药对白术-陈皮挥发油成分GC-MS分析

杨小红 ，罗 琼，胡剑卓 ,陈 文 ，谭 敏

(1.湖南师范大学医学院，湖南 长沙 410006；2.湖南中医药大学附属第二医院,湖南 长沙 410005；3.长沙医学院，湖南 长沙 410219)

白术(Atractylodes Macrocephala Koidz)为菊科植物的干燥根茎，有健脾益气、燥湿利水、止汗安胎之效[1,2]。陈皮(Pericarpium Citri Reticulate)为芸香科植物橘及其栽培变种的干燥成熟果皮。性温味苦，具有理气健脾，燥湿化痰之功效[3,4]。白术、陈皮为补气、燥湿消痰、止泻的常用配伍。白术重于补气，陈皮重在理气，两者相配，补而不滞，理气而不伤气。共奏健脾化湿、行气祛痰、止泻之功效[5]。如异功散，参苓白术散，补中益气汤等经典方剂。白术和陈皮配伍后挥发油的化学成分是否有变化尚未见于报道。为此，本文分别提取组分的挥发油，经GC-MS检测鉴定单味白术、陈皮及二种药材药对挥发油的主要化学成分，探讨单味药和药对挥发油是否存在差异，期望为简化制剂工艺提供有用的基础数据和研究方法。

1 材料与方法

1.1 材料

白术、陈皮 (购于湖南省药材公司)；HP5890/5973GC/MS联用仪(美国)；微型植物试样粉碎机(天津泰斯特仪器有限公司)；电子调温电热套(天津泰斯特仪器有限公司)；醋酸乙酯、乙醇、乙醚(均为分析纯)。

1.2 方法

1.2.1 挥发油的提取

分别取白术和陈皮粉末40 g，加适量水，浸泡1 h，用水蒸气蒸馏法提取，得蒸馏液,取蒸馏液分别用适量乙醚萃取两次。萃取液自然挥干，加入140 mL醋酸乙酯得单味待测液。白术和陈皮的收油率分别为1.12%、1.21%。称取白术粉末40 g和陈皮粉末40 g，混匀，加水没过，同上法提取复方(白术、陈皮)挥发油，得淡黄棕色半固体物质，加入醋酸乙酯，得复方待测液。

1.2.2 挥发油的分析条件

色谱条件：HP-5 MS石英毛细管柱 (0.25mm×30m×0.25μm)；柱前压 30 kPa；分流比 50:1；进样口温度270℃；程序升温：70℃(保持2 min)，以12℃/min的速度升温至150℃(保持5 min)，再以7℃/min的速度升温至230℃(保持5 min)；进样体积1 μL；流速1.0 mL/min；检测器温度:270℃。

图1 白术挥发油的总离子流

图2 陈皮挥发油的总离子流

图3 复方(白术、陈皮)挥发油的总离子流

图4 反-6-乙烯基-4，5，6，7-四氢-3，6-二甲基-5-异丙烯基苯并呋喃的质谱图

质谱条件：电离源EI，离子源温度173℃，检测器温度280℃，扫描范围20～400 amu，扫描间隔0.25 s，电子能量:70 eV。

2 结果

2.1 白术挥发油

白术挥发油GC-MS检测得总离子流图(图1)。用直观推导式演进特征投影 (HELP)法对获得的GC-MS数据进行解析[6]，得到各组分的纯色谱图和质谱图。根据解析所得的纯质谱图，在质谱库中进行相似性检索，对各组分进行定性分析，再利用总体积积分法计算得各组分的定量结果，主要组分的分析结果见表1。

值得指出的是，在色谱图中，有些组分由于信噪比很低或质谱库中没有收录相应的物质而未被检索到或相似度太低，无法进行定性。由于已获得纯物质质谱，对于信噪比较高又感兴趣的组分，可通过质谱理论推断其结构并结合文献资料找到所对应的特征组分，做出大概的判断。在图1中保留时间为18.997 min、16.623 min和17.137 min都有一个色谱峰，经HELP法解析，得到这三个组分的纯质谱图，参见图4、图5、图6。三个组分分别为反-6-乙烯基-4，5，6，7-四氢-3，6-二甲基-5-异丙烯基苯并呋喃(trans-6-ethenyl-4,5,6,7-tetra hydro-3,6-dimethyl-5-isopropenyl-Benzofuran)，巴伦亚烯(Valencene)，γ-榄香烯(γ-Elemene)。

