左氧沙星与磷霉素联用对金黄色葡萄球菌体外杀菌活性探究分析

邹冬良

（湖南师大附属湘东医院，湖南 醴陵 412200）

MRSA在临床上对头孢菌素类、大环内酯类、氟喹诺酮类、氨基糖苷类都会产生耐药作用, 所以万古霉素的选择面临着巨大的压力。在这种严峻的情况下, 仅仅依赖万古霉素将会受到很大的限制，因此就应该拓宽思路对其他有效的药物予以合理的选择。在这种形势下采用联合用药的方法也就自然而然的成为治疗MRSA感染的一个有效选择[1]。联合应用抗菌药物能够对所有病原菌的耐药性的形成予以防止。所以想要找到一个个临床毒副作用小且临床疗效好的联合治疗方案是存在可能性的[2]。为了找到联合用药的有效治疗方案，对左氧沙星与磷霉素联用对金黄色葡萄球菌体外杀菌活性进行探究分析，对左氧沙星单用以及与磷霉素联用的杀菌效果进行了解，我们进行了本次研究。现将调查结果汇报如下。

1 资料与方法

1.1 抗菌药物

左氧沙星（宁波市天衡制药有限公司 国药准字H20060508）、磷霉素（山西仟源制药有限公司 国家准字H20053768）、6-磷酸葡萄糖（Sigma）（上海佳和生物科技有限公司 国家准字H20064216），经中国药品生物制品检定所检查合格。

1.2 菌株及培养基

受试菌包括3株MSSAATCC29213、临床分离菌SA99、SARN450并且选取1株临床分离的MRSAB6177，都经过VETEK重新鉴定,其培养基主要是MH琼脂和MH肉汤。

1.3 实验仪器

TYJ-2A菌落计数器（上海宏汇电器厂），比浊仪（法国生物梅里埃），YKH-II 型液体快速混合器（江西医疗器械厂），90mm培养平皿（浙江拱东医疗器械有限公司）。

1.4 最低抑菌浓度（MIC）的测定

采取琼脂平板二倍稀释的方法, 在进行磷霉素的MIC的测定时依据CLSI的要求加入25mg/mL的6-磷酸-葡萄糖。

1.5 单药杀菌结果

1.5.1 抗菌药物的配制

按照MIC的实验结果,把2种受试的药物的储备液分别稀释成1/2MIC、2MIC、8MIC、16MIC、32MIC、128MIC等6个浓度系列。

1.5.2 菌落计数

分别用不同浓度的左氧沙星或者是磷霉素1.5mL加到无菌的小试管中，而后将事先制备好的菌液1.5毫升也加到试管里，这个时候培养物种的抗菌药物浓度分别是1/ 4MIC、1MIC、4MIC、8MIC、16MIC、64MIC, 菌液终浓度为105CFU/mL，并做空白试验。在不同时间分别吸取100微升的培养物，将不同稀释浓度的培养物均匀地涂于MH琼脂的平板上，在35℃的条件下孵育18h后对菌落进行计数。并予以统计。

1.6 联合用药的杀菌结果

1.6.1 抗菌药物的配制

按照MIC的实验结果以及预实验的结果，把左氧沙星和磷霉素都稀释到1/2MIC、1MIC。

1.6.2 菌落计数

各取左氧沙星和磷霉素1MIC的浓度1.5mL，并且与1.5mL的菌液进行混合。此时抗菌药物浓度就变成了原先的一半，而后在取左氧沙星和磷霉素1MIC浓度0.75微升同1.5毫升的菌液进行混合，这样，抗菌药物的浓度就变为原来的1/4，此时左氧沙星和磷霉素的浓度就都是1/4MIC，与此同时还要进行无药空白试验。之后操作与药物单用一样。并且进行数据统计。

2 结 果

2.1 左氧沙星与磷霉素对菌析的MIC

左氧沙星对选取的3株MSSAATCC29213、SA99、RN450的MIC分别是0.25、0.125、0.125 μg/mL，磷霉素的MIC分别为1、1、1μg/mL。而左氧沙星与磷霉素联用对MRSAB6177的MIC则是16、8μg/mL。见表1。

表1 左氧沙星和磷霉素对选取菌的MIC（μg/mL）

2.2 联合应用判定

在进行联合用药后的一天之内3株MSSA的菌落数要比单用一种相对敏感的药物的菌落数要减少许多，也就是说两药在联合应用后表现出了明显的协同作用。见表2。

表2 联合用药效应评定

3 讨 论

自从第1例甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌在1961年在英国出现以来，MRSA在全世界迅速的蔓延开来。根据2006年中国CHINET细菌耐药性监测的一些数据表明金黄色葡萄球菌中平均MRSA的检出率大概在56.7%左右，耐药的形势不是十分的乐观。

磷霉素是一种化学合成的良好的广谱抗菌药，由于磷霉素具有优越的药代动力学、药效学的特性，因此也就具有了良好的临床的实用价值。磷霉素与其它抑菌药物进行合用后可以对因敏感菌所引起的重症感染有较好的治愈作用[3]。经过临床上的一些相关研究表明虽然磷霉素对难治性的感染有较好的抗菌作用，但是其主要的药理作用机制还不是十分的明确。

实验研究表明，3株MSSA对左氧沙星以及磷霉素都很敏感，左氧沙星则显示出对浓度的依赖性，而且还具有较强的杀菌作用，但磷霉素却不会对浓度产生依赖[4]。通过数据统计显示，左氧沙星和磷霉素联合应用后在亚以菌浓度上表现出显著的协同作用[5]。

左氧沙星和磷霉素都是临床上经常应用到的药物，他们的副作用较小，患者对其的依从性较强，尽管在临床上并不推荐用氟诺喹酮类药物对MRSA感染进行治疗，但是本次研究表明，两药联用具有较好的协同杀菌作用，在临床上选用两药联合的方法对那些对万古霉素反应不良的危症患者进行治疗，也许会对感染的有效控制予以帮助，但是依旧需要进一步的相关实验进行进一步的证实。

[1]汪复. 2006 年中国CH INET 细菌耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志,2008,1(8): 1-9.

[2]连家建,唐青云.磷霉素可减轻其他药物引起的不良反应[J].国外医药抗生素分册,2002,23(1):38.

[3]Xiong YQ,Po tel G,Caillon J,et al.Comparat iveefficacies of cipr oflo xacin and peflo xacin alo ne or incombination w ith fosfomy cin in ex per imental endocarp ditis induced by mult idr ug- susceptible and- resistantPs eudomonas aer ug inosa [J].Antimicrob Agents Chemother,1995,35(2):496-499.

[4]王睿.临床抗感染药物治疗学[M].北京:人民卫生出版社,2006:134-136.

[5]Leonard SN,Kaatz GW,Rucker LR,et al.Synerg ybetw een g emiflo xacin and trimetho prim/sulfamethoxazole against communityasso ciated methicillinresistant Stap hy lococcus aureus [J].J Antimicrob Chemother,2008,62(6):1305-1310.