玉米赤霉烯酮污染日粮对断奶母猪阴户的影响

姜淑贞 张培奇 杨维仁 杨在宾* 季方 （山东农业大学动物科技学院 泰安 271018 肥城市安庄镇畜牧兽医站 Amlan International, Chicago, Illinois, United States of America）



玉米赤霉烯酮污染日粮对断奶母猪阴户的影响

姜淑贞①张培奇②杨维仁①杨在宾①*季方③（①山东农业大学动物科技学院 泰安 271018 ②肥城市安庄镇畜牧兽医站 ③Amlan International, Chicago, Illinois, United States of America）

选择35±1日龄、平均体重为10.36±1.21kg健康的三元(斯格×长×大)杂交断奶母猪20头，研究不同水平玉米赤霉烯酮(ZEA)污染日粮对断奶母猪阴户大小的影响。将试验母猪按照体重随机分为4个处理，对照组仔猪饲喂基础日粮，3个试验组分别在基础日粮的基础上添加1、2和3mg/kg的ZEA。结果表明：日粮添加1.1~3.2mg/kg ZEA显著增加断奶母猪的阴户长、宽和阴户面积(P＜0.05)。随ZEA水平的升高，母猪的阴户长、宽和阴户面积的直线回归增加的趋势(P＜0.05)。

仔猪 玉米赤霉烯酮 阴户

全世界谷物和饲料普遍受到玉米赤霉烯酮(zearalenone，ZEA)的严重污染。在中国，落后的谷物收获条件和油料加工过程加重ZEA的污染，低质量的玉米和粮食加工副产品，特别是非常规原料的广泛使用，使ZEA等霉菌毒素的污染程度远远超出国外。动物中猪对ZEA最敏感，欧盟规定仔猪日粮中ZEA的最高限量为0.1mg/kg，我国规定仔猪日粮中ZEA的最高限量为0.5mg/kg。ZEA可诱发猪的雌激素过多症，典型的临床症状为阴户湿肿、阴道和直肠脱垂以及乳腺增大，引起母猪的不孕、流产和假发情等繁殖障碍。然而，目前ZEA对猪的危害研究主要集中在成年繁殖母猪，对商品猪、特别是非繁殖期仔猪的作用机理尚不清楚。迄今为止，尚无有关低剂量ZEA(1.1~3.2mg/kg)对断奶母猪阴户剂量效应关系的系统报道。本试验以断奶雌性仔猪为研究对象，研究低剂量ZEA(1.1~3.2mg/kg)对断奶母猪阴户的影响，以期对实际养猪生产提供参数。

1 材料与方法

1.1 材料

玉米赤霉烯酮(ZEA)：由美国Amlan International公司订购自以色列FERMENTEK公司，为色谱纯度，纯度保证值为98%。

1.2 试验动物与管理

选择35±1日龄、平均体重为10.36±1.21kg健康的三元(斯格×长×大)杂交断奶雌性仔猪20头，按照体重随机分为4个处理，每个处理5个重复，各处理间初始体重差异不显著(P>0.05)。仔猪21日龄断奶，在产床上饲养7d，然后转入试验笼(0.48m2)。单体笼使用塑料漏缝地板，安装有乳头饮水器和料槽，仔猪自由采食和饮水。试验开始前对猪舍进行全面清扫、消毒，试验期间每周进行1次猪舍消毒。舍内安装红外保温灯维持猪舍温度，相对湿度为65%。预试期7d，正试期18d。仔猪管理和免疫按常规进行。试验在沂南县孙祖镇金珠园猪场进行。

1.3 基础日粮与试验设计

试验基础日粮营养水平参考NRC(1998)推荐标准配制，基础日粮组成和营养水平见表1。对照组仔猪饲喂基础日粮，3个试验组分别在基础日粮的基础上添加1、2和3mg/kg的ZEA，试验设计见表2。试验所需日粮需于试验正式开始前1周1次性配合完成，在试验前和试验结束后分别取样，用以分析日粮中的养分含量以及毒素水平。

