痛风宁防治急性痛风性关节炎的实验研究*

姜德友，张晓鑫，解 颖，韩洁茹，李 斗，陈 飞，常佳怡，李富震

（黑龙江中医药大学，哈尔滨 150040）

痛风宁防治急性痛风性关节炎的实验研究*

姜德友，张晓鑫，解 颖，韩洁茹，李 斗，陈 飞，常佳怡，李富震

（黑龙江中医药大学，哈尔滨 150040）

[目的]探讨痛风宁防治大鼠急性痛风性关节炎的作用机制。[方法]将70只大鼠随机分为7组，分别为空白组、模型组、中药对照组、西药对照组、痛风宁高、中、低剂量组，每组10只，采用尿酸钠和氧嗪酸钾诱导大鼠急性痛风性关节炎模型，测定大鼠关节肿胀度和大鼠血清尿酸水平。[结果]痛风宁具有抑制大鼠足肿胀的作用，并能降低大鼠血清尿酸水平。[结论]痛风宁对大鼠急性痛风性关节炎有一定的防治作用，其中痛风宁高、中剂量组作用明显。

急性痛风性关节炎；痛风宁；尿酸；实验研究

痛风是由于嘌呤代谢紊乱，导致血尿酸水平增高和尿酸排泄减少而导致尿酸盐在组织沉积的疾病[1]。随着生活水平的提高，痛风的患病率不断增加，急性痛风性关节炎是痛风最常见的表现形式，目前治疗急性痛风发作的药物主要有非甾体消炎药、秋水仙碱、糖皮质激素等，但其不良反应多[2]，因此中药防治急性痛风性关节炎日益引起关注。姜德友教授总结诸位医家及结合自身多年临床成功经验，认为肾虚是本病发生的始动因素，提出从肾论治急性痛风性关节炎的学术观点，自拟经验方痛风宁。本研究就痛风宁防治急性痛风性关节炎的作用进行实验，为该药的临床应用提供依据，现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物 雄性Wistar大鼠70只，10周龄，体质量（180±20）g，由黑龙江中医药大学实验动物研究中心提供。

1.1.2 实验药物与试剂 痛风宁是姜德友教授经验方（熟地黄、泽泻、山茱萸、怀牛膝、萆薢等），由黑龙江中医药大学附属第一医院制剂科提供，经精加工成含生药0.9g/mL的溶液。痛风舒片由湖北绿金子药业有限责任公司提供，批号110601；秋水仙碱片由西双版纳药业有限责任公司提供，批号20091007；氧嗪酸钾盐由美国Sigma公司生产提供，批号CAS2207-75-2；尿酸钠结晶由美国Sigma公司生产提供，批号CAS1198-77-2；尿酸测定试剂盒由南京建成生物工程研究所提供，批号20101108；吐温80由天津市富宁精细化工有限公司生产提供，批号101020。

1.1.3 实验仪器 UV754紫外分光光度计由上海精密科学仪器有限公司提供；FA1104型电子天平由意大利梅特勒公司提供；恒温水浴箱由上海精宏实验设备有限公司提供；高速台式离心机由科大创新股份有限公司提供。

1.2 实验方法

1.2.1 溶液的制备 痛风宁溶液的制备（煎液过滤浓缩成高、中、低各剂量组间比4∶2∶1，既实际含生药量900、450、225mg/kg）；痛风舒片溶液的制备（将10g痛风舒片溶解于40mL生理盐水中，配置成痛风舒片溶液)；秋水仙碱溶液的制备（将5mg秋水仙碱溶解于50mL生理盐水中，配置成秋水仙碱溶液）；氧嗪酸钾溶液的制备（将3g氧嗪酸钾晶体溶解于97mL生理盐水，加热搅拌，配置成3%氧嗪酸钾溶液）；尿酸钠溶液的制备（将1000mg尿酸钠结晶加9mL生理盐水，再加1mL吐温80，加热搅拌，配置成10mL尿酸钠溶液）。

