沈阳地区室内常见尸食性蚤蝇幼期识别

冯典兴，刘广纯

(沈阳大学城市有害生物治理与生态安全辽宁省重点实验室，沈阳 110044)

在刑事凶杀案件的侦破中，死后间隔时间(post－mortem interval，PMI)的准确判断具有特别重要的意义，它是确定破案范围，确定嫌疑人以及排除作案可能性的主要依据之一。尸食性蝇类发育生物学在死后间隔时间推断中有着重要地位，当死后间隔时间大于3 d时尤其如此 (Catts and Haskell，1991)。

蚤蝇是双翅目较大的科之一，Smith(1986)认 为 Megaselia，Aneurina，Conicera， Diplonevra，Dohrniphora，Metopina和Triphleba等属蚤蝇入侵脊椎动物的尸体。到目前为止，墓柩锥蚤蝇Conicera tibialis Schmitz，红足异蚤蝇 Megaselia rufipes(Meigen)，隐迹异蚤蝇 Megaselia abdita Schmitz，蛆症异蚤蝇Megaselia scalaris(Loew)，东亚异蚤蝇Megaselia spiracularis Schmitz，库异蚤蝇 Megaselia curtineura(Brues)和裸胫寒蚤蝇 Triphleba nudipalpis(Becker)的幼虫或蛹已经从人尸体上收集到 (Greenberg and Wells，1998;Campobasso et al.， 2004;DisneyandManlove， 2005， 2009;Disney，2008;Manlove and Disney，2008;Boehme et al.，2010;Reibe and Madea，2010;Thevan et al.，2010;Martín － Vega et al.，2011)。

在法医昆虫学中，由于丽蝇是最先到达尸体的蝇类，所以死后间隔时间主要是靠丽蝇的发育速率来推断。但是，当尸体出现在这些大型蝇类无法进入的场所，如相对密闭的室内，就无法利用它们来准确的推断死后间隔时间。体型微小的蚤蝇可轻易通过纱窗或门窗的缝隙进入室内入侵尸体，从而成为命案现场主要甚至是唯一的昆虫证据 (Greenberg and Wells，1998;Manlove and Disney，2008;Boehme et al.，2010)。因此，在相对密闭的空间，利用尸食性蚤蝇推断死后间隔时间比丽蝇更准确 (Reibe and Madea，2010)。

利用蝇类发育规律推断死后间隔时间，除了要掌握与虫龄密切相关的指标外，还需准确鉴定幼虫属种。在我国，虽有关于蚤蝇作为主要类群出现在动物尸体上的报道 (胡萃，2000;王江峰等，2008)，但由于蚤蝇研究起步较晚，对蚤蝇的认识不足，未引起足够的重视。本文对沈阳地区室内常见的尸食性蚤蝇幼虫及蛹期形态学特征进行描述，旨在为这些种类的识别提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 材料

分别于2010年和2011年7～10月间，在沈阳大学生物技术研究所及皇姑区一出租屋内 (仅以纱窗与外界相通)，利用瘦猪肉诱捕蚤蝇。诱捕蚤蝇带回实验室，相对湿度75%，25℃恒温培养箱中饲养。成虫经鉴定为蛆症异蚤蝇 Megaselia scalaris(Loew)，东亚异蚤蝇 Megaselia spiracularis Schmitz，广东栅蚤蝇 Diplonevra peregrina(Wiedemann)和角喙栓蚤蝇 Dohrniphora cornuta(Bigot)(刘广纯，2001)。

1.2 方法

1.2.1 样品收集

1～3龄幼虫70℃热水烫死后，于75%乙醇中保存。蛹待长出呼吸角后，取出4℃冰箱中保存，待用。

1.2.1 观察

在Olympus BX41实体显微镜下，观察标本的表面形态;对于口器、触角和气门等结构的观察，先将标本经10%KOH溶液消化后，加拿大树胶制成封片标本，在光学显微镜下观察，利用Olympus DP71显微数码相机拍照。

2 结果与分析

2.1 东亚异蚤蝇幼虫及蛹特征

东亚异蚤蝇幼虫呈短细线状，分为12节，以突起带相隔 (图1－A和B)。口器暗褐色至黑色，背桥 (dorsal bridge，db)在1龄幼虫中不明显，侧板 (lateral plate，lp)发达 (图1－C)。而2龄和3龄幼虫口钩、背桥则很明显 (图1－D和E)。触角一侧具有4个感器 (图1－F)。末端器官(terminal organ，to)具有11个球形感器 (图1－G)。前气门出现在2龄和3龄幼虫的第2节 (图1－H)。蛹为土黄色，半透明，背部前端具有1对短小的呼吸角 (图1－I)。

