康乐鼻炎片中马来酸氯苯那敏的含量测定法

刘荷英，程奇珍，易路遥

(江西省食品药品检验所，江西南昌330029)

康乐鼻炎片是卫生部药品标准中药成方制剂第十二册收载的复方制剂，由苍耳子、辛夷、白芷、马来酸氯苯那敏等11味中西药加工制成，用于外感风邪、胆经郁热、脾胃湿热而致的伤风鼻塞、鼻窒、鼻鼽、鼻渊。本文采用高效液相色谱法对马来酸氯苯那敏的含量进行测定，方法专属性好，准确度高，供试品溶液制备方法简单，可有效对康乐鼻炎片进行质量控制。

1 仪器与试药

高效液相色谱仪(岛津LC－2010型);紫外分光光度计(UV2401型);精密天子天平(Sartorius BP211D型)。

马来酸氯苯那敏对照品(中国药品生物制品检定所提供，含量99.7%，批号:100047－200606);康乐鼻炎片(每片含马来酸氯苯那敏 0.66 mg，批号 100900，100901，100902，江西药都仁和制药有限公司提供);乙腈(色谱纯);十二烷基硫酸钠(分析纯);磷酸(分析纯)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适用性 色谱柱:Diamonsil C18(4.6 mm ×150 mm，5 μm);流动相:乙腈 －0.5%十二烷基硫酸钠(含0.1%磷酸)(50∶50);柱温:25 ℃;流速:1.0 mL·min－1;进样量:20 μL;检测波长:262 nm。理论板数按氯苯那敏峰计算应不低于2 000，马来酸氯苯那敏峰的分离度应符合要求。为了考察干扰组分的干扰情况，分别吸取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液各20 μL注入液相色谱仪，记录色谱图，供试品色谱图中，在与对照品色谱图相同保留时间有相应的峰，阴性对照液无对应峰，结果见图1。

图1 对照品(A)、阴性样品(B)及供试品(C)色谱图

2.2 试验溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备 取马来酸氯苯那敏对照品12.5 mg，精密称定，置50 mL量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取5 mL，置50 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。

2.2.2 供试品溶液的制备 取本品20片，除去糖衣，研细，取细粉约1 g，精密称定，置50 mL量瓶中，加流动相40 mL，摇匀，超声处理30 min，取出，放置至室温，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.2.3 阴性溶液的制备 称取1.0 g缺马来酸氯苯那敏的样品，同供试品溶液制备法制备。

2.3 线性关系 精密称取马来酸氯苯那敏对照品12.80 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得0.255 2 mg·mL－1的对照品贮备液，分别精密吸取对照品贮备液 1、3、5、7、10 mL 置50 mL 量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，各精密吸取20 μL注入液相色谱仪，记录色谱图，以峰面积Y对进样浓度C进行线性回归分析，结果马来酸氯苯那敏在进样浓度为5.105 ～51.05 μg·mL－1范围内呈良好线性关系，其线性回归方程为:Y=18 274 C+577.59，r=1.000。

2.4 检测限 在上述色谱条件下，取马来酸氯苯那敏对照品适量，用流动相溶解并定量稀释，在信噪比约为3∶1，得马来酸氯苯那敏检测限为1.532 ng。

2.5 精密度试验 对线性项下25.52 μg·mL－1的马来酸氯苯那敏对照品溶液连续6次进样分析，计算氯苯那敏峰面积的RSD值。结果RSD为0.1%，精密度良好。

2.6 重复性试验 精密称取供试品细粉(批号:100900)约1 g，共6份，置50 mL量瓶中，同供试品溶液制备法制备，结果RSD为0.6%，表明该方法的重复性良好。

2.7 回收率试验 取供试品细粉(批号:100900)0.5 g，共6份，分别精密称定，再精密加入马来酸氯苯那敏对照品贮备液适量，照正文含量测定方法，测定峰面积，回收率结果见表1。

表1 加样回收率试验结果

2.8 稳定性试验 精密称取供试品细粉(批号:100900)1.005 0 g，置50 mL量瓶中，同供试品溶液制备法制备，分别在 0、2.5、5、7.5、10、12.5 h 取供试品溶液进样分析，结果峰面积RSD为0.5%。

2.9 耐用性试验 分别用岛津LC－2010和Agilent 1200高效液相色谱仪通过3根色谱柱(色谱柱1:Diamonsil C18，4.6 mm ×150 mm，5 μm;色谱柱 2:Diamonsil C18，4.6 mm × 250 mm，5 μm;色谱柱 3:Agilent C18，4.6 mm ×250 mm，5 μm)对马来酸氯苯那敏对照品溶液及重复性样品(共6份)进行测定，结果平均标示百分含量为81.3%，RSD为0.5%。

2.10 样品测定 按正文拟定方法测定3批样品中马来酸氯苯那敏的标示百分含量，测定结果见表2。

表2 样品测定结果

3 讨论

康乐鼻炎片成分复杂，且氯苯那敏含量较低，测定时干扰物质较多，有文献通过三氯甲烷多次提取来去除干扰［1］，此方法操作繁琐，误差大，故本文尝试用有机溶剂直接超声提取，试验中考察了甲醇、流动相、50%无水乙醇和无水乙醇4种提取溶剂，结果氯苯那敏提取效果优劣次序为:流动相/50%无水乙醇＞甲醇＞无水乙醇，因文献报道的50%无水乙醇提取［2］时溶液较为粘稠，不易滤过，故最终选择流动相作为康乐鼻炎片马来酸氯苯那敏的提取溶剂。考察了不同的供试品取样量和超声时间，结果在供试品取样量为0.5 g、1.0 g和2.0 g时，超声时间为15 min、30 min 和 45 min 时马来酸氯苯那敏的提取效果基本一致。

试验中曾考察了5种流动相体系，分别为:①原标准中流动相:甲醇－含1%三乙胺和0.005 mol·L－1庚烷磺酸钠的0.05 mol·L－1磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节 pH 至3.0)体系;②乙腈－磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢铵11.5 g，加水溶解，量取磷酸1 mL，加水稀释至1 000 mL)体系;③乙腈－磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾6.8 g，加1 mol·L－1氢氧化钠15.2 mL，三乙胺 0.5 mL，用水稀释至1 000 mL)体系;④乙腈－0.2%十二烷基硫酸钠水溶液(含0.1%磷酸)体系;⑤乙腈－0.5%十二烷基硫酸钠水溶液(含0.1%磷酸)体系。结果发现在上述不使用离子对试剂的体系中，无论如何调节有机相与水相的比例，氯苯那敏与杂质峰均不能实现良好分离，增加十二烷基硫酸钠离子对试剂浓度，可以使氯苯那敏在色谱柱上保留增强，从而更好地与杂质峰分离，以乙腈－0.5%十二烷基硫酸钠水溶液(含0.1%磷酸)(50∶50)为流动相时，氯苯那敏与杂质峰分离良好，峰形尖锐对称，保留时间较短。

［1］蒙跃龙，李小安.HPLC法测定康乐鼻炎片中马来酸氯苯那敏的含量［J］.现代中医药，2005，25(6):51 －52.

［2］谭正虹，郭栩丰，周小露，等.HPLC法测定康乐鼻炎片中马来酸氯苯那敏的含量［J］.今日药学，2008，18(3):32 －33，88.