人参和红花提取物配伍对心肌缺血犬心脏血流动力学的影响*

于 震，韩淑燕，李海霞，屠鹏飞

(北京大学药学院天然药物及仿生药物国家重点实验室，北京 100191)

冠心病(冠状动脉粥样硬化性心脏病)也叫缺血性心脏病，是当前国内外最常见和危害最大的心脏病，已成为人口死亡的主要原因之一［1］。运用中药益气活血法治疗心肌缺血具有较好的疗效［2、3］。对于益气活血配伍的临床和实验研究已有大量的文献报道，但存在中药粗提物化学成分不明确、质量难以控制、药理作用与化学成分的相关性研究缺乏、物质基础难以阐明等问题。本文选择具有协同作用的益气活血药对人参和红花，分别将其制备成质量稳定的人参总皂苷(人参提取物)和红花总黄酮(红花提取物)，并进行主要成分含量测定和质量标化;以冠心病心肌缺血为切入点，建立犬冠状动脉结扎型心肌缺血模型，观察人参、红花提取物及其配伍对麻醉犬心脏血流动力学的影响，从改善麻醉犬血流动力学方面初步阐释益气活血组方的配伍理论。

1 材料

1.1 药材和标准品

人参炮制品红参药材购自吉林，红花药材购自新疆吉木萨尔县红旗农场，人参中对照品人参皂苷Rg1、人参皂苷 Re、人参皂苷 Rg2、人参皂苷 Rh1、人参皂苷Rb1、人参皂苷 Rc、人参皂苷 Rb2、人参皂苷Rb3和人参皂苷Rd，红花中对照品羟基红花黄色素A、芦丁、山萘酚-3-O芸香糖苷和槲皮素，均由本实验室提供(HPLC检测纯度为98.0%以上)或购自中国药品生物制品检定所。合心爽(盐酸地尔硫卓片)，30mg/片，天津田边制药有限公司生产(批号0702064)。

1.2 仪器

Agilent1100高效液相色谱仪 (美国 Agilent Technologies);电子分析天平(Sartorius BP 110 S德国);MP150型16导生理记录仪(美国 BIOPAC);CBI-8000型多普勒流量计(美国 CRYSTAL BIOTECH);DGD-300C-2型高频电刀(北京贝林);ALC-V10型动物呼吸机(上海奥尔科特)。

1.3 试剂

戊巴比妥钠(德国进口分装)由北京化学试剂公司提供(批号060222);AB-8大孔树脂、HPD100大孔树脂为河北沧州宝恩化工有限公司生产;提取用乙醇为化学纯、HPLC级乙腈由 Caledon公司生产;冰醋酸、三氯乙酸为分析纯;重蒸水经0.45μm滤膜过滤。

1.4 动物

健康成年犬42只，雌雄兼用，体重13.51kg±1.60kg，由北京市芳园缘实验动物养殖厂提供。

2 方法与结果

2.1 人参标准提取物的制备与标化

2.1.1 人参标准提取物的制备 人参炮制品红参药材，切成厚度约为2mm的饮片，以6倍量60%的乙醇加热回流提取0.5h，滤过滤液备用，药渣再加4倍量的60%乙醇提取3次，每次0.5h滤过，合并4次滤液，减压浓缩至相对密度为1.05～1.10(60℃)，浓缩液放置至室温后过 HPD100大孔吸附树脂柱(树脂柱径高比为1∶6，药材与干树脂比例为1∶3)，先用6倍量去离子水洗脱至无糖反应，再用8倍量20%乙醇洗脱，弃去20%洗脱液，然后用60%乙醇洗脱，收集6倍量柱体积60%的洗脱液，回收乙醇并减压浓缩至相对密度1.10～1.20(50℃)，浓缩液喷雾干燥，即得人参标准提取物，主要成分为人参总皂苷，人参标准提取物的提取率为1.11%。