1.2.2 动物分组 将雄性大鼠70只喂养1周后按随机数字表法随机分为7组：空白组、模型组、中药对照组、西药对照组、痛风宁高、中、低剂量组，每组各10只。均以60 kg人为标准，按照人鼠体表面积-剂量换算法计算大鼠给药剂量，以每100g大鼠体质量灌胃1mL为标准。空白组和模型组分别灌胃生理盐水，中药对照组、西药对照组、痛风宁高剂量组（900mg/kg）、痛风宁中剂量组（450mg/kg）、痛风宁低剂量组（225mg/kg）分别给予痛风舒片溶液、秋水仙碱溶液、痛风宁溶液灌胃，每日1次，连续7d，末次给药后造模。

1.2.3 造模方法[3]除空白组外均采用以下方法造模：用3%氧嗪酸钾溶液进行腹腔内注射，30mL/kg，15min后用6号注射针在大鼠右侧踝关节后侧插入至跟腱内侧，把0.2mL尿酸钠溶液注入到关节腔内。空白组只采用6号注射针在大鼠右侧踝关节后侧插入至跟腱内侧，把0.2mL生理盐水注入到关节腔内。

1.2.4 标本采集方法 各组大鼠于造模前及造模后1、2、4、8、24h测定右踝关节容积，以造模后关节容积-造模前关节容积的差值作为关节肿胀度。各组大鼠24h后处死，心脏取血，4000 r/min，离心15min，取上清液，待测。

1.2.5 统计学分析 采用SPSS18.0软件包进行处理，计量资料采用均数±标准差（±s）表示，正态分布计量资料组间比较采用单因素方差分析，偏态分布计量资料组间比较采用秩和检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 对尿酸钠所致大鼠痛风性关节炎血尿酸水平影响 与空白组比较，模型组大鼠血尿酸值明显升高，说明造模成功。与模型组比较，中药对照组大鼠血尿酸差异无统计学意义（P>0.05），而西药对照组大鼠血尿酸值均明显偏低（P<0.01），痛风宁高、中、低剂量组大鼠血尿酸值均明显偏低（P<0.01），与西药对照组比较，痛风宁高、中、低剂量组大鼠血尿酸值均明显偏低（P<0.01），说明痛风宁高、中、低剂量组可降低实验大鼠血尿酸水平，同样痛风宁高、中、低剂量组之间虽差异无统计学意义，但存在着一定的量效关系趋势，其中痛风宁高、中剂量组作用明显。实验结果见表1。

表1 对尿酸钠导致大鼠痛风性关节炎血尿酸水平的影响（±s）Tab.1 Effect on serum uric acid levels of rats with acute gouty arthritis induced by uric acid sodium（±s）

表1 对尿酸钠导致大鼠痛风性关节炎血尿酸水平的影响（±s）Tab.1 Effect on serum uric acid levels of rats with acute gouty arthritis induced by uric acid sodium（±s）

注：与空白组比较，*P<0.01；与模型组比较，#P>0.01，##P<0.01；与西药对照组比较，▲P<0.01。

组别空白组模型组中药对照组西药对照组痛风宁高剂量组痛风宁中剂量组痛风宁低剂量组n 10101010101010剂量（mg/kg） 血清尿酸值（μmol/L）—105.50±4.32180.57±5.64* 190 174.28±6.79#0.1 165.20±4.96##900 152.58±4.20▲450 163.35±4.05▲225 170.20±4.05▲—

2.2 对大鼠关节肿胀度的影响 与空白组比较，模型组大鼠造模后1～2h关节明显肿胀（P＜0．01），说明造模成功。与模型组比较，中药对照组大鼠关节肿胀度仅有降低趋势，而西药对照组大鼠关节肿胀度均明显降低（P＜0．01）、痛风宁高、中、低剂量组大鼠关节肿胀度均明显降低（P＜0．01），与西药对照组比较，痛风宁高、中、低剂量组大鼠关节肿胀度均明显降低，说明痛风宁高、中、低剂量组对大鼠足肿胀具有抑制作用，痛风宁高、中、低剂量组之间虽差异无统计学意义，但存在着一定的量效关系趋势，其中痛风宁高、中剂量组作用明显。实验结果见表2。

