高同型半胱氨酸血症与认知损害的关系研究

杨增云 张兰娥?卢国华?何冰?范静波

[摘要] 目的 探讨高同型半胱氨酸血症（hyper-homocysteinemia，Hhcy）与认知损害的关系并探明引起认知损害的机制。 方法 采用酶联免疫分析法（ELISA）检测30名MCI患者和45名正常老年人的血清同型半胱氨酸（Hcy）、S-腺苷甲硫氨酸（SAM）和S-腺苷同型半胱氨酸（SAH）的浓度。 结果 MCI组血清Hcy浓度（31.03±12.42）μmol/L、SAH浓度（6.63±1.72）μmol/L与正常组相比差异有统计学意义（P<0.01）。SAM浓度（80.10±12.13）μmol/L及MMSE评分（25.45±1.22）分均低于正常组，差异有统计学意义（P<0.01）。同时MCI组Hcy浓度与SAM浓度及MMSE评分均呈负相关，与SAH浓度呈正相关（r=-0.61、-0.57、0.62，P<0.05）。 结论 血清Hcy、SAM和SAH浓度与轻度认知功能障碍具有相关性，Hcy通过抑制甲基化进程影响认知损害。

[关键词] 高同型半胱氨酸血症；轻度认知功能障碍

[中图分类号] R743 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2013）06-13-03

轻度认知功能障碍（mild cognitive impairment，MCI）是介于正常衰老和痴呆之间的一种认知缺损状态。Petersen等追踪研究发现，MCI患者每年约有10%～15%转化为AD，是AD的高危人群[1]。由于认知功能障碍症状给患者本人、家庭及照顾者均造成极大的影响，因此这方面的研究已经越来越受到研究人员的关注[2]。多项临床及基础研究都已证实Hhcy可致动脉硬化，且为心脑血管疾病的独立危险因素之一[3-4]。在MCI众多危险因素中，Hhcy是一个可以有效干预与预防的因素，且MCI阶段是预防痴呆的一个最佳时期。本研究通过观察Hhcy与MCI的关系，了解其对认知损害的影响并为临床防治MCI提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

于2012年1～2月，参照欧洲AD协会MCI工作组2006年

提出的新的诊断标准[5]，从潍坊某3个大型社区选取30例MCI老人，其中男17例，女13例；年龄55～75岁，平均（65.01±8.52）岁；文化程度：小学及以下12例，初中9例，高中6例，大专及以上3例，平均受教育年限（6.50±2.29）年；MMSE评分（25.45±1.22）分。纳入标准：（1）患者或亲属主诉认知障碍；（2）患者或亲属报告其认知功能在过去1年里与以往相比出现衰退；（3）临床评定证明存在认知障碍；（4）没有严重的日常生活能力减退；（5）没有痴呆。MMSE≥24，CDR=0.5，ADL≤26（21项版本）。排除标准：（1）嗜酒；（2）长期服用精神病药物；（3）严重头部外伤史；（4）抑郁症，精神分裂症，甲状腺疾病，贫血，维生素B12及叶酸缺乏；（5）糖尿病伴并发症；（6）心，肝，肾功能障碍者及近1个月内服用影响血浆Hcy水平的药物者严重的视力和听力障碍者。选择同期健康体格检查者45例为对照组，其中男28例，女17例：年龄55～75岁，平均（67.80±7.23）岁；文化程度：小学及以下18例，初中14例，高中10例，大专及以上3例，平均受教育年限（6.26±3.19）年；MMSE评分（28.65±0.18）分。两组人员的性别、年龄、受教育程度、身体状况等一般资料，差异无统计学意义（P>0.05）。入选老人均知情并同意参与实验。