2.1.2 人参标准提取物的标化 人参标准提取物HPLC指纹图谱的建立:(1)供试品溶液的制备。取人参标准提取物12.5mg，精密加入50%甲醇20ml密塞称定重量，超声处理30min放冷，再次称定重量，用甲醇补足减失的重量，经0.22μm滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液;(2)对照品溶液的配制。分别精密称定人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rg2、人参皂苷 Rb1、人参皂苷 Rc、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3和人参皂苷Rd对照品适量，加甲醇制成浓度分别为 Rg1(0.488mg/mL)、Re(0.260mg/mL)、Rg2(0.163mg/mL)、Rb1(0.656mg/mL)、Rb2(0.310mg/mL)、Rc(0.454mg/mL)、Rb3(0.101mg/mL)和 Rd(0.164mg/mL)的混合对照品溶液，同法制成人参皂苷Rh1(0.406mg/mL)对照品溶液;(3)色谱条件。色谱柱:Waters symmetry C18柱;流动相:乙腈(A)-水(B)梯度洗脱:0min～32min，19%～23%A;33min～50min，23%～29%A;50min～70min，29%～30%A;70min～95min，30%～39%A;流速:1.0mL/min，柱温:30℃。进样量10μL，采用电雾式检测器(CAD)进行检测，建立了人参总皂苷的HPLC指纹图谱，并指认了主要色谱峰(结果见图1)。人参标准提取物HPLC的含量测定:表1显示，在1.2.1色谱条件下，同时测定人参标准提取物中各人参皂苷类成分的含量。

3 红花标准提取物的制备与标化［4］

3.2.1 红花标准提取物的制备 红花净药材以8倍量50%乙醇70℃温浸提取2h滤过，滤液备用，药渣再加6倍量50%乙醇70℃温浸提取2次，每次1h滤过。合并3次滤液，减压浓缩至相对密度为1.05～1.10(60℃)。浓缩液放置至室温后过AB－8大孔树脂，药材与树脂比例1∶4，先用去离子水洗脱至洗脱液澄清，再用70%乙醇洗脱至洗脱液无色，收集70%乙醇洗脱液，浓缩至相对密度1.10～1.20(50℃)，喷雾干燥，即得红花标准提取物，主要成分为红花总黄酮，红花标准提取物的提取率为9.08%。

图1 人参标准提取物HPLC指纹图谱

表1 人参总皂苷中主要成分的含量

3.2.2 红花标准提取物的标化 红花标准提取物HPLC指纹图谱的建立:供试品溶液的制备。取红花标准提取物60mg精密加入50%甲醇25ml，密塞并称定重量，超声处理30min后放冷，再次称定重量，用甲醇补足减失重量，经0.22μm滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。

对照品溶液的配制:精密称取羟基红花黄色素A、芦丁、山萘酚-3-O-芸香糖苷和槲皮素对照品，分别加甲醇配制成浓度分别为羟基红花黄色素A(1.04mg/mL)、芦丁(1.30mg/mL)、山萘酚-3-O-芸香糖苷(1.07mg/mL)和槲皮素(1.12mg/mL)的对照品溶液。

色谱条件:色谱柱:AichromBond-AQ C18柱;流动相:乙腈(A)-0.1%甲酸溶液(B)梯度洗脱，0min～20min，2%～19%A;20min～50min，19%～25%A;50min～65min，25%～37%A;65min～75min，37%～40%A;流速:1.0mL/min，柱温:30℃，进样量10ul，检测波长:275nm。建立了红花总黄酮的HPLC指纹图谱，并指认了主要色谱峰(结果见图2)。

图2 红花标准提取物HPLC指纹图谱

表2显示，红花标准提取物HPLC含量测定:在2.2.1色谱条件下，同时测定红花标准提取物中各羟基红花黄色素A和山萘酚-3-O-芸香糖苷的含量。

表2 红花总黄酮中主要成分的含量

4 人参、红花提取物配伍对麻醉犬心脏血流动力学的影响

4.1 造模与给药［5、6］

实验动物用戊巴比妥钠(30mg/kg)静脉麻醉，股静脉建立静脉通道，气管插管连接动物呼吸机，左侧第4肋间开胸暴露心脏，剪开心包做心包床，分离主动脉和冠状动脉左旋支近主动脉部，放置超声多普勒血流探头，分离冠状动脉左前降支，穿线以备结扎造模，心尖插管至左心室连接压力换能器，以肢体导联观测标准Ⅱ导联心电图，将各项指标同步记录于16导多功能生理记录仪，分离十二指肠并插管准备给药，人参和红花分别为前期提取制备的标准提取物。手术完毕待所观察指标稳定后，测缺血前、结扎冠状动脉左前降支致缺血15 min(药前)、药后30min、60min、90min、120min、180min 时的血流动力学指标。

