61例不完全性川崎病与微小病毒B19感染

郑 岩

（长春市儿童医院，吉林 长春130051）

典型川崎病（Kawasaki disease，KD）又称皮肤粘膜淋巴结综合征。临床上以持续5天以上的发热、球结膜充血、皮肤粘膜弥漫性潮红、颈部淋巴结肿大、指（趾）端的硬性水肿及膜样脱皮等为主要表现，主要危及生命的损害是冠状动脉损害，如冠状动脉狭窄、血栓、梗死、瘤破裂等，可导致猝死。此病由日本的川崎教授在1967年首先报道。病因不详，目前认为与免疫异常及病毒感染有关。临床上部分川崎病患儿不满足现行KD诊断标准，国外将此类患者称为不完全性KD或不典型KD［1，3］。因其临床表现不全，故常漏诊或延迟诊断，错过使用静脉注射免疫球蛋白（IVIG）最佳时期，发生冠状动脉损害危险更大。国内对不完全性KD与微小病毒B19感染关系仅有零星报道，缺乏系统性报道。本研究进一步探讨微小病毒B19感染与小儿不完全川崎病关系。

1 资料与方法

1.1 般资料 2008年2月至2011年2月本院诊断为KD患儿227例。其中166例符合日本MCLS研究委员会（1984年）KD诊断标准［4］，为典型 KD组；61例尚不符合上述诊断标准，作为不完全性KD候选者。

1.2 方法

1.2.1 B19DNA的巢式PCR扩增 抽取外周静脉血1ml，取混匀的血清20μl加20μl裂解液，混匀后100℃沸水10分钟，最后15 000rpm／3分钟离心，取5μl上清待查。B19DNA的巢式PCR扩增方法同文献，取第2次PCR循环产物10μl于2μl溴酚蓝混合，加样于含溴化乙锭（EB）的2%琼脂糖凝胶中电泳30min，紫外分析仪上观察，104bp处出现红色电泳带者为阳性。B19阳模板由沙特皇家医院中心提供，TaqDNA聚合酶、蛋白酶K、10×PCR缓冲液、4×dNTP、琼脂糖、GEM 3ZF HaeⅢMarker等均购自华美生物工程公司。

1.2.2 心脏彩超检测冠状动脉内径值。

1.3 统计学分析 应用卡方（χ2）检验和t检验。

2 结果

表1 观察组及对照组PVB19－DNA测定结果

表2 观察组及对照组HPVB19阳性冠状动脉内径值比较（±s）

表2 观察组及对照组HPVB19阳性冠状动脉内径值比较（±s）

注：经t检验P＜0.005说明两组冠状动脉内径值有显著差别。

组别 观察组（45／166）对照组（29／61）t冠状动脉内径（mm）2.1±0.63 3.5±0.48 2.893

3 讨论

微小病毒是目前已知最小、结构最简单的DNA病毒，其中仅有B19病毒和腺相关病毒能够感染人。B19病毒由一线状单链DNA核衣壳构成，衣壳蛋白VP1、VP2、VP3为其结构蛋白；DNA链约5.5kb，含正链和负链各50%。不同来源的分离株之间核酸序列稍有差异。B19病毒可在人骨髓细胞和人胎肝细培养中自主复制。

B19特异受体的确证，揭示了B19致病的生物学基础。人们发现B19有强的嗜人类红系祖细胞特性，B19与红系祖细胞膜的结合特异性位点，为膜上的糖苷脂，即P抗原为B19病毒特异性受体，它不仅存在于红系祖细胞膜上，还在巨核细胞、内皮细胞、部分类型的胎盘细胞及胎儿肝脏和心肌细胞上，继发的机体免疫反应增加了临床表现的多样性，导致全身多系统、多脏器的受累。冠状动脉的病理损害主要病理变化为全身中、小动脉血管炎，冠状动脉的损害直接危及生命，所以至关重要。藤原将其分为四期：1.初期（1－2周）：微细血管炎，小动脉内膜炎，血管周围炎；2.极期（2－4周）：冠状动脉全层广泛炎症细胞浸润，动脉瘤形成。瘤内有血栓形成时可引起栓塞和血管腔的狭窄；3.肉芽肿期（4－7周）：中型动脉内有肉芽增生、血管内膜增厚、小动脉炎症消退；4.陈旧期（＞7周）：中型动脉瘢痕形成、内膜肥厚、狭窄、钙化。

KD的再发率约3%－5%。多数在初发后1岁内再发，且多见于＜3岁的婴幼儿。

有明显冠状动脉改变的B19相关性川畸病时有报道，B19感染致心肌炎、心肌心包炎及先天性扩张型心肌病病例也有报道，Morey从胎儿组织通过原位杂交证实心肌细胞内有B19－DNA存在，组织细胞化学和病理生理学资料支持B19感染与相关的胎儿心肌疾病有关。其可能的机理为：已证实有B19特异性受体的血管内皮细胞和心肌细胞与病毒直接结合，侵袭脉管、心肌发生炎性改变或继发的免疫损害。

对于不完全性川崎病诊断一直存在争议，最初是指有冠状动脉病变、临床表现难以达到典型KD诊断标准。1987年Sonobe及Kawasaki首次提出不完全性KD诊断建议：典型KD诊断标准6项只符合4项或3项，但病程中经超声心动图或心血管造影证实有冠状动脉瘤。然而，许多学者认为上述诊断标准过于严格，使部分患者未及时治疗而发生冠状动脉病变［5］。由于KD病程10d内使用IVIG才能有效预防冠状动脉病变发生［6，7］，故早期诊断KD非常重要。许多学者倾向于有难以解释发热、不能达到全部典型KD诊断标准、实验室检查支持、除外其他疾病者称之不完全性 KD［1，8］。

本研究结果显示，观察组（典型川崎病）B19－DNA阳性检出率为27.4%（45／166），对照组（不完全性川崎病）B19－DNA阳性检出率检为47.5%（29／61），两组比较有显著差别（P＜0.01）。观察组（典型川崎病）与对照组（不完全性川崎病）HPVB19－DNA检测阳性的两组中，心脏彩超冠状动脉内径值比较有显著差异（P＜0.01）。微小病毒B19与不完全性川崎病（KD）相关，并且微小病毒B19感染造成冠状动脉病变比较严重。

不完全性KD患者同样有发生冠状动脉病变危险［9］，因此及时采用KD标准疗法IVIG加ASA治疗［10］非常必要。此外，长期随访、动态观察患儿实验室指标（尤其是血小板、血沉）变化，超声心动图改变及病程后期的指（趾）脱屑，对于不完全性KD最终确定有帮助。

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［10］于宪一.川崎病治疗的现状和展望［J］.实用儿科临床杂志，2004，19（11）：922.作者简介：郑岩，女，43岁，硕士研究生，从事心血管专业。