复方卡波姆诱导的兔慢性高眼压模型探讨

方丽 陈献花 李家忠 李雪来 赵金川 （浙江省医疗器械检验所 杭州 310009）



复方卡波姆诱导的兔慢性高眼压模型探讨

方丽 陈献花 李家忠 李雪来 赵金川 （浙江省医疗器械检验所 杭州 310009）

采用新西兰兔16只，每只兔的左眼为模型眼，右眼为对照眼。注入复方卡波莫溶液0.3ml，测量眼压、角膜厚度并观察兔眼的变化。结果表明，16只兔均造模成功，在手术4周内平均眼压值为23~25mmHg，术后4周的实验眼平均眼压仍有23.17mmHg，对照眼为14.33 mmHg，2组相比较有显著性差异(P<0.05)。因此，兔眼前房注射复方卡波姆是一种理想的慢性高眼压模型。

高眼压 模型 动物 卡波姆

青光眼是一种以视神经损害和视野缺损为特征的致盲眼病，其发病机制目前尚不十分明确，普遍认为眼压升高是青光眼视神经损害发生和发展机制中最主要的危险因素[1]。通过实验方法诱导动物高眼压，是研究其发病机制的主要手段，而建立有效稳定的高眼压模型是进行研究的关键[2]。因此，笔者在2010年9~11月用复方卡波姆诱导，建立兔眼慢性高眼压模型，以眼压、并发症及病理检查作为观察指标，评价其建模效果。

1 材料和方法

1.1 试剂与仪器 含0.3%卡波姆和0.025%地塞米松的复方卡波姆溶液，pH值4，卡波姆(山东正大福瑞达药液集团生产)，0.5%地塞米松(广州白云山天心制药有限公司生产)；手持接触眼压计(美国Reichert公司)；裂隙灯显微镜(苏州六六视觉科技有限公司)；角膜A型超声测量仪(美国Alcon公司)；Nikon ECLIPSE E200光学显微镜。

1.2 试验动物及分组 新西兰兔16只，雌雄不限，体重2~3kg，兔龄12周。由浙江省农业科学院畜牧兽医研究所提供[SCXK(浙)2008-0025]。造模前用裂隙灯显微镜、眼底镜检查眼前段及眼底无异常。每只动物的左眼为模型眼，右眼为对照眼。

1.3 方法 新西兰兔耳缘静脉注射3%戊巴比妥钠30mg/kg麻醉，0.4%倍诺喜眼液(盐酸奥布卡因)液滴眼局部麻醉。试验眼注射复方卡波姆溶液前，先在对侧角膜缘穿刺，然后注入复方卡波姆溶液0.3ml。对照眼单纯角膜缘穿刺。测量眼压、角膜厚度并观察兔眼的变化。手术4周后耳缘静脉注射空气处死动物，取双侧眼球，常规固定、脱水，石蜡包埋，切片，HE染色，光学显微镜观察。

1.4 试验数据统计学处理 所获数据作配对资料的t检验，使用excel进行数据统计分析，显著标准P=0.05。

2 结果

2.1 眼压变化 试验前双眼眼压无明显差异(P>0.05)，基线眼压为12.58mmHg，试验眼术后平均眼压为37.3mmHg，眼压峰值为55.5mmHg，时间为术后8h，术后4周的平均眼压为23.17mmHg，对照眼为14.67mmHg，两组相比差异显著(P＜0.05)。

表1 实验眼、对照眼眼压比较 (mmHg)

注：试验眼与对照眼相比，术后各时间段差异显著(P＜0.05)。

2.2 眼前部、角膜变化 试验眼前房注射后均出现不同程度的睫状充血、角膜水肿及前房混浊。1周左右达到高峰，角膜厚度为902.33mm，后逐渐下降，4周时仍有463.67mm，与术前395.67mm相比差异显著(P＜0.05)。

表2 试验眼、对照眼角膜中心厚度比较 (mm)

注：试验眼与对照眼相比，术后各时间段差异显著(P＜0.05)。

2.3 眼组织病理改变 试验眼角膜上皮组织有增生，可见少量淋巴细胞浸润，部分小梁网纤维组织增生，变致密(图1、2)。对照眼未见明显异常(图3、4)。

图1 试验组(HE×40)