4.2 分组

①生理盐水组3ml/kg，n=6;②合心爽组5mg/kg，n=6;③人参组 60mg/kg，n=6;④红花组 60mg/kg，n=6;⑤人参 +红花低剂量组15+15mg/kg，n=6;⑥人参+红花中剂量组30+30mg/kg，n=6;⑦人参+红花高剂量组60+60mg/kg，n=6。

4.3 检测指标

冠脉血流量、心输出量、左室内压最大上升速率、左室舒张末压、冠脉阻力、总外周阻力等试验数据。

4.4 统计学方法

应用SPSS12.0统计分析软件整理、分析数据，计量资料以均数±标准差(±s)表示，正态性检验采用 One-Sample K-S检验，方差齐性检验采用Levene检验。若数据符合正态分布，方差齐则应用One-Way ANOVA判断其显著性，反之则采用 Two-Independent-Samples Tests判断其显著性。

4.5 人参与红花配伍对心肌缺血犬冠脉血流量、心输出量的影响

表3、4显示，结扎麻醉犬冠状动脉形成心肌缺血后，人参在药后30min可明显增加犬冠脉血流量，红花在药后180min可明显增加心搏出量，在药后30min和180min可明显增加心输出量，与对照组比较均有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01)。人参和红花配伍具有一定的协同作用，人参+红花低剂量在药后30min和60min可明显增加模型动物的冠脉血流量，在药后180min可明显增加心输出量，中剂量在药后180min可增加模型动物的心输出量，与对照组比较均有显著性差异(P＜0.05)。人参+红花低剂量组模型动物的冠脉血流量在药后120min比人参组明显增加，有显著性差异(P＜0.05)。合心爽在药后30min、60min和90min能明显增加冠脉血流量，在药后30min、120min和180min还能明显增加心输出量，与对照组比较均有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01)。

表3 各给药组对心肌缺血犬冠脉血流量(ml/100g·min－1)的影响(n=6，±s)

表3 各给药组对心肌缺血犬冠脉血流量(ml/100g·min－1)的影响(n=6，±s)

注:与生理盐水组比较:*P＜0.05，＊＊P＜0.01;与人参组比较:#P＜0.05

组 别 剂量(/kg)药后(min)30 60 90 120 180生理盐水 3ml 73.04±45.97 73.00±45.23 69.99±51.62 68.07±46.99 64.90±49.10 67.15±51.66 70.50±54.缺血前(正常值)药前值变化率(100%)45 92.55±26.24 85.02±13.69 84.74±16.28 79.90±23.55 85.40±35.02 90.44±46.42合 心 爽 5mg 71.20±55.38 71.64±57.23 83.78±49.80 83.98±45.97 79.22±49.07 76.97±47.16 74.80±50.38 101.18±19.43 128.96±23.27＊＊ 136.68±14.27＊＊ 123.35±35.54* 116.11±44.05 105.44±30.92红 花 60mg 70.49±29.32 71.42±35.41 62.07±38.10 61.35±30.57 61.61±28.88 60.14±36.28 61.70±36.50 106.26±25.48 90.28±37.70 97.43±40.54 95.96±32.39 92.27±43.01 85.84±40.85人 参 60mg 83.06±41.91 98.61±75.00 96.37±52.66 84.35±46.92 78.20±44.62 66.65±40.04 71.47±41.54 97.43±27.58 123.31±39.64* 107.88±36.19 99.47±43.72 74.09±19.14 78.98±23.38人 + 红 低 15+15mg 68.31±54.03 71.53±53.37 69.28±41.37 67.77±40.44 67.40±42.77 66.41±41.11 71.02±45.55 103.30±12.12 107.77±15.15* 109.65±21.31* 109.05±25.00 107.75±25.89# 113.81±32.97人 + 红 中 30+30mg 73.18±44.82 79.06±49.08 75.43±46.17 70.10±43.79 69.80±43.23 65.49±40.72 70.53±37.21 102.85±15.92 102.15±17.00 92.05±11.57 93.17±14.70 86.43±19.48 96.41±20.43人 + 红 高 60+60mg 93.02±36.59 98.77±42.96 76.21±42.57 83.03±37.31 89.02±35.42 96.89±32.11 106.45±39.18 101.07±19.96 73.03±19.42 82.55±24.35 88.48±22.14 99.75±36.55 110.10±44.76

