（P＜0.05或P＜0.01），地高辛组和四逆汤组－dp／dtmin（绝对值）显著升高（P＜0.01）。详见表3。

表3 各组大鼠左心室内压最大变化速率的比较（±s）

表3 各组大鼠左心室内压最大变化速率的比较（±s）

组别 n ＋dp／dtmax －dp／dtmin正常组 7 11 866.64±3 458.98 －9 122.89±3 626.54模型组 7 5 626.62±2 478.561） －4 615.76±1 958.481）地高辛组 7 9 952.86±2 248.093） －7 483.29±1 602.123）四逆汤组 7 11 701.92±4 467.093） －7 704.77±1 203.363）附子组 7 7 023.13±1 816.24 －4 093.27±2 091.67附子配伍干姜 7 9 530.00±1 516.462） －6 587.84±891.62附子配伍甘草 7 8 086.76±2 305.11 －5 815.78±757.22与正常组比较，1）P＜0.01；与模型组比较，2）P＜0.05，3）P＜0.01

3 讨 论

HF是一个世界性的公共卫生问题。在美国约有580万HF患者，每年的花费超过39亿美元，给公共卫生系统带来了沉重的经济负担，同时也严重影响着患者的生活质量，每年的住院率和再住院率居高不下，超过100万的HF患者的住院次数多于300万人次[4]。除高发病率外，高死亡率是HF的另一个流行病学特点，HF的5年死亡率与癌症相当[5]。因此，防治HF无论对于个人、家庭和社会都具有重要意义。

祖国医学擅长辨证论治，在HF的治疗上发挥了积极作用，能够有效缓解临床症状，控制病情进展，提高患者生存质量[6]。HF属中医学的“心悸”、“胸痹”、“喘证”、“水肿”等范畴。中医认为心肾阳虚是HF的重要病机[7]。心病日久，心阳不足，血运无力，肾阳虚衰，水液不化，出现喘息心悸，不能平卧，咳吐痰涎，水肿少尿等一系列临床表现，甚则脉微欲绝，四肢厥逆。上述症状与《伤寒论》中记载的少阴病寒化证相似，心、肾两脏同属少阴，心肾阳虚是少阴病寒化证的基本病机。可见HF与少阴病的临床症状和体征相似，中医病机相通。四逆汤是《伤寒论·少阴病篇》中治疗少阴病寒化证的代表方，并且现代研究表明四逆汤及其基础上的加减化裁方剂能够缓解HF患者的症状，临床疗效显著[8－11]。因此，研究四逆汤的抗HF作用具有临床实用价值。

中医的方剂配伍讲究君臣佐使，各司其用。《证治要诀》云：“附子无干姜不热，得甘草则性缓”。四逆汤中附子大辛大热，上助心阳以通脉，下补肾阳而破阴，为“回阳救逆第一品药”；干姜温中散寒，回阳通脉，与附子相配一走一守，气味雄厚，扶肾阳而破阴；炙甘草性温而补，补脾胃而调诸药，且可缓姜附燥烈辛散之性，使其破阴复阳而无暴散之虞[12，13]。三药功专效宏，可速达回阳之效。中医先贤对四逆汤组方的理论阐释和药性特点总结深入而精辟，但是在中医药现代化的背景下，经方的组分配伍规律尚需更多的实验依据加以证实。因此，本研究通过观察四逆汤全方及其不同组分配伍对HF大鼠模型心功能的影响，希望为深入认识中医方剂配伍的药效变化规律提供实验依据。

本研究结果显示，与正常组比较，模型组心率大幅降低（P＜0.01），地高辛组、四逆汤组、附子配干姜组和附子配甘草组大鼠的心率较模型组明显升高（P＜0.05或P＜0.01）。心率的变化能够间接反映心脏功能，以上结果提示四逆汤及其不同组分配伍均有类似地高辛的强心作用。在血流动力学方面，LVSP、＋dp／dtmax和－dp／dtmin是评价心脏收缩和舒张功能的常见指标。与正常组比较，模型组大鼠的LVSP、＋dp／dtmax和－dp／dtmin显著降低（P＜0.01）；四逆汤组和地高辛组的上述3个指标较模型组明显提高（P＜0.05或P＜0.01）；附子配干姜组的LVSP和＋dp／dtmax明显提高（P＜0.05或P＜0.01）；而附子配甘草组仅有增高趋势，差异无统计学意义。说明四逆汤和地高辛能够显著提高HF大鼠心脏的收缩和舒张功能，附子配干姜能部分改善血流动力学指标，附子配甘草的强心作用较弱，单用附子的作用最弱。

综上所述，四逆汤及其组分配伍能够不同程度地改善HF大鼠的心功能，其中四逆汤全方的强心作用与地高辛相当，附子配干姜能部分改善HF大鼠的血流动力学指标，附子配甘草的作用较弱，单用附子的作用最弱。本研究证实单纯配伍甘草和干姜能够部分增强附子的强心作用，而三药合用后对HF大鼠血流动力学指标的改善作用全面而且显著。本研究为配伍增效和临床更好的应用四逆汤治疗HF提供了实验依据。

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