“三阴”型与非“三阴”型乳腺癌临床特征与E-钙黏蛋白表达的临床意义

陈蕾 吴晓 洪超群 庄轶轩

[摘要] 目的 通过回顾性分析总结“三阴”型乳腺癌与非“三阴”型乳腺癌患者的临床病理特征、生物学特点以及两组E-钙黏蛋白表达情况来探讨其表达与乳腺癌转移及预后的相关性，以指导临床对于预后的判断。 方法 随机抽取笔者所在医院收治的经病理组织学确诊的乳腺癌患者病理组织113例，所有资料临床数据可溯源，且随访完整。采用统计软件对“三阴”型与“非三阴”型乳腺癌患者的临床病理学特点、复发转移、月经状况、E-钙黏蛋白表达等方面进行分析。 结果 “三阴”型与非三阴型乳腺癌患者相比，E-钙黏蛋白表达无明显统计学差异。但E-钙黏蛋白低表达者，生存曲线有下降趋势。logistic回归分析显示E-钙黏蛋白表达与腋窝淋巴结早期转移、远处转移部位多少、绝经状态以及ER表达状态差异有统计学意义（P＜0.05）；同时用COX风险模型多因素分析显示，本组患者腋窝淋巴结数目、远处转移部位多少为三阴及非三阴性乳腺癌预后不良的独立危险因素。Kaplan-Meier生存曲线显示ER阳性且E-钙黏蛋白低表达的非三阴乳腺癌生存时间缩短，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 “三阴”型乳腺癌与非“三阴”型乳腺癌E-钙黏蛋白表达低者预示生存时间缩短，同时E-钙黏蛋白表达与ER表达呈负相关性 （P＜0.05）。E-钙黏蛋白表达对于乳腺癌预后具有指导性意义。

[关键词] E-钙黏蛋白；乳腺癌；三阴；非三阴

[中图分类号] R446.8???[文献标识码] A???[文章编号] 2095-0616（2012）15-26-03

Clinical significance of "three negative" and non- "three negative" breast carcinoma clinical features and E-cadherin protein expression

CHEN?Lei1??WU?Xiao2??HONG?Chaoqun2??ZHUANG?Yixuan2

1.Deparyment of Internal Medicine Oncology,Cancer Hospital Affiliated Shantou University Medicine College, Shantou 515031,China;2.Cancer Research Laboratory,Cancer Hospital Affiliated Shantou University Medicine College,Shantou 515031,China

[Abstract] Objective To explore the connection between E-cadherin's expression and breast cancer metastasis and prognosis,through retrograde analytic summary the clinical pathologic feature and biological feature of triple-negative breast cancer and non-triple-negative breast cancer,and the E-cadherin expression of the two groups,to guide clinical evaluation of prognosis. Methods 113 cases of breast cancer pathologic tissues in the author's hospital were randomly selected and had been diagnosed by histopathology.All the clinical datum had the origin and had get the full follow-up.Using analytic software to analyze the clinical pathologic feature regress and metastasis,menstruation,expression of E-cadherin of both TNBC and NTNBC. Results The E-candherin expression between the two groups had no significant difference.But the patients who had low express of E-cadherin,their survival curve on a downward trend.Logistic retrograde analysis showed that the expression of E-cadherin and armpit lymph node number,the number of long-term metastasis,menopause and ER expression condition had significant relation and there had analytic significance(P＜0.05).At the same time,the COX risk model muti-factor analysis showed that:all above factors were the isolate risk factors for the poor-prognosis of both TNBC and NTNBC.Kaplan-Meier life curve showed that the NTNBC whose estrogen receptor was negative and had alow expression of E-cadherin had shorter life time.And the difference had analytic significance(P＜0.05). Conclusion Both TNBC and NTNBC who have lower expression of E-cadherin mean that the shorten survival time,and the expression of E-cadherin has negative relation with the ER expression.

[Key words] Breast Cancer;E-cadherin;Ttriple-negative breast cancer;Non-triple-negative breast cancer

乳腺癌的复发转移是死亡的主要原因，也是基础和临床研究的重点[1]。三阴型（TNBC）乳腺癌约占乳腺癌的15%左右，好发于40岁以下的妇女，预后极差，5年生存率不足15%。病

理学特征为导管癌，高组织学分级，肿瘤侵袭性强，易发生局部复发及远处转移，内分泌治疗和曲妥珠单抗治疗无效[2-4]。三阴型与非三阴型（non-TNBC）乳腺癌生物学行为的不同导致了两者疗效和预后的差异。本研究将通过联合检测三阴及非三阴乳腺癌组织标本E-钙黏蛋白（E-cadherin）的表达，探讨E-cadherin的表达与乳腺癌病理类型、淋巴结转移情况、复发转移发生的相关性，与ER、PR表达的相关性及与乳腺癌预后的相关性，从而为乳腺癌的个体化诊断与治疗研究提供新的监测点。

1?资料与方法

1.1?一般资料

随机选取2003年1月～2008年12月汕头大学医学院附属肿瘤医院既往随访3年以上乳腺癌患者病理组织标本113例，且临床资料及随访资料均完善。全组患者共113例，全部为女性乳腺癌，年龄最大88岁，最小30 岁，中位年龄51岁。病灶组织病理类型浸润性导管癌92例，占81.4%，浸润性小叶癌11例占9.7%，其他癌10例占8.8%。全组中三阴型乳腺癌31例，占27.4%，非三阴型乳腺癌82例，占72.6%。死亡或失访52例占46%，生存61例占54%。随访率94.7%，失访率5.3%。根据受体表达情况对这些资料进行病理分型（三阴型与非三阴型），其中免疫组化Her2（+++）为阳性，Her2（+）～（++）为阴性。应用免疫组化的方法分别检测这些乳腺癌石蜡包埋切片的E-cadherin蛋白表达情况，并分析E-cadherin的表达与乳腺癌早期转移的相关性，同时分析E-cadherin与ER、PR之间是否相关，探讨E-cadherin的表达与乳腺癌的恶性生物学行为和预后的相关性。相关原始数据输入SPSS18.0软件建立临床资料数据库。见表1。