表4 各给药组对心肌缺血犬心输出量(L/min)的影响(n=6，±s)

表4 各给药组对心肌缺血犬心输出量(L/min)的影响(n=6，±s)

注:与生理盐水组比较:*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01

组 别 剂量(/kg)药后(min)30 60 90 120 180生 理 盐 水 3ml 1.64±0.34 1.58±0.70 1.27±0.37 1.26±0.38缺血前(正常值)药前值变化率(100%)1.19± 0.40 1.13± 0.43 0.98± 0.48 94.65±27.25 84.36±14.77 83.31±10.55 77.99±11.44 73.18± 7.51 61.26± 9.12合 心 爽 5mg 1.52±0.34 1.37±0.48 1.67±0.69 1.50±1.04 1.24±0.80 1.48±0.97 1.43±1.00 91.36±25.55 122.98±29.27* 102.67±31.85 84.49±23.53 100.54±27.55* 97.39±34.36*红花 60mg 1.48±0.17 1.39±0.30 1.42±0.28 1.39±0.46 1.27±0.39 1.20±0.44 1.32±0.41 93.24±12.99 103.74±13.10* 100.51±22.83 91.38±18.62 86.06±21.74 95.42±24.73＊＊人参 60mg 1.55±0.31 1.28±0.39 1.23±0.30 1.09±0.28 1.07±0.22 1.04±0.22 0.95±0.24 81.01±11.71 98.85±15.76 89.02±22.91 89.50±30.98 85.73±28.58 77.81±22.30人 + 红 低15+15mg 1.64±0.16 1.64±0.51 1.58±0.44 1.45±0.40 1.41±0.44 1.34±0.51 1.36±0.52 98.92±24.55 97.81±13.92 90.67±18.01 87.69±18.77 81.66±18.09 83.73±23.28*人 + 红 中30+30mg 1.45±0.12 1.17±0.23 1.17±0.20 1.11±0.16 1.04±0.12 1.13±0.28 1.10±0.32 80.63±14.26 101.91±17.86 98.87±32.28 91.94±21.01 113.11±62.88 95.72±29.06*人 + 红 高60+60mg 1.53±0.20 1.39±0.40 1.42±0.72 1.26±0.55 1.36±0.77 1.22±0.48 1.16±0.54 89.68±15.04 98.90±19.83 90.30±23.71 95.56±37.98 89.62±37.31 85.32±41.53

4.6 人参与红花配伍对心肌缺血犬左室内压最大上升速率及左室舒张末压的影响

表5、6显示，麻醉犬冠状动脉结扎形成心肌缺血后，人参在药后90min可增加左室内压最大上升速率，红花在药后30min和60min可增加左室内压最大上升速率，与对照组比较均有显著性差异(P＜0.05)。人参与红花配伍低剂量在药后60min和180min可明显降低左室舒张末压，中剂量在药后90min可明显增加左室内压最大上升速率，180min可明显降低左室舒张末压，高剂量在药后90min和180min可明显增加左室内压最大上升速率，与对照组比较均有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01)。人参+红花高剂量组模型动物的左室内压最大上升速率在药后180min比人参组明显增加，有显著性差异(P＜0.05)。合心爽在药后30min、90min和120min可明显增加左室内压最大上升速率，180min可明显降低左室舒张末压，与对照组比较均有显著性差异(P ＜0.05)。

