北虫草规范化培殖技术要点

刘明辉，李洪波，孙红霞，李福泉

（辽宁仙榆湾北冬虫夏草（集团）有限公司，辽宁 本溪 117000）

北虫草Cordycepsmilitaris（L.）Link为子囊菌亚门麦角菌目麦角菌科虫草属，又名蛹虫草、北蛹虫草、虫草花等。野生北虫草菌株分布较广，陕西、吉林、河北、辽宁、安徽，云南、湖北、广东、广西、四川、贵州、福建均有分布，多分布于低海拔地区[1-2]。主要含有虫草素、虫草酸、虫草多糖、SOD、蛋白质、10余种维生素、20余种矿质元素等成分[3-4]，具有补肺益肾功能。

北虫草野生菌株寄主广泛[5]，春夏至夏秋季节，半埋于林地或腐枝落叶层下的昆虫蛹上，长出子座，子座单生或丛生，一般不分枝，高4～7 cm，单个子座粗3～5 mm。人工栽培一般高8～10 cm，丛生性强。

1 场地及准备工作

1.1 场地的选择

北虫草培殖场地应选在远离城市、重工业区、矿山、畜牧厂等可能造成杂菌污染的地方。要选离优质水源较近、交通便利的地方。

1.2 场区功能化分

场区大体上可分为生活区和生产区。生活区包括职工宿舍、食堂等。生产区包括实验室、洗刷室、装料室、灭菌室、接种室、标准化培养室、库房（原料库与成品库分开）、锅炉房等。

1.3 设备

1.3.1 生产设备 生产设备包括锅炉、灭菌器（柜）、接种机、培养室光源（日光灯）、洗瓶机、烘干机、培养器皿。

1.3.2 实验室（制种室）设备 培养箱、摇瓶柜、超净工作台、冰箱等。

2 北虫草规范化培殖工艺流程

3 菌种

菌种是北虫草规范化生产中起决定性作用的因素。要想获得理想的产品质量和产量，必须把好菌种关。对于规模较小或没有自主生产菌种能力的企业（个人）应当选择有能力、有经验、有资质的菌种生产单位购买菌种来生产。

3.1 菌种制备

3.1.1 母种 优良菌种可以通过孢子分离法和组织分离法获得。

3.1.1.1 孢子分离法 选取新鲜成熟的蛹虫草子座中间一小段，悬挂在无菌的锥形瓶内，待子囊孢子或次生孢子弹射后，蘸取少许孢子接入斜面培养基上，置24℃左右遮光条件下培养[6]。

3.1.1.2 组织分离法 选取新鲜、健壮的虫草子座中间一段，经酒精进行表面消毒后用手撕开，用接种针挑取断面内部白色组织一小块，接于斜面培养。凡分离获得的菌丝均须进行先端菌丝提纯培养，并反复数次，才能获得纯菌种。培养基配方：马铃薯200 g（煮汁），葡萄糖20 g，琼脂20 g，磷酸二氢钾1 g，硫酸镁 1 g，蛋白胨 0.5 g，水 1000 mL[7]。

3.1.2 生产种的制备

3.1.2.1 培养基配方 马铃薯200 g（煮汁），葡萄糖20 g，磷酸二氢钾1 g，硫酸镁1 g，蛋白胨0.5 g，水1000 mL。

3.1.2.2 培养基制作过程 将马铃薯200 g去皮洗净，切成1cm大小的小块，于1000 mL开水中煮10～15 min，8层纱布过滤，按配方加入其他成分即成液体培养基。

3.1.2.3 分装、灭菌 将上述培养基按每瓶100 mL装入250 mL三角瓶中，加盖棉塞，外用牛皮纸包好。将三角瓶放入高压锅121℃灭菌30 min。

3.1.2.4 接种及摇瓶培养 取出三角瓶，晾至室温。在超净工作台上以无菌操作将试管种接入三角瓶。将三角瓶装入摇瓶柜，于19.5℃、120 r·d-1培养5～7 d。检查无杂菌污染可马上使用或收入冰箱4℃保存。保存时间不应超过10 d。

