类风湿因子(RF)对HAV－lgM、HCV－lgM抗体检测的影响

景红丽

(山西省运城市中心医院检验科044000)

病毒性肝炎是肝癌的重要病发原因，对人类的身心健康造成了极大危害，近几年在这方面的发病机制，检测方法等方面的深入研究也越来越多。甲型病毒性肝炎与丙型病毒性肝炎均是由肝病毒引起的传染病，可导致肝细胞炎症、变性与坏死。前者主要通过胃肠道传染，后者主要通过血液传播，一般性接触不会传染，具有高隐匿、高漏诊、高慢性化的特点。然而与之相对的是，中国公众对甲型病毒性肝炎、丙型病毒性肝炎的认知率偏低、就诊率低、治疗率低。很多病毒性肝炎患者血清中都能检测出自身免疫抗体，RF被检出的几率较高，类风湿因子(RF)是在血清中检测出的大多为IgM型，可推测，高RF浓度在有些情况下对于病毒性肝炎抗体的检测有干扰作用，尤其是IgM型抗体。但是，当前基本都是直接采用ELISA法检测患者血清病毒性肝炎IgM抗体，而研究RF对IgM抗体影响的报道比较少，本研究采用酶联免疫吸附试验对HAV－lgM、HCV－lgM抗体进行检测，在对其中的RF中和后对其再次重新检测，来研究RF对于HAV－lgM、HCV－lgM抗体检测有影响。

资料与方法

1．一般资料:选取我院2011年6月至2012年5月免疫室近一年的常规检测HAV－lgM、HCV－lgM抗体为阳性的标本。分别为抗HAV－IgM阳性标本组与抗HCV－IgM阳性标本组，并经检测两组标本HBsAg均为阴性。其中，抗HAV－IgM阳性标本:52例;抗HCV－IgM阳性标本:60例。

2．试剂:RF－－IgM诊断试剂为选用德国欧蒙公司制造，HAV－IgM抗体试剂盒和抗HCV－IgM诊断试剂盒均为上海科华生物工程股份有限公司产品，RF测定试剂为罗氏公司配套试剂。

3．主要仪器:罗氏全自动生化分析仪P800，美国BIO－RAD Model－3550uV酶标仪。

4．方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测HAV－lgM、HCV－lgM抗体，并采用速率法在全自动生化分析仪检测标本RF的值，检测严格按照说明书进行操作;中和RF实验以50m l血清加50m l单抗人RF－IgM诊断血清混合物，经过37℃孵育半小时，放入到0～8℃的容器中，在36℃半小时后，移至到4℃下过夜。在中和RF后对标本HAV－lgM、HCV－lgM抗体重新检测。

5．统计学方法:两组定性资料采用X2，P＜0．05为差异有统计学意义。

结果

1．RF测定:在两组112例标本中，RF＞20IU/mL为阳性，RF阳性标本29例。在对RF阳性进行诊断时，还要结合临床表现及其他医学检查的结果，以此来防止出现漏诊与误诊［1］。

2．RF对抗HAV－IgM阳性标本影响:52例抗HAV－IgM阳性标本组中检测出RF阳性标本15例，在中和之后再次进行检测，显示结果11例转为阴性，其他仍然表现为阳性，其中2例显示为弱阳性，假阳性率为21．2%。

3．RF对抗HCV－IgM阳性标本影响:60例抗HCV－IgM阳性标本组中检测出RF阳性标本14例，在中和之后再次检测，显示结果12例转为阴性，其他16例仍然表现为阳性，阳性率为20．0%。

4．比较RF对两组标本的影响综上结果显示，RF对两组的检测结果均有干扰，将两组数据采用X2检验，结果显示RF对两组的影响没有显著差异，无统计学意义(P＞0．05)，结果见表1。

表1 RF对抗HAV－IgM阳性标本组与抗HCV－IgM阳性标本组的影响

5．低浓度RF与高浓度RF导致的假阳性结果比较，其中78例低浓度标本中假阳性6例(RF＜160IU/m L)，34例高浓度标本中假阳性17例(RF≥160IU/mL)，将它们之间的RF对IgM抗体检测的假阳性率大小进行比较。结果显示两组差别有明显意义(P＜0．05)，表明高浓度的RF对于检测结果的干扰大。结果见表2。