4.7 人参与红花配伍对心肌缺血犬冠脉阻力、总外周阻力的影响

表7、8显示，麻醉犬冠状动脉结扎形成心肌缺血后，人参在药后30min能明显降低冠脉阻力，与对照组比较均有显著性差异(P＜0.05)。单用人参和红花对犬心肌缺血总外周阻力无明显影响。人参与红花配伍具有一定的协同作用，人参+红花低剂量在药后30min、60min、90min和 120min能明显降低冠脉阻力，中剂量在药后180min还能明显降低总外周阻力，与对照组比较均有显著性差异(P＜0.05)。其中人参+红花低剂量组模型动物的冠脉阻力在药后120min和180min比人参组明显降低，均有显著性差异(P＜0.05)。合心爽在药后30min、60min和90min能明显降低冠脉阻力，在药后30min、60min、120min和180min还能明显降低总外周阻力，与对照组比较均有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01)。

表5 各给药组对心肌缺血犬左室内压最大上升速率(+dp/dtmax)的影响(n=6，±s)

表5 各给药组对心肌缺血犬左室内压最大上升速率(+dp/dtmax)的影响(n=6，±s)

注:与生理盐水组比较:*P＜0.05，＊＊P＜0.01;与人参组比较:#P＜0.05

组 别 剂量(/kg)药后(min)30 60 90 120 180生理盐水 3ml 3435.0 ± 1572.6 3399.50±1768.80 3027.50±1998.20 2998.3 ±1796.10 2633.70±1523.60 275缺血前(正常值)药前值变化率(100%)8.80±1553.90 2600.30 ±1501.30 97.06± 7.24 86.99± 14.71 87.61± 10.94 77.62± 9.78 80.15± 8.23 76.78± 15.26合 心 爽 5mg 4239.7 ±1705.6 3753.30±1129.70 4073.20±1469.40 3815.00±1134.40 4177.80±1411.60 3970.30±1721.20 3581.20 ±1366.10 92.17± 17.89 108.12± 17.48* 104.18± 22.78 113.83± 28.33* 104.53± 22.11* 95.92 ± 20.79红 花 60mg 3168.3± 551.1 2919.70±434.403495.80±603.50 3346.70± 733.503177.80±945.703191.70±1100.80 3503.20±1323.60 93.43± 13.69 121.25± 25.15* 114.63± 20.05* 109.73± 33.98 108.99± 33.51 120.07 ± 45.60人 参 60mg 3501.5 ± 1282.5 3799.50±1199.10 4227.20±1937.70 3986.50±1724.10 4231.20±2088.60 3623.70±1445.70 3220.50 ± 967.40 109.56± 13.37 108.39± 19.01 102.69± 16.33 108.16± 21.75* 94.83± 15.18 85.51± 7.11人+红低15+15mg 4063.0 ± 706.5 3814.50±1017.00 3997.70± 685.60 3861.20± 977.50 3379.50±1102.60 3125.50±1009.10 3091.00 ± 805.90 94.70± 23.50 108.01± 18.86 105.08± 30.01 89.72± 21.95 82.25± 16.53 82.87 ± 18.03人+红中30+30mg4839.0±1082.3 4180.80± 821.90 4080.00± 511.60 3915.20± 511.30 4177.20± 952.40 3322.80± 777.80 3454.30 ± 685.50 87.96 ± 16.33 99.22 ± 12.56 95.57± 15.33 99.77 ± 8.25＊＊ 79.87 ± 13.05 83.55 ± 12.95人+红高60+60mg3367.8± 733.4 2939.70± 614.90 2505.50± 209.30 2746.50± 366.40 2843.00± 466.00 2774.70± 476.50 3359.00 ± 955.00 90.52 ± 29.43 87.92 ± 16.63 95.34± 13.72 98.60 ± 18.44* 96.39 ± 18.76 113.88 ± 21.99＊＊#

表6 各给药组对心肌缺血犬左室舒张末压(mmHg)的影响(n=6，±s)

表6 各给药组对心肌缺血犬左室舒张末压(mmHg)的影响(n=6，±s)

