HBV-DNA与HBV-LP联合检测在乙型肝炎诊断中的应用价值

党创伟 胡占岭

目前诊断乙型肝炎最常用的指标是乙肝病毒血清标志物(HBV-M)检测, 但对低水平HBV-DNA的HBV感染者缺乏准确反映体内病毒复制与抗病毒疗效的血清学指标。新近的研究表明, HBV-LP的前S蛋白与HBV的感染、复制及预后密切相关。本文将探讨血清I-IBV-LP浓度与HBV-DNA联检在乙型肝炎患者体内病毒复制、疾病进程与疗效判断中的临床应用。

1 材料与方法

1.1 一般资料 收集自2010年12月至2011年12月168例乙型肝炎患者血清标本, 诊断标准参考病毒性肝炎防治方案中乙型肝炎病原学［1］, 其中男127例, 女41例, 年龄15～56岁。所有标本静脉抽血分离血清后于-20°保存。

1.2 检测方法 HBV-DNA定量检测：检测技术采用实时荧光定量PCR(PCR仪由德国罗氏公司提供, 试剂盒由上海克隆生物高技术有限公司提供), 检测下限为1.0×103copies/ml。乙肝病毒大蛋白检测：采用全自动酶联免疫分析仪检测两对半, 采用ELISA(试剂盒由北京热景生物技术有限公司提供), 采用针对构象型前S区的单克隆抗体, 严格按照试剂说明书操作。

1.3 统计学方法 采用SPSS13.0统计分析软件进行处理,计数资料用率表示, 采用χ2检验, 计量资料用均数±标准差(±s)表示, 采用t检验, P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HBV-DNA与HBV-LP的阳性率比较 所有检测乙肝患者中HBV-LP的阳性率为82.1%(138/168), HBV-DNA的阳性率为73.8%(124/168), IBV-LP和HBV-DNA检出的一致率为74.6%, 二者差异无统计学意义(χ2=4.107, P＞0.05)。

2.2 血清HBV-LP与HBV-DNA水平之间的比较 168例乙型肝炎患者血清中, 对HBV-LP的光密度(D值)与HBVDNA拷贝数的对数值作相关分析, HBV-LP的含量与HBVDNA拷贝数之间具有正相关性, 相关系数r=0.507, P＜0.05。

3 讨论

HBV-DNA定量检测是直接对HBV的遗传物质DNA进行基因扩增, 可对HBV感染作出早期诊断, 是病毒复制存在的最可靠的指标, 也可用于判断乙肝患者传染性高低。但对于经过抗病毒治疗或低水平HBV-DNA的患者来说, 血清HBV-DNA不能真实反映肝组织内HBV复制情况。近年来深入研究发现：乙肝病毒感染人体后, 前S抗原只在大球形颗粒(Dane颗粒)上表达, 其S基因编码合成的HBV外膜蛋自由3种蛋白组成, 毛远丽等［2］证明HBV-LP是导致肝细胞损伤、死亡和纤维化病变的主要原因且具有反式激活病毒复制作用, 因此检测HBV-LP可以反映病毒复情况和预后情况。本文研究显示168例乙肝患者中HBV-LP和HBV-DNA检出一致率为4.6%, 且二者呈正相关, 与前人研究结果相仿［3］。这些血清均来自处于抗病毒治疗过程中的患者, 在我们检测的患者血清中有16例HBV-LP阳性, 但其含量均较低。可能的原因是：目前的抗病毒药物只能抑制HBV-DNA的复制, 并不能抑制已形成的病毒表达蛋白, 导致HBV PCR探针引物设计的部分不相匹配有关。这一现象提示我们在HBV-DNA阴性的患者中, HBV-LP阳性可能是肝内病毒继续复制和抗病毒治疗不彻底的标志。

［1］肖倩.乙型肝炎患者血清HBV外膜大蛋白与HBV-DNA检测的相关性及临床意义.国际检验医学杂志, 2009, 30(3):234-239.

［2］毛远丽, 李伯安, 马洪滨, 等.乙肝患者外膜蛋白血清学检测及对于判定HBV-DNA复制的意义.中华实验与临床病毒学杂志, 2006, 20(3):276-278.

［3］温怀凯, 余 坚, 李小永, 等.乙型肝炎病毒外膜大蛋白与HBVDNA的关系研究.浙江大学学报(医学版), 2010, 39(4):386-389.