322例HIV抗体筛查阳性标本结果分析

曾麟?李爱莲

[摘要] 目的 了解官渡区HIV抗体筛查试验中出现假阳性的重点人群及原因。 方法 对2009～2012年本筛查实验室常规检测筛查阳性标本以及辖区内检测点送检的筛查阳性标本与确证试验反馈结果相关资料进行分析。 结果 筛查阳性与确证阳性总体符合率较低为84.47%。婚检、孕产妇、术前检测3类人群HIV抗体筛查假阳性高，婚检人群较高。 结论 现有技术无法避免HIV抗体筛查假阳性现象，应采取有效措施最大限度的保证检测结果的准确性。

[关键词] HIV抗体；筛查试验；假阳性

[中图分类号] R512.91 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2013）06-163-02

艾滋病（AIDS）是由人类免疫缺陷病毒感染（human immunodeficiency virus，HIV）引起的一种严重传染病，至今尚无有效的预防疫苗和根治药物。中国现有AIDS病毒感染者和患者约70万人，相邻西南边境的云南、广西尤其严重[1-2]。目前，HIV血清学诊断仍然是AIDS早期诊断的主要依据，然而在实际检测工作中，HIV抗体的筛查试验中仍存在假阳性的情况。为了解官渡区HIV抗体筛查试验假阳性现象的特点和形成原因，对2009～2012年初筛试验结果呈阳性的322例标本与其确证试验结果分析如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2009年1月～2012年12月昆明市官渡区各艾滋病初筛实验室和检测点送检的各类人群HIV抗体筛查阳性、可疑阳性标本，共计322例。

1.2 试剂与仪器

筛查试验使用DNP-9162型电热恒温培养箱，HFsafe-1200型生物安全柜，Anth.s2010型酶标仪，BIO-RAD MODEL 1575型洗板机，Thermo 20～200 μL规格的微量移液器。快速诊断主要采用日本雅培公司的硒标试剂。ELISA法采用珠海丽珠，北京万泰公司生产的第3代HIV1+2型抗体诊断试剂。

确证试验使用瑞士TECAN集团研发的Profiblot 48全自动蛋白印迹仪和新加坡MP生物医学亚太有限公司生产的HIV BLOT 2.2（HIV-1/2型）免疫印迹试剂。

1.3 方法

1.3.1 调查方法 统计处理初筛人员的个人资料，调查内容主要为性别、年龄、职业、文化程度、高危行为有无及次数、心理状态、艾滋病相关知识了解程度等。

1.3.2 检测方法 采集静脉血，依照《全国艾滋病检测技术规范》的标准，采用硒（金）标免疫层析法（快速诊断法）和酶联免疫吸附试验（ELLSA法）进行HIV抗体初筛和复检。所有标本同时采用一种试剂盒一种快速检测方法进行复检，测试均为阴性，判定HIV阴性；若均为阳性或一种阳性，送昆明市疾病预防控制中心艾滋病确证试验室采用免疫印迹法（Western-blotting，WB）确认，以确证检测结果作为最终结果。

2 结果

2009年1月～2012年12月各类人群HIV抗体初筛试验呈阳性标本共322例，经确证试验检测，确证阳性272例，阴性19例，不确定6例，确证阳性符合率为84.47%。其中，术前检测者、婚检、孕产妇等人群的确证符合率低于总体平均值。确证阳性符合率最高的是美沙酮门诊人群，确证率100%。确证符合率最低的是婚检人群，40例初筛呈阳性标本中，25例确证为阳性结果，确证阳性符合率62.5%。见表1。

3 讨论

随着HIV抗体检测技术的发展，目前常用检测方法有酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫层析法（金标，硒标）、免疫印迹试验（WB）、化学发光或免疫荧光法、明胶颗粒凝集试验（PA）、间接免疫光法（IFA）等[3]。各类检测技术不断改进，实验试剂不断优化，筛查试验的可靠性不断增加。但HIV抗体检测方法存在一定的非特异性，2009～2012年各类人群筛查试验阳性标本322例，确证阴性22例，占筛查阳性6.57%，与以往文献报道大约有4%～20%的HIV抗体筛查试验阳性标本在确证试验中呈阴性[4]结果一致。婚检、孕产妇、术前检测人群HIV抗体筛查阳性确证率低于总体平均值。陈春等[5]调查显示，怀孕期间，产妇体内许多指标均处于非参考范围，属于正常现象，受孕产妇体内血清中产生的非特异性物质干扰，孕产妇的HIV抗体假阳性的比例高于其他人群。血浆标本相对凝固不全及分离血清时全血凝固不全，也是婚检、术前检测人群假阳性率高的原因之一。

引起筛查试验假阳性现象的因素很多，主要由以下几个方面引起：（1）某些恶性疾病、输血等情形下及受检者产生自身免疫应答反应时，都可产生与HIV抗体发生交叉反应原。（2）标本质量未控制好，如发生溶血后直接影响ELISA法的检测结果。溶血产生血红素基团具有过氧化物的活性，在温育过程中吸附于固相，与加入的HRP底物反应显色。（3）实验室硬件设施，温湿度等是否在控，直接关系到试验的有效性和准确性。洗板时，血液中的纤维蛋白容易堵塞洗板机的出吸液口，影响洗板效果。（4）检验人员专业素质不高，操作不规范，检验技能差等原因也会导致假阳性率升高。（5）ELISA法及免疫层析法的特异性不如免疫印迹法，特异性并不能达到100%，不可避免地会出现检测试验阳性而确证试验阴性。（6）不同厂家生产的试剂盒包被抗原不同及生产工艺不同，可以影响最终检测结果。

4 结论

在目前的技术条件下，HIV筛查假阳性现象却又不可避免，因此实验室必须采取相应措施最大限度的保证检测结果的准确性。首先，要重视标本质量的控制，降低采血过程、标本容器、运送过程、标本保存等各个环节因素对实验的影响，确保使用高质量的标本进行相关检测。其次，做好室内质控、规范实验室管理，提高检验人员是检验操作熟练度等也是提高检测质量的重要措施。再次，针对不同的检测人群，科学选择合适、高效的诊断方法和试剂。如术前检测人群进行HIV抗体筛查时，应选择敏感性高的ELISA试剂；对于美沙酮门诊人群可采用获取结果快速的胶体硒法。最后，要结合实验室现有条件，优化检测条件。如对血清、血浆标本检测前4000 r/min离心5 min和适当增加水浴时间均可有效降低假阳性率[6]。

[参考文献]

[1] 沈银忠，张永信.艾滋病抗病毒治疗的新认识[J].上海医药，2011，32（11）：527-530.

[2] 宋丽萍，耿文奎，蓝文展.广西壮族自治区HIV母婴传播状况及预防策略[J].中国妇幼保健，2012，27（13）：1927.

[3] 王晓娟.HIV检测试剂的发展及应用[J].中国生物制品学杂志，2008，21（4）：346-348.

[4] 梁彩云，高凯，李燕，等.HIV抗体筛查试验阳性-确证试验阴性标本的分析[J].中国病原生物学杂志，2010，5（4）：256-257.

[5] 陈春，王庆.成都22507例妇女HIV抗体检测结果分析[J].四川医学，2007，28（12）：1337-1338.

[6] 彭宽，李俊明，鞠北华，等.抗人类免疫缺陷病毒抗体酶联免疫吸附法检测条件的优化[A].国际检验医学杂志，2012，33（5）：582-583.

（收稿日期：2013-02-22）