注:与生理盐水组比较:*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01

组 别 剂量(/kg)药后(min)30 60 90 120 180生 理 盐 水 3ml 13.00±7.16 18.83± 9.95 16.83± 8.80 17.50±缺血前(正常值)药前值变化率(100%)7.12 15.17± 6.11 14.33± 5.96 19.00± 6.03 153.26±30.54 88.42±30.11 97.12±16.69 83.05±17.38 82.54±24.77 110.71±26.72合 心 爽 5mg 11.83±2.04 23.00±5.62 17.67±6.62 18.67±6.68 18.83±4.54 16.83±4.12 17.50±4.42 199.31±59.09 77.89±24.15 82.65±25.45 83.39±13.45 73.38± 8.14 77.53±14.82*红花 60mg 10.67±1.37 17.67±4.63 16.83±2.23 18.33±3.56 16.50±3.62 16.00±6.32 14.33±2.34 165.97±39.10 99.93±24.35 107.76±27.11 99.45±33.76 92.84±32.35 85.39±23.57人参 60mg 11.67±4.59 17.83±4.12 15.50±7.23 15.67±6.25 15.33±5.75 14.00±5.02 14.17±5.04 163.72±44.49 86.40±32.96 86.02±20.46 86.25±25.71 79.61±26.41 79.96±23.83人 + 红 低15+15mg 13.67±4.41 19.33±2.66 16.50±2.59 13.83±3.19 13.50±1.87 13.17±1.72 13.83±1.17 148.16±27.36 85.76±10.52 71.77±14.28* 70.43± 9.53 68.67± 9.29 72.36± 8.50＊＊人 + 红 中30+30mg 10.17±3.71 16.67±4.13 16.00±5.29 14.33±4.50 14.17±4.40 14.50±4.51 13.67±3.88 170.73±30.42 95.19±16.43 85.84±16.55 84.92±15.43 87.40±20.49 81.68± 8.05*人 + 红 高60+60mg 11.50±1.87 19.00±3.69 18.67±4.41 18.83±4.26 18.17±4.07 16.83±2.23 16.33±3.88 175.05±75.36 98.21±16.50 101.55±30.28 99.12±33.20 90.01±12.94 87.80±22.90

表7 各给药组对心肌缺血犬冠脉阻力(mmHg/ml·100g－1·min－1)的影响(n=6，±s)

表7 各给药组对心肌缺血犬冠脉阻力(mmHg/ml·100g－1·min－1)的影响(n=6，±s)

注:与生理盐水组比较:*P＜0.05，＊＊P＜0.01;与人参组比较:##P＜0.01

组 别 剂量(/kg)药后(min)30 60 90 120 180生 理 盐 水 3ml 2.16±0.45 2.43±0.54 3.08±1.34 3.08±1.39缺血前(正常值)药前值变化率(100%)3.36± 1.28 3.29± 1.34 3.56± 1.83 115.20±31.77 123.18±32.05 122.24±33.35 134.36±33.62 130.86±39.08 140.79±66.13合 心 爽 5mg 2.56±0.90 2.76±1.22 1.89±1.08 1.55±0.43 1.79±0.58 2.19±1.10 2.52±1.45 106.81±23.43 66.75±12.98＊＊ 60.10±14.91＊＊ 71.70±30.30＊＊ 87.47±45.23 97.23±49.74红花 60mg 1.99±0.81 1.92±0.55 2.09±0.63 1.96±0.72 1.81±0.56 2.16±0.97 2.24±0.87 103.58±33.11 115.44±46.50 108.02±47.01 99.59±39.38 118.03±57.97 119.61±38.17人 参 60mg 2.19±1.04 2.46±1.55 1.90±1.18 2.19±1.13 2.51±1.51 3.53±2.72 3.48±2.69 105.46±27.77 84.43±27.11* 104.47±38.87 121.29±50.48 149.06±40.17 143.67±36.04人 + 红 低15+15mg 2.77±0.94 2.82±1.05 2.24±0.71 2.12±0.65 2.26±1.02 2.39±0.89 2.36±0.89 101.07±19.11 81.30± 9.17* 77.98±14.32* 80.85±18.73＊＊ 88.14±21.94*## 87.11±25.23人 + 红 中30+30mg 2.39±0.87 2.45±1.11 2.31±0.89 2.48±0.93 2.41±0.75 2.59±0.80 2.29±0.62 100.63±21.20 98.30±16.47 105.36±14.49 105.94±23.14 115.49±30.16 103.97±30.46人 + 红 高60+60mg 1.36±0.40 1.42±0.62 1.92±0.76 1.77±0.69 1.66±0.78 1.53±0.79 1.58±0.86 101.06±21.05 147.87±63.02 135.36±49.61 123.37±39.60 116.06±44.11 119.77±53.73

