鹰嘴豆的化学成分研究

陈玲芳，杨新洲，熊 慧，王剑侠，梅之南＊

（1.中南民族大学 药学院，湖北 武汉430074；2.华中科技大学 药学院，湖北 武汉430074）

鹰嘴豆（Cicer aretinum L.）为豆科（Leguminosae）鹰嘴豆属（Cicer）植物，主产于半干旱热带地区（地中海气候地区），中国新疆天山北坡海拔1300m 的木垒县盛产鹰嘴豆已有2500年历史［1］。作为维吾尔族常用药，鹰嘴豆常被用来治疗支气管炎、黏膜炎、霍乱、便秘、痢疾、消化不良、营养不良等，其对糖尿病的有效治疗率达到70%［2］。目前国内外关于鹰嘴豆化学成分研究较少，主要有黄酮、甾醇、有机酸、糖类、蛋白质等［3］。为深入开发其药用和食疗价值，我们对鹰嘴豆干燥种子进行了溶剂提取和色谱分离，从其乙醇提取物的乙酸乙酯、正丁醇萃取部位分离得到7 个化合物。结合波谱数据和文献资料，确定其分别为：亚油酸（linoleic acid，I）、β－谷 甾 醇（β－sitosterol，II）、对 羟 基 苯 甲 酸（phydroxybenzoic acid，III）、腺苷（adenosine，IV）、1，2－苯二甲酸二（2－甲基丙基）酯（1，2－benzenedicarboxylic acid，1，2－bis（2－methylpropyl）ester，V）、1－乙基－α－L－半乳糖苷（1－ethylα－L－galactoside，VI）、蔗糖（sucrose，VII）。其中化合物I，V，VII为首次从该植物中分离得到，I，V 亦为首次从该属植物中分离得到。

1 仪器与材料

BrukerAM－400型（TMS为内标，瑞士Bruker公司）或Varian INOVA－500型（TMS为内标，美国INOVA 公司）核磁共振仪；VG Auto Spec－3000型质谱仪；Ultimate 3000型色谱仪（美国Thermo公司）；X－4 型显微熔点测定仪（温度计未校正，北京泰克仪器有限公司）；BETASIL C18（250mm×10mm）色谱柱（美国Thermo公司）；薄层层析硅胶H、柱层析硅胶（200～300目）、GF254高效薄层板（青岛海洋化工厂）；MCI树脂（CHP20P系列，75～150μm）（日本三菱化学公司）；Sephadex LH－20（Pharmacia公司）。所用色谱纯为美国TEDIA 公司生产，其余试剂均为分析纯（国药集团化学试剂有限公司）。

鹰嘴豆采于新疆阿克苏地区拜城县，经中南民族大学药学院万定荣教授鉴定为豆科鹰嘴豆属植物鹰嘴豆Cicer arietinum 的干燥种子。

2 提取与分离

鹰嘴豆干燥种子粗粉15kg，70%乙醇溶液浸泡提取3次，每次浸泡48h，回收乙醇。将所得的1 360g乙醇浸膏用水溶解后，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取。

乙酸乙酯部位17g以二氯甲烷－甲醇（1∶0，40∶1，20∶1，10∶1，8∶1，5∶1，2∶1，1∶1，0∶1）梯度洗脱，用硅胶柱进行分离，洗脱液减压浓缩，TLC检验合并相同留分后得到14个组分（Fr.1～14）。Fr.3 和Fr.4 分别进行硅胶柱层析，以环己烷：乙酸乙酯（10∶0→0∶10）梯度洗脱后得化合物I（1.9mg）和化合物II（2.8mg）。Fr.6 先后用葡聚糖Sephadex LH－20、半制备HPLC（CH3CN／H2O，20∶80）纯化后得到化合物III（29.1mg）和化合物V（3.9mg），Fr.12先后用葡聚糖Sephadex LH－20和半制备HPLC（CH3CN／H2O，5∶95）纯化后得到化合物IV（4.2mg）。