1.2?试剂

E-cadherin兔抗人多克隆抗体购自Santa Cruz （sc-25742），Supervision二抗购自上海长岛公司（D-3004），DAB购自福州迈新公司。试剂批号201108。

1.3?实验方法

乳腺癌组织经脱蜡入水后，按照二抗Supervision方法说明书进行染色，切片经柠檬酸缓冲液（pH=6.0）微波热修复预处理。

1.4?结果判断

E-cadherin以细胞膜表达明显的黄色或棕黄色颗粒为阳性细胞，根据本组结果实际观察数据，参考相关文献进行判断。定义为阳性细胞表达≥80%即为E-cadherin正常表达，阳性细胞＜80%则E-cadherin表达下调即为低表达[5]。E-cadherin低表达及E-cadherin正常表达见图1～2。

1.5?统计学处理

采用SPSS18.0软件对全组数据进行统计学分析，判断E-cadherin表达及与临床病理特征的关系，采用logistic回归模型分析方法，并用生存分析Kaplan-Meier生存曲线对比，log rank检验显示E-cadherin表达与三阴型与非三阴型乳腺癌预后因素的相关性。

2?结果

2.1??E-cadherin的表达与临床各个病理参数之间logistic回归分析

E-cadherin的表达与临床各个病理参数之间logistic回归分析结果见表2。

2.2?用生存分析Kaplan-Meier生存曲线比较

E-cadherin的表达与三阴与非三阴型乳腺癌预后因素的相关性。E-cadherin表达与ER阳性乳腺癌生存之间的差异见表3及图3。

3?讨论

E-钙黏蛋白是钙黏素家族的一员，其与细胞浆中的各种糖蛋白如连环素形成复合物，对细胞间的粘附起很重要的作用，

在生理条件下调节细胞与细胞之间、细胞与基质之间的粘附反应，可以维持细胞极性和参与分化调节，维持组织结构形态和完整性。然而越来越多的研究表明，在病理条件下E-cadherin也参与肿瘤细胞的侵袭和转移过程，且与肿瘤的预后密切相关。研究还显示，乳腺癌中ERα信号途径与 E-cadherin的关系密切，可能对E-cadherin起调控作用。ERα下游基因可通过抑制snail抑制E-cadherin的表达。其他研究还发现许多癌组织中均出现E-cadherin的表达缺失或基因突变，E-cadherin表达降低可引起细胞与细胞之间粘附破坏，E-cadherin的过表达可引起细胞粘附性增加，如用单克隆抗体对E-cadherin受体进行封闭，则能导致细胞的分离和表型改变。同时E-cadherin介导的细胞内粘附功能的丧失与肿瘤发生有关，如失去接触抑制功能，可使细胞无限度地分裂增殖，也使癌细胞易于脱离原发部位而向远处转移。一般来说，在分化较好的癌组织多表达E-cadherin，侵袭和转移也少；而分化较差的癌组织则相反，倾向于侵袭和远处转移。多种人上皮来源的肿瘤中有E-cadherin功能丧失如乳腺小叶癌、弥漫型胃癌、结直肠癌、前列腺癌、肝癌、食管癌、皮肤癌、肾癌和肺癌[6-8]。

基础及临床研究表明，乳腺癌是一种高度异质性肿瘤，在西欧、北美等发达地区乳腺癌发病率居女性癌瘤首位。近年来我国不论沿海发达地区还是城乡较落后地区乳腺癌发病率均呈快速上升趋势，甚至于超过西方发达国家水平。而复发转移性乳腺癌既是临床治疗的难点，也是引起乳腺癌死亡的主要原因。因此研究乳腺癌生物标志物，并通过与临床病理参数结合，验证影响不同病理类型乳腺癌预后因素的生物标志物具有重要的临床价值。

笔者通过联合检测三阴及非三阴性乳腺癌组织标本E-cadherin的表达，发现“三阴”型乳腺癌与非三阴乳腺癌患者相比，尽管E-钙黏蛋白表达无明显统计学差异，但是E-钙黏蛋白低表达者，生存曲线表现呈下降趋势。logsitic回归分析分析显示E-钙黏蛋白表达与腋窝淋巴结早期转移、远处转移部位的多少、绝经状态及ER表达显著相关，并有统计学意义（P＜0.05）；同时COX风险模型多因素分析显示，本组患者腋窝淋巴结数目、远处转移部位为三阴及非三阴性乳腺癌预后不良的独立危险因素。Kaplan-Meier对比三阴与非三阴型乳腺癌生存曲线，结果显示在非三阴型乳腺癌中，E-钙黏蛋白表达与ER表达呈负相关，ER阳性且E-钙黏蛋白低表达者，生存时间明显缩短（P=0.019＜0.05），差异有统计学意义。

因此本研究结果认为E-钙黏蛋白与乳腺癌的预后显著相关，与文献报道相符合[9-10]。特别是对于ER阳性，腋窝淋巴结早期转移乳腺癌患者具有指导意义，可以作为生物标志物进行更深入的基础及临床转化研究。

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（收稿日期：2012-07-16）