表2 低浓度RF与高浓度RF导致的假阳性结果比较

讨论

病毒性肝炎分布于世界各地，也是我国常见的感染性疾病之一。目前临床上有关诊断甲型病毒性肝炎与丙型病毒性肝炎主要分别是采用酶联免疫法测定血清中的抗HAV与抗HCV。以往的一些文献资料报道了关于类风湿因子(RF)对某些酶联免疫法检测抗体试验的影响，报告称在实验中RF与包被板中某些不纯物质结合，在加入酶标抗体后，RF与抗体的Fc段结合，从而导致了假阳性的结果。同时也有报道在病毒性肝炎患者中，RF的检出率明显偏高。

类风湿因子(RF)是衡量是否患有类风湿疾病的判断标准，它的变化将会对人的身体产生较大的影响，有专家指出类风湿因子阳性或者类风湿因子高了，都很有可能是类风湿关节炎患者。类风湿因子在实验室的诊断描述中分为五种类型，分别为IgM、IgA、IgG、IgD、IgE，类风湿因子时类风湿关节炎血清中针对于IgGFc片段上抗原表位的一类自身抗体，类风湿因子阳性患者比较多，并且大多患有关节外表现。本文主要研究类风湿(RF)对于甲型病毒性肝炎、丙型病毒性肝炎IgM抗体的影响。IgM型类风湿因子是实验诊断常用的血清学指标，但其特异性与敏感性均较低［2］，对于病毒性肝炎IgM抗体类的抗体检验有干扰已经有了些报道，本院的实验也证明了RF对于两组HAV－lgM、HCV－lgM抗体检测有明显干扰。而其中的原因有可能是RF能够与包被板的抗U－IgG部分段结合。在受到干扰的标本中，RF有阳性浓度达到了610IU/mL，其中也有浓度仅为40IU/mL，在未受到干扰的标本中同样也出现了高浓度与低浓度的阳性者。这一现象似乎表明某一个体，RF对于病毒性IgM抗体的干扰没有规律可循。而其中的原因可能与RF自身的特异性与同系的特异性有关，一种RF不能与所有的IgG分子Fc部分的抗原结合，只有当RF抗原的决定簇与IgG分子上段的空间结构有互补性时才有可能结合，即只有标本中血清存有能与IgG结合的RF时，并且RF必须达到一定的浓度，才能够有效地与标本中的病毒肝炎IgM抗体竞争性和抗u链结合，近而导致呈现假阳性。所以RF与IgGFc部分段的结合是随机的，没有结合规律可循。因此在某一标本中的RF是否能够引起干扰事前没有办法预料到，并不是只要RF的浓度高就能对标本产生干扰，低浓度的就不会有干扰，这也是本院实验所证实到的。但是在实验结果还可以看到，对于群体高浓度RF的干扰率明显比低浓度RF高。

RF是一种没有特异性免疫复合物存在的血清学的标志，凡是对于血清IgM能够产生抗体的人都可以在血清中检测RF［3］。正常人大约占有1%～5%，有文献报道在正常群体中的RF南方人的阳性率比北方人的高。同时在一些具有感染性的疾病中，比如感染性心内膜炎、慢活肝等疾病中，也可以检测到RF。所以RF在病毒性肝炎IgM抗体的临床检测中导致的假阳性率比较高，应该给予重视。

综上所述，因为RF在正常人和多种疾病的人群的血清中存在，所以经常会对检测结果产生影响，因此在对此类IgM抗体阳性标本检测时，最好是对RF先中和然后在进行检测，以此来提高检测结果的准确率与可靠性。类风湿因子(RF)对于甲型病毒性肝炎与丙型病毒性肝炎IgM抗体均有影响干扰，但对两组的干扰率并没有显著性差异，高浓度RF比低浓度RF的对HAV－lgM、HCV－lgM抗体检测干扰率较大，本文的探究为临床判断检验出现的假阳性结果提供了参考，具有临床应用价值。

1 隋振铁，郝铁，刘冰．AKA抗体、抗－CCP抗体和RF分型在类风湿性关节炎诊断的应用［J］ ．标记免疫分析与临床，2011，18(6):423－425．

2 赵艳，史梅，王清平．抗CCP抗体对关节疾病患者类风湿关节炎的诊断价值研究［J］ ．中国医疗前沿，2011，6(17):58－59．

3 刘松坚，徐云峰．类风湿因子及其浓度对甲肝、丙肝IgM抗体的影响［J］ ．中国疗养医学，2009，18(9):842－843．