2.2 蛆症异蚤蝇幼虫及蛹特征

蛆症异蚤蝇幼虫呈短细线状，分为12节，以突起带相隔 (图2－A和B)。口器暗褐色至黑色，背桥明显，侧板发达 (图2－B，C和D)。1～3龄幼虫节间具有小突起 (图2－E，F和G，箭头所示)。触角一侧具有6个感器 (图2－H)。前气门出现在2龄和3龄幼虫的第2节 (图2－I)。末端器官具有大约10个球形感器，大致排成2行(图2－J，箭头所示)。蛹为土黄色至暗黄色，半透明，背部前端具有1对呼吸角，末端略弯向背部 (图2－K)。蛹背部节间具有突起 (图2－L)。

2.3 角喙栓蚤蝇幼虫及蛹特征

角喙栓蚤蝇1龄幼虫体白色，分为12节，第3～11节具有细长突起。末节具有6个粗大的羽毛状突起。2龄和3龄幼虫体黄色，3龄幼虫第3节背部具有2～6块红色斑状背板 (图3－A)。口器暗褐色至黑色 (图3－B，E和F)，1龄幼虫口器下唇骨前端呈三角形，背桥无色 (图3－B和C)。2龄和3龄幼虫口器的背桥逐渐褐化 (图3－D和G，箭头所示)。1龄幼虫突起分2节，基节光滑，末节呈刷子状 (图3－H)。2龄和3龄幼虫的突起呈锥形，从基部到顶部长满鬃 (图3－I)。体节表面长满长短不等的鬃毛 (图3－J)。1龄幼虫腹面第3节胸板 (sternal plate)前缘呈锯齿状 (图3－K，箭头所示)。蛹为红褐色 (图3－L)，背部前端具有1对羽毛状呼吸角 (图3－M)。

2.4 广东栅蚤蝇幼虫及蛹特征

广东栅蚤蝇1龄幼虫体白色，分为12节，第3～11节具有细长突起。末节具有6个粗大的羽毛状突起。2龄和3龄幼虫体黄色，3龄幼虫第3节和第4节各具有2块红色斑状背板 (图4 A)。口器暗褐色至黑色 (图4－B，E和F)，1龄口器下唇骨前端分叉 (图4－B，箭头所示)，背桥无色(图4－C)。2龄和3龄幼虫口器逐渐变大，背桥逐渐明显，半透明 (图4－D，E，F，G和H)。1龄幼虫突起分2节，末节呈穗状 (图4－I)。2龄和3龄幼虫的突起呈锥形，从基部到顶部长满鬃(图4－J)。体节表面长满锥形的小突起 (图4－K)。1龄幼虫第3节胸板前缘呈波浪状 (图4－L)。蛹为红褐色，背部中央及两侧具4列细长的锥形突起，背部前端具有1对细长的呼吸角 (图4－M)。

图1 东亚异蚤蝇幼虫和蛹形态特征Fig.1 Morphological characteristics of M.spiracularis Schmitz larvae and pupae

图2 蛆症异蚤蝇幼虫和蛹形态特征Fig.2 Morphological characteristics of M.scalaris(Loew)larvae and pupae

图3 角喙栓蚤蝇幼虫和蛹形态特征Fig.3 Morphological characteristics of D.cornuta(Bigot)larvae and pupae

图4 广东栅蚤蝇幼虫和蛹形态特征Fig.4 Morphological characteristics of D.peregrina(Wiedemann)larvae and pupae

3 结论与讨论

蝇类幼虫和蛹是案发现场经常发现的虫态，对其属种的鉴定是利用其发育规律推断PMI的前提。本研究通过连续两年的室内诱捕，确定蛆症异蚤蝇、东亚异蚤蝇、角喙栓蚤蝇和广东栅蚤蝇为沈阳地区室内常见的尸食性蚤蝇。其中2种异蚤蝇，蛆症异蚤蝇和东亚异蚤蝇幼虫及蛹形态相似;角喙栓蚤蝇和广东栅蚤蝇低龄幼虫相似，但通过角喙栓蚤蝇和广东栅蚤蝇背部突起很容易将二者与另外两种异蚤蝇区分开。

蛆症异蚤蝇幼虫1～3龄幼虫节间具有小突起，口器背桥明显，这两个特征是东亚异蚤蝇缺少的。二者的末端器官的球形感器排列也不相同，其中蛆症异蚤蝇的感器大致排成2列，而东亚异蚤蝇的感器为分散排列。相对于东亚异蚤蝇蛹的光滑表面，蛆症异蚤蝇背部节间则具有小突起;此外，蛆症异蚤蝇呼吸角稍长于东亚异蚤蝇，且末端略弯向背部。

