类风湿关节炎滑液MMPs表达与血清免疫球蛋白的相关性研究

周 涛 (湖北省武汉市普仁医院风湿免疫科，湖北 武汉 430080)

类风湿关节炎(RA)的病因和发病机制目前尚不明确，RA是一种免疫介导以滑膜炎为病理特征的自身免疫病，关节破坏是RA最主要的表现，体液免疫参与RA的发病［1］。近些年研究表明，基质金属蛋白酶(MMPs)可降解软骨和骨质，在关节的破坏中占有极重要地位。笔者通过检测RA患者和健康者血清免疫球蛋白及滑膜液MMP－1、MMP－3水平，探讨体液免疫与MMPs在RA发病过程中的变化和两者之间的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料:42例RA患者为2010年10月～2012年5月在武汉市普仁医院风湿免疫科住院患者，男13例，女29例，年龄27～62岁，平均(47.91±13.79)岁;平均病程(5.3± 3.28)年;正常对照组27例，男10例，女17例，平均(45.64± 11.27)岁。两组年龄、性别、职业构成等方面比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。RA患者均符合美国风湿病学会2010年(ACR)修订的RA诊断标准，排除其他风湿性疾病、感染、肿瘤、严重肝肾损害及心脑血管疾病等;根据RA疾病活动度积分(DAS28)将RA患者分为两组:DAS28评分≥3.2为RA活动组(男7例，女15例)，DAS28评分≤2.6为RA缓解组(男6例，女14例)，两组一般资料比较差异无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 取样:①空腹取肘中静脉血3 ml，3 000 r/min，离心15 min，分离血清，用1.5 ml Eppendorf管分装，置－20℃保存待测。②抽取膝关节滑液1～2 ml，抽取前做关节屈伸运动，保障关节内滑液混合均匀，并无血液混入。

1.2.2 检测:采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测滑液组织中MMP－1及MMP－3的表达(MMP－1，MMP－3检测试剂盒购自上海西唐生物科技有限公司);采用免疫散射比浊法测定滑膜液中免疫球蛋白IgG及IgM水平，兔抗人IgG、IgM血清由上海长征医学科学有限公司提供.采用日立7600～020全自动生化分析仪进行检测。

1.3 统计学方法:所有数据用SPSS17.0软件处理，试验数据以均数±标准差(±s)表示，采用ANOVA进行组间差异比较，MMPs与免疫球蛋白的相关性采用线性回归分析，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 滑膜液中MMP－1及MMP－3的表达情况:MMP－1及MMP－3在RA活动组中的表达均显著高于RA缓解组和正常对照组(P＜0.05)。详见表1。

表1 滑膜液中MMP－1及MMP－3的表达情况比较(±s)

表1 滑膜液中MMP－1及MMP－3的表达情况比较(±s)

注:与正常对照组比较，①P＜0.05;RA活动组与缓解组比较，②P＜0.05

组别 例数 MMP－1(ng/ml) MMP－3(ng/ml) RA活动组 22 179.54±53.82② 243.79±78.56①②RA缓解组 20 118.41±35.74① 165.34±50.27①正常对照组27 47.6±25.93 76.61±36.50

2.2 血清中IgG及IgM表达情况:IgG及IgM在RA活动组中的表达均显著高于RA缓解组(P＜0.05)。详见表2。

表2 血清中IgG及IgM表达情况(±s)

表2 血清中IgG及IgM表达情况(±s)

注:与正常对照组比较，①②P＜0.05;RA活动组与缓解组比较，③P＜0.05

组别 例数 IgG(μg/ml) IgM(μg/ml) RA活动组 22 19.47±3.72①③ 6.18±0.46①③RA缓解组 20 14.62±2.59② 2.75±0.38正常对照组27 10.71±5.22 2.23±3.15

2.3 RA患者滑膜液中MMP－1及MMP－3与血清中IgG及IgM的相关性:RA患者滑膜液中MMP－1、MMP－3与血清中IgG及IgM均呈现直线正相关关系(P＜0.05)。详见表3。

表3 RA患者滑膜液中MMP－1及MMP－3与血清中IgG及IgM的相关性

3 讨论

目前RA被认为是一种病因不明的、以反复发作滑膜炎为主要病理表现的自身免疫病。近些年来研究表明，体液免疫在RA发病过程中发挥着重要作用，免疫球蛋白是一组具有抗体活性的蛋白质，血清IgG、IgM水平可作为RA病情、疗效评价的客观指标;本试验研究结果显示，RA患者随着病情的缓解，血清IgG、IgM的表达水平显著下降，与上述结论一致。RA致病因子通过活化Th细胞，激活B细胞分泌大量免疫球蛋白，形成大量免疫复合物，沉积于关节滑膜处，诱导滑膜炎性反应的产生;另外活化的Th细胞分泌多种细胞因子及炎性反应介质，亦会进一步加剧免疫联级反应，加重关节滑膜组织损伤［2］。影像学研究显示，RA患者在发病早期就会表现出显著的软骨侵蚀及骨髓内水肿，随病情发展软骨及骨质破坏进一步加剧，这与RA患者滑膜液中大量表达基质金属蛋白酶(MMPs)有着密切联系;研究发现，MMPs的异常表达可降解关节软骨及骨质，从而造成关节破坏，参与RA发病［3］; MMP－3被认为是导致软骨降解的最重要的蛋白酶，不仅能直接降解软骨和骨质对RA患者关节产生破坏，还能激活间质胶原酶MMP－1发挥生物学效应破坏关节，而蛋白水解酶的释放和其后在基质中的活化破坏了基质屏障，导致胶原崩解和蛋白多糖的分裂，从而导致软骨细胞生存的微环境恶化。释放的炎性细胞因子参加关节炎性反应，软骨细胞无法从基质中获得充分的营养而致功能受损，形成基质－软骨细胞之间恶性循环，导致关节软骨结构可溶性增加。同时血管增生形成血管翳－软骨结合区纤维增生，造成关节变形畸形强直致残［4］。本文试验结果显示，RA患者滑膜液MMP－1、MMP－3均显著升高，当RA病情缓解时，MMP－1、MMP－3表达亦降低，这与文献报道一致。本试验对RA患者血清免疫球蛋白IgG、IgM与滑膜液MMP－1、MMP－3的相关性分析表明，MMPs与免疫球蛋白呈直线相关，提示RA致病过程中免疫球蛋白的异常表达会促进局部MMP－1、MMP－3水平的上调，这可能是加剧软骨和骨质破坏的重要过程。笔者认为，抑制RA体液免疫反应，下调MMPs表达可能是缓解RA骨质破坏的有效治疗方法。

［1］ 潘继承，倪黎刚，朱 建.联合检测RA患者血清IG、C、ESR、RF和CRP的临床意义［J］.江苏医药，2011，7(5):598.

［2］ 徐 雯，陶 娟.血清免疫球蛋白、补体水平与初诊类风湿性关节炎活动度的相关性［J］.临床医药实践杂志，2008，17(10):815.

［3］ 卢 洁，魏国忠，戴利亚.IL－17、MMP－3在类风湿关节炎患者滑膜液及血浆中的表达及意义［J］.放射免疫学杂志，2011，24(2):205.

［4］ 周沈贤，金忠棋，陈 健.基质金属蛋白酶及活性酶在类风湿关节炎上表达研究［J］.浙江创伤外科，2006，11(1):12.