3 讨论

在实验中这种模型可在一定程度上评价药物对急性痛风性关节炎的疗效，能观察药物对血尿酸水平影响这一核心环节，能在大鼠关节肿胀度方面的指标检测结果中更为明显，能用于药物作用机制的研究，符合人体急性痛风性关节炎的发病机制与临床表现。

表2 对大鼠关节肿胀度的影响（±s）Tab.2 Effect on joint swelling of rats（±s）

表2 对大鼠关节肿胀度的影响（±s）Tab.2 Effect on joint swelling of rats（±s）

注：与空白组比较，*P<0.01；与模型组比较，#P<0.01。

肿胀度（mL）1h 2h 4h 8h 24h空白组 10 0.04±0.03 0.09±0.03 0.06±0.03 0.05±0.12 0.02±0.01模型组 10 — 0.55±0.05* 0.70±0.08 0.60±0.40 0.45±0.05 0.33±0.05中药对照组 10 190 0.40±0.05 0.69±0.05 0.55±0.06 0.45±0.06 0.32±0.03西药对照组 10 0.1 0.38±0.05# 0.45±0.05# 0.44±0.05# 0.38±0.05# 0.26±0.05#痛风宁高剂量组 10 900 0.36±0.05# 0.44±0.05# 0.40±0.05# 0.35±0.05# 0.20±0.04#痛风宁中剂量组 10 450 0.37±0.05# 0.43±0.05# 0.42±0.05# 0.37±0.05# 0.25±0.05#痛风宁低剂量组 10 225 0.39±0.05# 0.50±0.05# 0.48±0.05# 0.41±0.05# 0.30±0.05#组别 n 剂量（mg/kg）—

笔者认为急性痛风性关节炎的病因病机是以肾虚为本，水湿、痰湿、湿浊、浊毒闭阻经脉，气血运行失畅痹阻关节，乃本虚标实之证，自拟经验方痛风宁。本研究实验结果表明，痛风宁能明显抑制尿酸钠所致大鼠足肿胀，并能显著降低尿酸钠所致急性痛风性关节炎大鼠的血尿酸，因而对急性痛风性关节炎具有良好的防治作用，同时丰富中医药对急性痛风性关节炎的防治理论。

[1]粟胜勇，黄锦军，雷龙鸣，等.“通法”推拿对急性痛风性关节炎大鼠外周疼痛介质的影响[J].四川中医，2010，28（9）：19-20.

[2]吕 婧，苗志敏，阎胜利，等.穿山龙治疗急性痛风性关节炎的效果[J].青岛大学医学院学报，2009，45（4）：389－391.

[3]韩洁茹，谢 颖.补肾利湿法防治痛风性关节炎的实验研究[J].四川中医，2011，29（4）：26－28．

Experiment study of Tongfengning in preventing and curing acute gouty arthritis

JIANG De-you,ZHANG Xiao-Xin,XIE Ying,HAN Jie-ru,LI Dou,CHEN Fei,CHANG Jia-yi,LI Fu-zhen
（Heilongjiang University of TCM,Heilongjiang Harbin 150040,China）

[Objective]To explore the mechanism of the preventing and curing effect of Tongfengning on acute gouty arthritis in rats.[Methods]The 70 rats were randomly divided into seven groups:the blank group,the model group,traditional Chinese medicine control group,Western medicine control group,Tongfengning high,medium and low doses groups,with 10 rats in each group.The uric acid sodium and oxygen polybenzoxazines potassium were used to induce acute gouty arthritis in rats.The joint swelling degree and serum uric acid levels in rats were determined.[Results]Tongfengning could inhibit foot swelling,reduce serum uric acid levels.[Conclusion]Tongfengning has certain preventive and therapeutic effect on acute gouty arthritis in rats.The effect of Tongfengning high dose and medium dose group is more obvious.

acute gouty arthritis;Tongfengning;uric acid;experimental study

R255.6

A

1672-1519（2012）04-0372-03

2012-05-04）

国家自然科学基金项目（81173170），黑龙江中医药大学校基金项目（201107）。

姜德友（1960-），男，博士，教授，博士生导师，博士后合作导师，基础医学院院长，研究方向为经方治疗内科疑难杂病临床与基础研究。