大蒜素对ketr-3裸鼠肾癌移植瘤的抑制作用

2013-04-02 10:12莫金水冯建华乐有为邝世航广东省深圳市龙岗区龙岗中心医院泌尿外科广东龙岗518116
吉林医学 2013年14期
关键词:肾癌灌服皮下

莫金水,冯建华,乐有为,邝世航,莫 卒 (广东省深圳市龙岗区龙岗中心医院泌尿外科,广东 龙岗 518116)

肾细胞癌是最常见的泌尿生殖系统恶性肿瘤之一,其发病率位居泌尿生殖系肿瘤的第2位,仅次于膀胱癌。肾癌恶性度较高,且发病率呈现逐年上升的趋势。虽然近年来影像学技术发展迅速,诊断有较大进展,但RCC起病隐匿,早期诊断仍非常困难,约有30%的患者在确诊时已有远处转移。研究显示,大蒜主要是通过其有效成分大蒜素起到对肿瘤的防治作用,但目前大蒜素的抗肿瘤作用机制尚未完全明确。本试验通过建立ketr-3细胞Balb/c裸鼠移植瘤模型,了解大蒜素在动物水平上对肿瘤的抑制作用。

1 材料与方法

1.1 主要试剂和仪器:大蒜素注射液是由上海禾丰制药有限公司生产,人肾癌细胞株(ketr-3)由中科院上海细胞所提供,Balb/c裸鼠购自暨南大学医学院动物中心,大蒜素购自新疆华世丹药业有限公司。

1.2 方法

1.2.1 实验准备:ketr-3细胞培养:取 ketr-3细胞用含10%小牛血清RPMI1 640培养基于37℃含5%CO2培养箱培养,3~5 d传代1次。实验动物准备:Balb/c裸鼠24只,雄性,5周龄,SPF级,饲养于暨南大学医学院动物中心SPF级饲养房。

1.2.2 灌服大蒜素药物对裸鼠移植瘤生长的影响:收集指数生长期ketr-3细胞1 000 rpm离心10 min后,NaCl溶液洗涤2~3遍,调整细胞密度为5×107细胞/ml。每只Balb/c裸鼠接种0.2 ml肿瘤细胞悬液于左侧大腿背侧皮下。观察皮下移植瘤的生长状况。标本常规10%甲醛固定24 h后,石蜡包埋,HE染色后,光镜下观察结果。

1.3 统计学处理:统计分析应用SPSS 13.0版统计软件。瘤体体积均用均数±标准差(±s)表示;分析方法为方差分析、两两比较计算P值。检验水准:α=0.01。

2 结果

2.1 大蒜素局部注射对裸鼠移植瘤生长的影响:裸鼠皮下接种ketr-3细胞2周后均成瘤。将移植瘤组织剪碎接种于裸鼠皮下,约十天后成瘤,成瘤率100%,大蒜素治疗组处理后,肿瘤生长明显受到抑制,2周后,NS组与空白组比较,差异无统计学意义(P>0.05,n=8);DSS组与空白组、NS组比较,差异有统计学意义(P<0.01,n=8)。

表1 2周后各组裸鼠移植瘤体积(±s)

表1 2周后各组裸鼠移植瘤体积(±s)

注:与NS组比较,①P<0.01

组别 瘤体体积(mm3)空白对照组1 378.3±118.2 NS对照组 1 365.2±105.4 DSS实验组 879.8±89.3①

2.2 裸鼠移植瘤组织病理学观察:灌服药物2周后,解剖肿瘤,进行HE染色。在HE染色的石蜡切片上可见:NS组细胞核内染色质松散,可见核仁,显示细胞增殖活跃,大蒜素治疗组可见到程度不同的细胞核深染,很少见核仁,显示肿瘤组织生长抑制,见图1。

图1 灌服药物2周后裸鼠肿瘤组织切片HE染色×400

3 讨论

大蒜为单子叶植物百合属植物蒜的鳞茎,含有一些特殊的具有生物活性的物质,如硫化合物(蒜氨酸、蒜油、蒜素、阿霍烯等)、微量元素(高含量的锗、硒、磷、镁等)、超氧化物歧化酶(SOD)等,使大蒜具有广泛的药效。大蒜素是指从植物大蒜中提取的有效成分的总称,他具备多种特别的生物学作用。研究人员通过流行病学资料的分析发现,大蒜能对胃癌、大肠癌、前列腺癌、乳腺癌等多种肿瘤产生预防或治疗作用[1],显示出大蒜素具备良好的临床治疗效果,由于是植物提取物,他的不良反应很小。化疗药物治疗肾癌效果不佳,而且化疗所导致的不良反应非常大,长期治疗,部分患者难以接受。细胞因子治疗如白细胞介素-2和干扰素为对部分患者具有一定效果,但治疗费用较贵,且易带来较多不良反应。国内外的流行病学调查发现,大蒜素对多种恶性肿瘤如肺癌、前列腺癌等具有一定的抗肿瘤作用[2-3]。

大蒜素由于其独特的生物学特性在某种程度上可直接杀伤肿瘤细胞、抑制肿瘤细胞增殖并诱导其凋亡;大蒜素还可通过激发患者自身免疫系统释放多种活性因子,通过自身机体的细胞免疫和体液免疫抑制肿瘤细胞生长,来达到大蒜素抑制肿瘤生长的作用。与传统肿瘤放疗化疗方案相比较,大蒜素在治疗恶性肿瘤的过程中,不但对机体不良反应轻微,而且还能激发机体自身免疫机制释放多种重要的细胞因子,从而提高了机体自身的免疫力。目前大家对大蒜素抑制癌的形成及生长的研究虽然较多,但对肾癌的研究仍属于起步阶段。肾癌除了早期用手术治疗以外,对中晚期及转移性肾癌尚无其他有效的治疗方法,中晚期肾癌对化疗、放疗均不敏感,而IFN和IL-2等生物治疗的效果目前不能让人满意,化疗总有效率十分低,仅为6%,且不良反应明显。

综上所述,大蒜素具有抑制ketr-3肾癌细胞的作用,具体作用机制有待于深入研究;由此提示,大蒜素在肾癌的临床治疗中具有潜在的应用前景,值得进一步临床研究。

[1] LI S,Xu W.Effects of allicin on both telomerase activity and apotosis in gastric cancer SGC27901 cells[J].World JGastroenterol,2003,9(9):1930.

[2] Arditti FD,Kov AR,Miron T,et al.Apoptotic killing of B-chronic lymphocytic leukemia tumor cells by allicin generated in stiu using a rituximab2alliinase conjugate[J].Molecular Cancer-Therapeutics,2007,4(2):325.

[3] Elango EM,Asita H,Nidhi G,et al.Inhibition of cyclooxygenase22 by diallyl sulfides in HEK293 Tcells[J].Appl Genet,2008,45(4):469.

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