图2 试验组(HE×100)

图3 对照组(HE×40)

图4 对照组(HE×100)

3 讨论

青光眼作为人类主要致盲性眼病之一，对青光眼的发病机制、发展过程并不是十分明确，有效治疗手段也欠缺，需要进行大量的动物实验进行探讨。选择方法简单、成本低廉、易于操作、易于控制、眼压稳定的理想青光眼实验动物模型十分必要。目前国内外建立实验性青光眼模型的方法大致可分为3类[3]：一是破坏小梁结构，引起房水流出受阻导致高眼压的方法，如高渗盐水注入房水静脉，以及激光破坏小梁网组织等；二是从眼球外部来妨碍房水正常引流的方法，如增加上巩膜静脉压力升高眼，结扎涡静脉、结扎眼球后部的血管、热灼烧或化学烧灼角膜缘结膜下组织、硅胶带眼球环扎术等；三是阻塞房角流出道引起的高眼压法，如前房内注入甲基纤维素、a糜蛋白酶、血影细胞、空气、矿物油等。

复方卡波姆诱导的兔慢性高眼压模型即为含0.3%卡波姆和0.025%地塞米松的复方卡波姆溶液注入前房阻塞房角流出道引起的。卡波姆是内烯酸与烯内基蔗糖或季戊四醇交链而成的高分子聚合物，是一种优良的药剂新辅料[4]。有良好的乳化性、增稠性、助悬性和成膜性。当ph值较低时呈溶液状，随着ph值的升高，药液的黏稠度逐渐增加而形成水凝胶状；而当ph值为6~12时最为黏稠；在高眼压模型中主要应用的是该药的黏合性、凝胶性、增稠性等特点，使注入前房的卡波姆溶液在房水作用下随着ph值的升高变为凝胶状阻碍房水排出。将卡波姆液中加入地塞米松的目的：一是增加眼压升高的幅度及延长眼压升高的时间，二是减轻眼部炎性反应。而对侧角膜缘穿刺形成一个针孔，是由于注入复方卡波姆溶液过程中，眼内容物突然增加，会造成眼内压急剧升高，房水在过高的压力下会自动从此针孔中渗漏出，防止兔眼角巩膜扩张。

本试验由复方卡波姆溶液诱导的高眼压模型，操作简单，眼压升高稳定，4周后仍有23.17mmHg，持续时间长。虽然由于眼压升高和炎症刺激出现不同程度的睫状充血、角膜水肿及前房混浊等情况，但大部分持续一段时间后可减轻或消失。试验术后8h眼压即达到峰值，但角膜水肿情况为1周时最高，3周时结膜充血及前房渗出已经不明显，角膜厚度虽然仍比正常为高，但角膜已经完全透明，眼压仍高，还可持续较长时间，可进行青光眼实验研究。同时本实验病理改变显示部分小梁网纤维组织增生，变致密，从病理上间接证明慢性青光眼模型建立成功。

兔作为实验动物，其成本低廉，虽然其房角与人的房角有明显的形态学差异，如梳状韧带、狭窄薄弱的睫状肌系统以及巩膜静脉丛，但兔的房水外流通道却和人眼一样，而且由于兔眼大小接近于人眼，可用于观察手术对高眼压模型的降眼压作用，是理想的青光眼模型动物。

[1] van Buskirk EM. Coiffi glaucomatous optic neuropathy[J]. Am Ophthalmol 1992,113(4): 447-451.

[2] 徐岩, 陈祖基, 宋洁贞. 复方卡波姆诱发的兔高眼压模型与其它兔高眼压模型的比较研究[J]. 中华眼科杂志, 2002, 38(3): 172-175.

[3] 陈晔, 崇晓霞. 慢性高眼压动物模型的研究进展[J].内蒙古医学杂志, 2008, 40(5): 519-522.

[4] 罗明生, 高天惠. 药剂辅佐大全[M]. 成都: 四川科学技术出版社, 1995: 383-386.

（2011–11–03）

浙江省实验动物科研计划项目2008F80008

S858.291

A

1007-1733(2012)01-0011-02