5 讨论

5.1 益气活血中药的质控和标化

中药具有多成分、多途径、多靶点的作用特点。而对于目前益气活血配伍的临床和实验研究已有大量的文献报道，分析发现多采用中药粗提物进行研究，化学成分不明确，质量难以控制，结果重现性差，药理作用与化学成分的相关性研究缺乏，物质基础难以阐明等。本文首先对人参、红花2味药进行提取、精制，将其制成有效部位人参总皂苷和红花总黄酮，再采用多成分含量测定结合指纹图谱整体成分控制的方法，对化学成分进行控制和标化，不仅确保试验样品的重现性，同时也为物质基础与药效的相关性分析提供依据。

表8 各给药组对心肌缺血犬总外周阻力(mmHg/L·min－1)的影响(n=6，±s)

表8 各给药组对心肌缺血犬总外周阻力(mmHg/L·min－1)的影响(n=6，±s)

注:与生理盐水组比较:*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01

组 别 剂量(/kg)药后(min)30 60 90 120 180生理盐水 3ml 8386.7 ± 1810.6 9733.80±3231.2011406.70±3607.8011225.20±3327.8011948.70±4018.4缺血前(正常值)药前值变化率(100%)0 12620.2±4549.50 15132.50±6068.70 114.62 ± 28.90 120.91± 26.55 118.00± 15.56 124.30± 16.67 129.87± 12.10 154.12 ± 27.87合 心 爽 5mg 9365.7 ± 2693.111165.10±3130.00 8705.30±2664.5010680.70±4368.6012939.30±5329.30 11139.10±4860.10 11751.90±5417.90 124.40 ± 43.57 79.35± 17.62＊＊ 92.58± 20.42* 111.86± 23.91 95.68± 19.58＊＊ 103.16 ± 37.15*红 花 60mg 7592.3 ± 779.6 8459.90±1600.70 7861.60±800.30 8309.50±1538.80 8678.30±1628.70 9444.00±2492.80 9116.80±3232.90 112.67 ± 25.35 94.77± 14.05 100.93± 27.25 104.39± 21.99 112.06± 24.33 110.14 ± 40.64人 参 60mg 8696.6 ± 3157.312365.50±6378.6011168.50±4811.1012958.50±5814.5012764.90±5277.80 13143.90±6195.50 14445.80±7406.60 139.79 ± 47.14 96.79± 22.13 114.78± 37.59 115.47± 40.17 118.80± 41.82 128.42 ± 46.35人+红低15+15mg 8047.6 ± 1092.4 8562.60 ±2346.90 8020.20±1364.50 8517.80±1752.00 8923.10±2120.40 9644.90±2770.90 9710.30 ±3090.50 106.50 ± 27.21 97.22± 19.69 104.61± 30.71 110.27± 39.49 117.90± 44.33 118.67 ± 46.99人+红中30+30mg 9081.1 ± 556.8 11799.40 ±2859.90 11356.60±1960.20 11550.70±1749.80 12041.10±1052.40 11160.70±2679.10 11963.30 ±3628.40 130.49 ± 33.26 98.18± 13.92 102.11± 23.41 105.79± 19.50 99.21± 33.38 106.51 ± 41.92*人+红高60+60mg 7928.5 ± 1672.6 9059.20 ±2257.40 9311.50±3436.00 10701.30±4123.90 10658.30±5050.00 11156.80±5035.10 12707.70 ±5563.40 114.56± 20.71 100.08± 21.92 116.22± 28.90 114.51± 38.57 123.15± 41.25 139.12 ± 45.65

