注射用奥美拉唑钠HPLC含量测定方法研究

胡 翔，曹淑玲

（江西赣南海欣药业股份有限公司，江西 赣州341000）

奥美拉唑钠为奥美拉唑（Omeprazole，OME）的钠盐，是一种新型的胃酸分泌抑制剂——质子泵抑制剂。该药是瑞典Haasle公司于1979年首次合成的苯并咪唑衍生物，是一种新型抗消化性溃疡药，与现有的抗消化性溃疡药物相比，具有更强大的抗酸作用。本品可以减少胃酸分泌，用于消化道溃疡，反流性食道炎和卓－艾综合征，应激状态时并发的急性胃黏膜损害，和非甾体类抗炎药引起的急性胃黏膜损伤的治疗，预防重症疾病（如脑出血、严重创伤等）胃手术后再出血等［1－4］。该品种已经得到广泛的应用，为完善质量标准，更好地控制产品质量，我们对该品种的高效液相含量测定方法进行了研究。

1 仪器和试剂

1.1 仪器

Waters1525泵；2487紫外检测器。

1.2 试剂

原料为锦州九泰药业有限责任公司生产，批号：100402；对照品：中国药品生物制品检定所提供，含量：92.1% ，批号：100760－200501。注射用奥美拉唑钠为本公司粉剂车间生产，批号：100713、100716、100717，乙腈为色谱纯；水为注射用水；磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、三乙胺为分析纯。

2 实验方法和结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Kromasil C18（4.6mm×250mm，5μ，天津特纳科学仪器公司）；保护柱：C18（4.6mm×20mm，5μm）；流动相：乙腈：磷酸盐缓冲液（pH7.3）：三乙胺＝22∶78∶0.7；流速：1.0mL·min－1；波长：302nm 进样量：20μL。

2.2 色谱行为和系统适应性

取奥美拉唑钠对照品适量，加流动相溶解并稀释制成含奥美拉唑钠约0.2mg·mL－1的对照品溶液；按处方配方，用流动相将辅料溶液稀释成不含奥美拉唑钠的空白溶液；取注射用奥美拉唑钠适量，加流动相溶解并稀释制成含奥美拉唑钠约0.2mg·mL－1的样品溶液。分别进样20μL，记录色谱图。结果表明，在奥美拉唑钠色谱峰周围，没有辅料峰、溶剂峰和其它的干扰峰，故辅料和杂质对制剂的含量测定没有干扰，奥美拉唑钠的保留时间为6.5min，理论塔板数为4 900，色谱见图1。

图1 专属性考察图谱

2.3 线性试验

取奥美拉唑钠对照品，用流动相配制成浓度为16.56，18.63，20.70，22.70，24.84mg·mL－1的溶液，各取20μL 注入色谱仪，记录色谱图，以5次测定的峰面积平均值A 对样品浓度C 做线性回归，得回归方程为：A＝117713.8C＋114419，r＝0.9998，n＝5。表明在16.56～24.84mg·mL－1范围内线性关系良好。

2.4 最低检测限和定量限

取标准曲线制备中奥美拉唑钠对照品溶液，加流动相稀释至0.02μg·mL－1，进样20μL，色谱峰面积约为基线噪音的10倍，定量限为0.4ng。取标准曲线制备中奥美拉唑钠对照品溶液，加流动相稀释至约0.005μg·mL－1的溶液，进样20μL，色谱峰面积约为基线噪音的3倍，检测限为0.1ng。

2.5 精密度试验

日内精密度：取原料（批号100402），在一个工作日内先后进行5次测定，每次测定独立配制样品溶液，以外标法计算含量，均值为99.9%，RSD为0.31%。

日间精密度：取原料（批号100402），以外标法计算含量，连续测定5天，计算日间精密度，均值为100.0%，RSD为0.35%。结果见表1。

表1 精密度测定结果 （%）

2.6 溶液稳定性

取上述线性关系项下奥美拉唑钠浓度为20.7 mg·mL－1的溶液，室温放置，分别于0、1、2、3、4h取样20μL，注入色谱仪，记录色谱图，以外标法计算含量，均值为99.8%，RSD为0.41%，可见溶液在4h内稳定性好。

2.7 加样回收率试验

精密称取奥美拉唑钠对照品约16、20、24mg各3份，分别置100mL量瓶中，加入处方量的辅料适量，再加入流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。按外标法测定含量，计算回收率。平均回收率为100.0%，RSD为0.48%。结果见表2。

表2 回收率测定结果

2.8 样品测定

精密称取3批样品和内容物适量，加流动相溶解并稀释制成含奥美拉唑钠约0.2mg·mL－1的溶液。精密称取奥美拉唑钠对照品适量，加流动相溶解并稀释制成含奥美拉唑钠约0.2mg·mL－1的溶液。以上溶液各进20μL，记录色谱图。结果见表3。

表3 注射用奥美拉唑钠含量测定结果

3 讨论

我们在比较了现行标准、美国药典标准和国外厂家质量标准后，制定了本含量测定方法，出峰时间合适（保留时间约6.5min），无特殊试剂，操作简单，稳定性好。各标准所用流动相和色谱柱见表4。

表4 各标准高效液相法中所用流动相和色谱柱比较

采用奥美拉唑钠进口质量标准中的HPLC法对本品进行检查时我们发现，奥美拉唑钠有较好的峰形，但与杂质分离度稍差。而且，其使用的流动相条件较为繁杂，且硫酸氢四丁基胺不常用。我们参照USP中的流动相，并对流动相进行调整，在流动相中加入0.7%的三乙胺作为扫尾剂，色谱峰有了较为明显改善，见图2。

图2 两种流动相对照色谱

我们开发的本HPLC 试验方法可以将在302nm 附近有吸收的杂质很好地分离，从而有效控制产品的质量水平。改进的高效液相色谱方法，对奥美拉唑钠及其粉针制剂含量的测定结果精密度良好、准确度高，并且操作方便、快速，适合生产中对质量的控制和成品的检验工作。

［1］ 吴小平，周伏喜.静滴国产奥美拉唑对消化性溃疡并出血的疗效及对胃内pH 值的影响［J］.医学新知，2003，13（3）：140－141.

［2］ 艾尼·阿布都热依木，木尼拉·马哈德.静脉滴注洛赛克粉针剂治疗上呼吸道出血50例疗效观察［J］.新疆医科大学学报，2004，27（1）：38.

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［4］ 杨献良.奥美拉唑治疗110例胃食管返流病临床观察［J］.中原医刊，2003，30（18）：52－53.