1.4 试验方法

1.4.1 日粮养分和毒素水平 日粮常规养分含量按照张丽英(2003)的方法进行。日粮中ZEA、呕吐毒素、黄曲霉毒素和烟曲霉毒素测定委托台湾亚洲谷物检测中心测定。呕吐毒素的测定采用高效液相色谱法，ZEA、黄曲霉毒素和烟曲霉毒素采用酶联免疫吸附和荧光测定法。黄曲霉毒素、ZEA、呕吐毒素和烟曲霉毒素的最低检测限为分别为1μg/kg、0.1mg/kg、0.1mg/kg和0.25mg/kg。

表1 基础日粮组成和营养水平

注：每千克日粮提供：VA3300IU、VD3330IU、VE24IU、VK30.75mg、VB11.50mg、VB25.25mg、VB62.25mg、VB120.026mg、泛酸15.00mg、尼克酸22.5mg、生物素0.075mg、叶酸0.45mg、锰6.00mg、铁150mg、锌150mg、铜9.00mg、碘0.21mg、硒0.45mg。

表2 试验设计方案 (头、mg/kg)

1.4.2 阴户测量与计算 从正式试验期开始，每天观察猪只阴户，记录发红和肿胀的时间。所有猪只每4d用游标卡尺测量阴户长度和宽度。仔猪阴户俯视近似一菱形，本研究将仔猪阴户视为菱形(图1)，按菱形计算面积，公式为长×宽/2，比较各组仔猪阴户的增大效果。

1.5 数据统计

试验数据使用SAS(SAS9.1, 2003)软件进行统计。采用正交多项式比较法对不同ZEA梯度的处理效应进行线性回归分析；用Duncan’s多组极差检验法进行多重比较。分析仔猪阴户大小随时间的变化规律，并根据t-检验确定线性回归的显著性，显著性水平P=0.05。

图1 阴户大小的测量与计算

图2 日粮添加不同水平玉米赤霉烯酮对断奶母猪不同时间阴户长的影响

2 结果与分析

2.1 日粮添加不同水平玉米赤霉烯酮对断奶母猪不同时间阴户长的影响

日粮添加不同水平玉米赤霉烯酮对断奶母猪不同时间阴户长的影响见图2和表3。所有ZEA处理仔猪的阴户长度均随试验时间线性增加(P＜0.05)，对照组阴户长度随试验时间虽然也增加，但是增加不显著(P>0.05)。随ZEA水平的升高，直线回归呈增加的趋势。对不同处理的线性回归进行t-检验，1.1mg/kg ZEA处理组的回归系数与对照组相比差异不显著(P>0.05)，而2.0mg/kg和3.2mg/kg ZEA处理组的直线回归系数显著高于对照组(P＜0.05)。

2.2 日粮添加不同水平玉米赤霉烯酮对断奶母猪不同时间阴户宽的影响

日粮添加不同水平玉米赤霉烯酮对断奶母猪不同时间阴户宽的影响见图3和表3。所有处理仔猪的阴户宽均随试验时间线性增加(P＜0.05)。随ZEA水平的升高，直线斜率呈线性增加的趋势。对不同处理的线性回归进行t-检验，所有ZEA处理组的线性回归系数均显著大于对照组(P＜0.05)。

表3 日粮添加不同水平玉米赤霉烯酮对断奶母猪不同时间阴户长、宽和面积的线性回归方程 (mm、mm2)

图3 日粮添加不同水平玉米赤霉烯酮对断奶母猪不同时间阴户宽的影响

图4 日粮添加不同水平玉米赤霉烯酮对断奶母猪不同时间点阴户面积的影响

2.3 日粮添加不同水平玉米赤霉烯酮对断奶母猪不同时间点阴户面积的影响

日粮添加不同水平玉米赤霉烯酮对断奶母猪不同时间阴户面积的影响见图4和表3。所有处理仔猪的阴户面积均随试验时间呈线性增加(P＜0.05)。随ZEA水平的升高，直线回归呈增加趋势。对不同处理的直线回归进行t-检验，所有ZEA处理组的直线回归均显著大于对照组(P<0.05)。