4 培育过程管理要点

4.1 灭菌

灭菌分为高压灭菌和常压灭菌。二者各有优势，生产上可根据实际情况自由选择。

4.1.1 高压灭菌 高压灭菌需要配备蒸汽锅炉及高压灭菌器，灭菌时将培养基放入高压灭菌器，121℃维持40 min。采用高压灭菌优点是时间短，能量消耗少，灭菌效果好。

4.1.2 常压灭菌 将培养基放入高温灭菌器（或灭菌灶），锅炉将水烧沸，维持约6 h。采用常压灭菌安全性高，但时间长且灭菌效果也不如高压灭菌。

4.2 接种

将灭菌后的培养基冷却后送往接种室，在无菌条件下接入事先准备好的菌种，接种量控制在10%～20%。

4.3 避光培养（发菌）

接种后的培养基送入避光室，温度控制在16～18℃恒温培养，湿度控制在65%～70%。发菌阶段要经常进行检查，发现有杂菌的培养基随时进行处理，培养室内不得留存污染培养基。经过7～10 d培养基表面布满菌丝，菌丝吃透培养基，将培养基移至培养室进行见光培养。

此外，也可在培养室布置窗帘等避光设施，在培养室避光发菌，发菌结束后拉开窗帘开始见光培养。

4.4 子实体培养

培养基长满菌丝后，表面出现一定量的桔黄色突起时，进入子实体培养阶段。这时要进行瓶内通风，方法是用特制的扎眼工具，将封口膜扎几个直径1～2 mm的孔。

培养室要具有良好的通风条件，每天通风1～2次，通风与室外温度协调好，根据外界气温所定，外界气温高时，早晚各通风一次，时间略长些；外界气温低时，中午通风次数略多些，时间略短一些。

4.4.1 温度控制 在见光转色阶段，培养室温度控制在19℃左右。转色完成后，开始加大温差，白天控制在22℃左右，夜晚控制在14～16℃。当出现子实体后（高度在1 cm以上）保持培养室温度为18～22℃。这样有利于提高转化率。

4.4.2 湿度控制 培养室的空气相对湿度保持在80%～90%，即地面潮湿，四壁、窗台不起灰尘，给人以空气清新感觉即可。喷水最好安排在通风时间进行。

4.4.3 光照控制 子实体生长期间给予散射光，远离窗户的地方每隔1 m要加1个40 W日光灯管。出草前每日24 h光照，出草后（高度在1 cm以上）每日10～12 h光照即可。

4.5 采摘、分级、烘干

当子实体发育到10～12 cm时，子座末端不同程度膨大呈棒状，颜色较深，即成熟，要及时采收。采收时要从培养基基部采集，采收的鲜品要根据质量标准进行分级。分级后的虫草分别放在干净的筛网上，在40℃的烘箱中缓慢烘干，烘至干而不易破碎为宜。烘干的虫草为桔黄色或橘红色，切勿日晒，日晒的虫草会变淡黄色或黄白色，降低了商品质量。

4.6 包装

4.6.1 精包装 将虫草干品精细挑选选出优质虫草。将挑选出的虫草装入塑料包装袋后装入包装盒，并且贴标、打码。精包装的虫草子实体能够提高虫草的价格。对树立企业品牌起到积极作用。

4.6.2 粗包装 将分级的虫草干品分别装入塑料袋，并标明等级。粗包装要注意以下两点：

防潮：要将粗包装的虫草干品放置于干燥通风处，尤其夏季更要防止发生霉变。

避光：要将粗包装的虫草干品用两层黑色塑料袋密封，放置于避光处。

4.7 入库

将包装后的虫草产品送至库房入库，放置于避光、干燥、通风的货架上。