正丁醇部位70g用硅胶柱进行分离，以二氯甲烷－甲醇（19∶1，9∶1，8∶2，7∶3，5∶5，3∶7，0∶1）为洗脱剂，浓缩洗脱液，合并相同馏分后得到10个组分（Fr.1～10）。Fr.5用甲醇重结晶后得化合物VI（727.0mg），Fr.6用MCI树脂吸附后得无色块状晶体VII（2.4mg）。

3 结构鉴定

化合物I淡黄色油状物，C18H32O2，ESI－MS（m／z）：280［M］＋；1H－NMR（400MHz，CDC13）δ：2.35（2H，t，J＝7.2Hz，H－2），5.35（4H，m，H－9，H－10，H－12，H－13），2.77（2H，t，J＝6.1Hz，H－11），2.04（4H，m，H－8，H－14），0.89（3H，m，H－18）。以上数据和文献［4］报道基本一致，故此化合物鉴定为亚油酸。

化合物II白色针状晶体（乙酸乙酯），C29H50O，mp：138.0℃～139.0℃；Liebermann－Burehard 反 应 呈 阳性；1HNMR（400MHz，CDC13）δ：0.68（3H，s，H－18），1.01（3H，s，H－19），0.96（3H，d，J＝9.5Hz，H－21），0.85（6H，d，J＝6.4Hz，H－26，H－27），0.83（3H，t，J＝6.3Hz，H－29），；此外，3.52（1H，m，H－3），5.35（1H，d，J＝5.2Hz，H－6）。以上数据与文献［5］报道基本一致。经TLC 与β－谷甾醇的标准品对照，5%硫酸香草醛加热显色呈红色单一斑点，经TLC对照分析，两者Rf值一致，并且混合熔点不下降。因而鉴定化合物II为β－谷甾醇。

化合物III白色粉末（丙酮），C7H6O3，mp：213.0℃～214.0℃；UV254下观察有暗斑，FeC13反应显蓝黑色，溴酚蓝反应 显 黄 色；ESI－MS（m／z）：161［M ＋Na］＋；1HNMR（500MHz，CD3OD）δ：6.80（2H，d，J＝8.5Hz，H－3，H－5），7.87（2H，d，J＝8.5Hz，H－2，H－6），显示有对位取代的苯环。此数据与文献［6］报道的基本一致，故鉴定该化合物为对羟基苯甲酸。

化合物IV 白色柱状结晶（甲醇），C10H13N5O4，mp：235.0℃～236.0℃；ESI－MS（m／z）：290［M ＋Na］＋；1HNMR（500MHz，DMSO－d6）δ：8.34（1H，s，H－2），8.12（1H，s，H－8），5.86（1H，d，J＝4.9Hz，H－1’），4.59（1H，H－2’），4.13（1H，H－3’），3.95（1H，H－4’），7.34（2H，s，NH2）。13CNMR（125MHz，DMSO－d6）δ：152.4（C－2），149.1（C－4），119.3（C－5），156.1（C－6），139.9（C－8），87.9（C－1’），73.5（C－2’），70.6（C－3’），85.9（C－4’），61.7（C－5’）。此数据与文献［7］报道的基本一致，故鉴定该化合物为腺苷。

化合物V 黄色油状物（甲醇），C16H22O4，ESI－MS（m／z）：301［M＋Na］＋；1HNMR（400MHz，DMSO－d6）δ：7.71（2H，dd，J＝4.8Hz，3.5Hz，H－3和H－6），7.53（2H，dd，J＝4.8Hz，3.5Hz，H－4和H－5），4.00（4H，d，J＝6.5Hz，H2－8和H2－8’），1.98（2H，m，H－9和H－9’），0.91（12H，d，J＝6.7Hz，H3－10 和 H3－10’，H3－l1 和 H3－l1’）。13CNMR（125MHz，DMSO－d6）δ：131.8（C－1和C－2），128.7（C－3和C－6），131.6（C－4和C－5），167.0（C－7和C－7’），71.1（C－8和C－8’），27.2（C－9和C－9’），18.9（C－10和C－10’，C－11和Cl1’）。此数据与文献［8］报道的基本一致，故鉴定该化合物为1，2－苯二甲酸二（2－甲基丙基）酯。