5.2 益气活血中药配伍对心肌缺血犬心功能的影响

心肌缺血引起心肌收缩力减弱，射血功能下降，每搏搏出量减少，收缩终末期残存血量增加，射血分数下降，心脏泵功能失常［7］。心肌缺血时只能通过增加冠脉血流量来满足心肌耗氧量的需求［8、9］。

结扎犬冠状动脉造成急性心肌缺血后，人参可明显增加犬冠脉血流量，增加左室内压最大上升速率，降低冠脉阻力，提示人参可明显改善模型动物的冠脉循环，增加心肌血液供给和左室收缩力，而不增加心肌耗氧量，改善心功能，发挥抗心肌缺血作用。

红花可明显增加模型动物的心输出量，增加左室内压最大上升速率，说明红花可降低后负荷及室壁张力，增加左室收缩力和左室作功，不增加心肌耗氧量，改善心功能，发挥抗心肌缺血作用。

人参与红花配伍可明显增加模型动物的冠脉血流量和心输出量，增加左室内压最大上升速率，降低左室舒张末压，降低冠脉阻力和总外周阻力，说明人参与红花配伍通过增加心输出量，从而增加心肌血流量，改善左心的收缩和舒张功能，降低心脏的前后负荷，改善心功能，发挥抗心肌缺血作用。

犬冠状动脉结扎造成急性心肌缺血后，给予益气活血药物，原来单味药的某些药理作用不太明显，通过人参与红花配伍，产生协同增效作用，可以增加冠脉血流量，降低左室舒张末压和总外周阻力。人参与红花配伍应用尤其在增加冠脉血流量、左室内压最大上升速率，降低冠脉阻力上作用明显优于单味药的药理作用。

5.3 问题与展望

实验结果显示，益气药和活血药配对应用具有一定的协同增效作用，但同时对于某些指标协同作用不明显，有时药物作用的时间点上没有一定的规律性。分析原因可能系中药作用具有多成分、多途径、多靶点等特点，多个中药之间发生作用的机理更是复杂而多样，可能与中药之间影响吸收速率，促使吸收加快或减慢、排出迅速或延缓、干扰体内降解过程和在体内的代谢动力学过程的改变等有关。同时与动物的个体差异、动物的样本量、造模手术的刺激以及益气活血中药配伍使用的剂量均有一定关系，因此有必要开展进一步的深入研究，如动物和药物的选择、剂量的摸索、实验方法的优化等，还有大量的工作要做。

［1］邵耕，胡大一主编.现代冠心病［M］.2版.北京:北京大学医学出版社，2006:54-62.

［2］王居新.益气活血汤治疗冠心病心绞痛临床观察［J］.中西医结合心脑血管病杂志，2008，6(4):460-461.

［3］何德英.益气活血化瘀法治疗中老年冠心病心绞痛临床研究［J］.中国中医急症，2008，17(1):8-9.

［4］Han SY，Li HX，Ma Xu，et al.Protective effects of purified safflower extract on myocardial ischemia in vivo and in vitro［J］.Phytomedicine，2009，16(2):694-702.

［5］刘建勋，尚晓泓，王刚，等.通心络胶囊对实验性心肌缺血、心律失常及实验性高脂血症的影响［J］.中国中西医结合杂志，1997，17(7):425-428.

［6］王宇红，杨永华，蔡光先.心宁胶囊对犬心脏血流动力学及心肌耗氧量的影响［J］.四川生理科学杂志，2007，29(1):14-17.

［7］Robert AK.Novel phosphodiesterase type 5 inhibitors:Assessing hemodynamic effects and safety parameters［J］.Clinical Cardiology，2007，27(S1):20-25.

［8］George I，Geddis MS，Lill Z，Myocardial function improved by electromagnetic field induction of stress protein hsp70［J］.Journal of Cellular Physiology，2008，216(3):816-823.

［9］Lee BH，Seo HW，Yoo SF，et al.Differential action of kr-31378，a novel potassium channel activator，on cardioprotective and hemodynamic effects［J］. Drug development research，2001，54:182-190.