广东栅蚤蝇1龄幼虫体白色，分为12节，第3～11节具有细长突起。末节具有6个粗大的羽毛状突起。这一形态与角喙栓蚤蝇极其相似。但广东栅蚤蝇1龄幼虫突起的末节呈穗状，而角喙栓蚤蝇呈刷子状;1龄口器下唇骨前端分叉，背桥无色，而角喙栓蚤蝇下唇骨前端呈三角形，背桥逐渐褐化;1龄幼虫第3节胸板前缘呈波浪状，而角喙栓蚤蝇呈锯齿形;2龄幼虫除口器有差别外，广东栅蚤蝇体节表面长满锥形的小突起，而角喙栓蚤蝇则是长短不等的鬃毛。二者3龄幼虫的体长、口器和背部突起差别明显。角喙栓蚤蝇蛹明显小于广东栅蚤蝇蛹，且呼吸角呈羽毛状，很容易识别。

本研究对4种尸食性蚤蝇3龄幼虫的口器、体壁突起、末端器官和蛹呼吸角等具有分类学意义的特征进行了描述，并提供了清晰的照片，为这4种尸食性蚤蝇的幼期识别提供了参考依据，也为利用尸食性蚤蝇推断室内案件PMI奠定基础。我国幅员辽阔，地理和气候类型多样，具有丰富的尸食性蚤蝇资源。因此，进一步系统开展蚤蝇幼期分类研究，建立分类系统将是我们下一步的工作的重点。

References)

Boehme P，Amendt J，Disney RHL，Zehner R，2010.Molecular identification of carrion－breeding scuttle flies(Diptera:Phoridae)using COI barcodes.Int.J.Legal Med.，124(6):577 －581.

Campobasso CP，Disney RHL，Introna F，2004.A case of Megaselia scalaris(Loew)(Dipt.，Phoridae)breeding in a human corpse.Aggrawal's Internet J.For.Med.Toxicol.，5(1):3 －5.

Catts EP，Haskell NH，1991.Entomology and Death:A Procedural Guide.South Carolina:Joyce's Print Shop.9－37.

Disney RHL，2008.Natural history of the scuttle fly，Megaselia scalaris.Annu.Rev.Entomol.，53(1):39 －60.

Disney RHL，Manlove JD，2005.First occurrences of the phorid，Megaselia abdita， in forensic cases in Britain. Med. Vet.Entomol.，19(4):489 －491.

Disney RHL，Manlove JD，2009.First report of Triphleba nudipalpis(Becker)(Diptera:Phoridae)in a forensic case.For.Sci.Int.，191(1－3):e1－e3.

Greenberg B，Wells JD，1998.Forensic use of Megaselia abdita and M.scalaris(Phoridae:Diptera):case studies，development rates，and egg structure.J.Med.Entomol.，35(3):205 －209.

Hu C，2000.Forensic Entomology.Chongqing:Chongqing Publishing House.11－65.［胡萃，2000.法医昆虫学.重庆:重庆出版社.11－65］

Liu GC，2001.A Taxonomic Study of Chinese Phorid Flies(Diptera:Phoridae).Shenyang:Neupress.5－110.［刘广纯，2001.中国蚤蝇分类.沈阳:东北大学出版社.5－110］

Manlove JD，Disney RHL，2008.The use of Megaselia abdita(Diptera:Phoridae)in forensic entomology.For.Sci.Int.，175(1):83 －84.

Martín － Vega D，Gómez－ Gómez A，Baz A，2011.The“coffin fly”Conicera tibialis(Diptera:Phoridae)breeding on buried human remains after a postmortem interval of 18 years.J.For.Sci.，56(6):1654－1656.

Reibe S， Madea B，2010. Use of Megaselia scalaris(Diptera:Phoridae)for post－ mortem interval estimation indoors.Parasitol.Res.，106(3):637 －640.

Smith KGV，1986.A Manual of Forensic Entomology.Ithaca:Cornell University Press.1 －205.

Thevan K，Disney RHL，Ahmda AH，2010.First records of two species of Oriental scuttle flies(Diptera:Phoridae)from forensic cases.For.Sci.Int.，195(1):e5 － e7.

Wang JF，Li ZG，Yu LC，Chen QS，Huang AH，Liao MQ，Xie YT，Chen YC，2008.Succession and development of insects on pig carcasses and their significances in estimating PMI in the Pearl River Delta region.Acta Entomol.Sin.，51(4):402－410.［王江峰，李志钢，余里聪，陈强盛，黄安海，廖明庆，谢云铁，陈玉川，2008.珠江三角洲猪尸体上昆虫群落的演替及其对法医学中死亡时间推断的指示意义.昆虫学报，51(4):402－410］