图5 巴伦亚烯的质谱图

2.2 陈皮挥发油

陈皮挥发油GC-MS检测得总离子流图(图2)。同1.2.1法处理，鉴定得两个化合物，分别为右旋柠檬烯(D-Limonene)、γ-松油烯(γ-terpinene)。 化合物的质谱图分别见图7和图8。

图7 右旋柠檬烯的质谱图

图8 γ-松油烯的质谱图

2.3 复方挥发油(白术和陈皮混合后提取所得挥发油)

复方挥发油GC-MS检测得总离子流图 (图3)。同1.2.1法处理,鉴定出五个化合物，分别为反-6-乙烯基-4，5，6，7-四氢-3，6-二甲基-5-异丙烯基苯并呋喃 (trans-6-ethenyl-4,5,6,7-tetra hydro-3,6-dimethyl-5-isopropenyl-Benzofuran)，用A表示，巴伦亚烯(Valencene)用B表示，γ-榄香烯 (γ-Elemene),用C表示，右旋柠檬烯 (DLimonene),用 D 表示，γ-松油烯(γ-terpinene),用E表示。对各组分进行定性分析，再利用总体积积分法计算得各组分的定量结果，部分主要组分的分析结果见表1。

表1 三种挥发油的化学成分及百分含量

3 讨论

药对白术-陈皮挥发油的主要成分与单味提取所得挥发油的总离子流比较，药对挥发油化合物是单味药材挥发油的加和，且以白术挥发油为主要成份，药对主要成分中未发现新的结构类型化合物，由此判断药对化学成分变化属于物理的配伍变化。因此采用共水回流冷凝法提取白术、陈皮挥发油的工艺科学可行。

多次实验表明：当白术和陈皮的重量、粉碎筛网大小、提取过程以及提取温度等都相同时，由于混合过程两种药材在水溶液中的分散度不同，所以提取挥发油的量每次稍有不同，且药对比单味药材提取率低。同时药材的干燥度不同，对挥发油的提取量影响较大。所以挥发油分析图谱在定量比较上意义不大。

据文献报道[7,8]，白术挥发油主要成分为苍术酮。本次实验质谱检测结果主要成分为分子量和苍术酮相同的反-6-乙烯基-4,5,6,7-四氢-3,6-二甲基-5-异丙烯基苯并呋喃。可能原因有待于进一步研究。

共水回流冷凝法属直接蒸馏方法，挥发油的收率较高，但成分也可能发生变化，尤其是复方药物有可能发生化学反应并有新化合物生成,通过GCMS方法测定挥发油成分,利用化学计量学解析法分辨色谱重叠峰,通过质谱库进行定性,用总体积积分法进行定量，本文研究方法可为中药物质基础的研究提供借鉴和参考。

[1]陈文,姜曼花,邱细敏,等.近十年白术研究进展[J].时珍国医国药,2007,18(2):338.

[2]段启,许冬谨,刘传祥,等.白术的研究进展[J].中草药,2008,39(5):25.

[3]严绥平,于蕾,申静伟,等.陈皮挥发油成分的气-质联用分析及药理作用研究进展[J].内蒙古中医药,2007,9(3):57.

[4]杨卫平,王贵英,编著.中药学[M].北京:中医古籍出版社,2002.163.

[5]许济群,王绵之，编著.方剂学[M].上海:上海科学技术出版社,1994.95.

[6]周枝凤,梁逸增,邱细敏,等.白术挥发油成分分析及其色谱指纹图谱研究初探[J].中草药,2004,35(1):54.

[7]张强,李章万.白术挥发油成分的分析[J].华西药学杂志,1997,12(2):119.

[8]刘发宝,曾建国,李文亮,等.超临界CO2萃取法和水蒸气蒸馏法提取陈皮挥发油的比较[J].中南药学2010,8(12):883-886.