3 讨论

玉米赤霉烯酮(ZEA)雌激素效应的很多研究集中在外周生殖器官，可诱发猪的雌激素过多症，典型的临床症状为阴户湿肿、阴道和直肠脱垂以及乳腺增大。母猪以胶囊形式口服ZEA含量为3.5、7.5或11.5mg/kg体重的日粮后，所有母猪均出现阴道炎及生殖道肿大(Farnworth and Trenholm, 1981)。饲喂ZEA(1.5mg/kg或2mg/kg)7d便出现阴户红肿(Rainey et al., 1990)。研究表明，ZEA有很强的雌激素效果，对新生鼠和发育未成熟鼠的子宫重量均具有刺激作用，并均符合剂量-反应曲线模型(Jefferson et al., 2002)。给切除卵巢的雌性鼠皮下连续注射ZEA (≥2mg/kg·d)，与对照相比显著增加了子宫重(Takemura et al., 2007)，表明ZEA具有很强的雌激素效应。本试验进行7d后，3.2mg/kg ZEA处理中的母猪即出现阴户湿肿，而在24d时，3.2mg/kg ZEA处理组仔猪的阴户长度、宽度、高度和面积分别比对照组增大了25.9%、36.2%、26.9%和76.3%。与对照组相比，仔猪日粮添加1.1mg/kg 或更高水平的ZEA显著增加仔猪生殖器官指数，且仔猪生殖器官指数随ZEA水平的增加呈线性增加，进一步证实ZEA的雌激素效应(Jiang et al., 2011)。本研究中根据阴户大小和日粮ZEA的剂量关系，首次采用线性回归的方式定量比较不同水平ZEA对阴户大小的影响，方法简单，易于在生产中推广，为养猪生产中ZEA的污染状况提供理论依据。

4 结论

日粮添加1.1~3.2mg/kg ZEA显著增加断奶母猪的阴户长、宽和阴户面积(P＜0.05)。随ZEA水平的升高，母猪的阴户长、宽和阴户面积呈线性增加的趋势(P＜0.05)。

[1] 张丽英. 饲料分析与饲料质量检测技术[M]. 北京: 中国农业大学出版社, 2003.

[2] Farnworth, E. R. and Trenholm H. L.. The effect of acute administration of the mycotoxin zearalenone to female pigs., 1981. 16: 239-252.

[3] Jefferson, W. N., Padilla-Banks E., Clark G., Newbold R. R.. Assessing estrogenic activity of phytochemicals using transcriptional activation and immature mouse uterotrophic responses. J. Chromatogr., 2002. 25: 179-189.

[4] Jiang, S. Z., Yang Z. B., Yang W. R., Wang S.J., Liu F.X., Johnston S. L., Chi F. Wang Y., 2011. Effect of purified zearalenone with or without modified montmorillonite on nutrient availability, genital organs and serum hormones in post-weaning piglets. Livest. Sci., DOI: 10.1016/j.livsci.2011.11.004.

[5] NRC, National Research Council. Nutrient Requirements of Swine. 10th Ed. National Academy Press, Washington, DC. 1998.

[6] Rainey, M. R., Tubbs R. C., Bennett L. W., Cox N. M.. Prepubertal exposure to dietary zearalenone alters hypothalamo-hypophysial function but does not impair postpubertal reproductive function of gilts. J. Anim. Sci., 1990. 68: 2015-2022.

[7] Takemura, H., Shim J., Sayama K., Tsubura A., Zhu B. T., Shimoi K.. Characterization of the estrogenic activities of zearalenone and zeranol in vivo and in vitro. J. Steroid Biochem., 2007. 103: 170-177.

（2011–12–29）

山东省现代农业产业技术体系生猪产业创新团队

通讯作者

S828.1

A

1007-1733(2012)01-0004-03