化合物VI白色柱状结晶（甲醇），C8H16O6，ESI－MS（m／z）：231［M ＋Na］＋；1HNMR（400MHz，CD3OD）δ：4.82（1H，d，J＝3.0Hz，H－1），3.77（1H，H－2），3.73（1H，H－3），3.51（1H，H－4），3.79（1H，H－5），3.67（2H，m，CH2），1.24（3H，t，J＝7.1Hz，CH3）。13CNMR（125MHz，CD3OD）δ：100.1（C－1），70.2（C－2），71.5（C－3），71.1（C－4），72.3（C－5），62.7（C－6），64.5（CH2），15.3（CH3）。此数据与文献［7］报道的基本一致，故鉴定该化合物为1－乙基－α－L－半乳糖苷。

化合物VII白色块状晶体（甲醇）；1H－NMR（500MHz，C5D5N）δ：6.22（1H，d，J＝3.5Hz，H－1），4.19（1H，dd，J＝9.4Hz，3.1Hz，H－2），4.69（1H，t，H－3），4.24（1H，t，H－4），4.78（1H，dd，J＝7.5Hz，2.4Hz，H－5），4.51（1H，H－1＇），5.03（1H，H－3＇），4.53（2H，H－6，H－4＇），5.07（1H，H－5＇），4.35（1H，H－6＇）。13C－NMR（125MHz，C5D5N）δ：93.5（C－1），73.6（C－2），75.2（C－3），71.5（C－4），75.1（C－5），62.4（C－6），63.0（C－1＇），105.9（C－2＇），84.4（C－3＇），79.6（C－4＇），75.5（C－5＇），64.8（C－6＇）。以上数据与文献［9］蔗糖的核磁数据一致，故将化合物VI鉴定为蔗糖。

4 讨论

目前，我国新疆的维吾尔医院用鹰嘴豆粉来治疗疾病，并开发了一系列鹰嘴豆的保健食品并上市，本文通过对鹰嘴豆干燥种子化学成分的初步分离鉴定，证实其含有不饱和脂肪酸、植物甾醇、酚性物质、糖类物质。从其乙醇提取物的乙酸乙酯、正丁醇部位分离得到了7个化合物，其中化合物I，V，VII更为首次从该植物中分离得到，这为今后鹰嘴豆的资源综合利用开发提供了新的理论基础和科学依据。同时我们对该药材的各提取部位进行了降血脂的细胞活性测试，证实其有较好的作用，也为研究鹰嘴豆抗糖尿病机理研究奠定了一定基础。

［1］ 张金波，苗昊翠，王威，等.鹰嘴豆的应用价值及其研究与利用［J］.作物杂志，2011，1（1）：10－12.

［2］ 冯婷.鹰嘴豆营养保健价值及其应用［J］.中国食物与营养，2011，17（1）：68－69.

［3］ 高鹏.维药鹰嘴豆化学成分的研究［D］.上海：东华大学，2007.

［4］ 刘大有，王晓颖，夏忠庭，等.两头尖化学成分研究［J］.长春中医学院报，2003，19（3）：71.

［5］ 胡彦君，刘燊，王定勇，等.芒果叶的化学成分研究［J］.亚太传统医药，2010，2（6）：18－19.

［6］ 吴冬凡，房志坚.金钮扣根化学成分的研究［J］.广东药学院学报，2008，24（2）：139－140.

［7］ 谭永霞，孙玉华，陈若芸.鹰嘴豆化学成分研究［J］.中国中药杂志，2007，32（16）：1650－1652.

［8］ 史大永，韩丽君，孙杰，等.海藻基根硬毛藻的化学成分研究［J］.中国中药杂志，2005，30（5）：347－350.

［9］ 王平安，刘明川，杨胜杰.柘木的化学成分［J］.中国实验方剂学杂志，2011，17（15）：113－115.