1.2 方法

（1）生物学指标测定：受检对象于清晨空腹抽取周围静脉血4 mL，置于加有促凝剂的一次性采血管中静置1～2 h待血液凝固后3000 r/min离心15 min，分离出血清标本，置于-70℃冰箱保存待测并排除溶血标本。采用ELISA法测定血清Hcy、SAM、SAH的浓度。测定仪为美国Bia-Rad Coda公司生产的全自动板式酶标仪及其配套试剂盒，各项操作具体程序严格按照试剂盒的说明书进行。本试剂盒Hcy≥15 μmol/L为Hhcy。每批测定均包括质控样品。（2）MMSE评分检查：被检者同时由研究人员进行MMSE评分测试。MMSE评分包括定向力、记忆力、注意力和计算力、回忆能力、语言能力，共包括5个维度，总分0～30分，每个问题回答正确记1分，回答错误或拒绝回答均不得分，评分越高代表认知能力越好[6]。本量表为国际通用的认知功能筛查量表，均经过信度和效度的检验。

1.3 统计学处理

采用SPSS17.0统计软件进行分析，两组检测指标比较采用t检验，相关性采用Person相关分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清Hcy、SAM、SAH浓度测定结果及MMSE评分结果

MCI组老人血清Hcy、SAH浓度高于正常组老人，血清叶酸、SAM浓度低于正常组老人，MMSE评分检查的结果显示，MCI组老人的得分低于正常组老人的得分，差异有统计学意义（P<0.01）。见表1。

2.2 相关性分析

将MCI组Hcy浓度与SAM浓度及MMSE评分进行相关分析，结果发现，MCI组Hcy浓度与SAM浓度及MMSE评分均呈负相关性，与SAH浓度成正相关性，r=-0.61、-0.57、0.62，均P<0.05。

3 讨论

同型半胱氨酸（Hcy），是一种含硫氨基酸，是蛋氨酸循环的重要环节和蛋氨酸代谢的中间产物。其合成的具体过程是：蛋氨酸首先形成S-腺苷甲硫氨酸（SAM），SAM去甲基生成S-腺苷同型半胱氨酸（SAH），再进一步脱去腺苷生成Hcy。自从Aba lan等首次报道Hhcy可能是AD的危险因素后，Hcy与认知功能损害及AD的关系逐渐成为广泛关注的焦点[6]。本研究发现，MCI组老人血清Hcy、SAH浓度较正常组升高，SAM浓度较正常组降低，结果与以往的研究结果一致[7-10]，表明Hhcy与MCI的发病有相关性，因此推测低或者正常的Hcy水平可能有效防止MCI向AD转化，这为临床治疗MCI提供了一个新的方向。研究还发现，Hhcy患者MMSE的评分显著低于正常组且Hcy浓度与MMSE评分成负相关，表明Hhcy可能与认知功能的损害有关，Hcy浓度升高一方面抑制SAH的分解而使其水平增高，而SAH作为一种强效甲基转移酶抑制剂，能减慢脑组织中甲基化过程，使神经元对损害和凋亡更加敏感。另一方面Hhcy引起甲基供体SAM缺乏，导致尿嘧啶错配同时影响了嘌呤和胸腺嘧啶修复DNA损伤的能力，使得神经细胞对Aβ所致细胞死亡的敏感性增强，造成Aβ对DNA不可逆的损伤引起认知功能的损害。

综上Hcy作为甲基循环的中间产物，主要通过细胞内Hcy浓度升高使细胞内的SAH增加，SAM的含量降低，SAM/SAH的比例降低，导致体内许多甲基化酶如苯基乙醇胺N-甲基转移酶和儿茶酚-O-甲基转移酶等的活性降低[11]，抑制体内许多重要的甲基化作用[12-13]，这些重要底物的低甲基化均可导致神经细胞功能受损引起认知功能的损害。本研究从高Hcy抑制甲基化过程的机制出发阐明Hhcy引起MCI认知损害的一个机制，为延缓MCI的认知损害及预防痴呆的发生起到了重要作用。

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（收稿日期：2013-02-28）