王军 于灵
对精液质量进行分析,是评价和检测男性的生育功能重要的检测项目,以前临床实验室多应用经典精液分析的方法。伴随计算机技术应用,计算机辅助精子质量的分析:图像处理技术和计算技术在精子质量的检测、观察,及对精子静 (动)态图像的分析,为临床精子质量的各项检测项目提供准确的数据。本文对计算机辅助精子质量分析[1]:检测系统对就诊患者的精液标本进行计算机辅助精液分析(CASA)的同时使用常规精液分析方法(SRA)分析,现将结果报告如下。
表1 CASA重复性测定的统计学分析
表2 CASA与人工检测主要参数的相关性
1.1 材料
精液标本均来自2011年8月~2011年11月行精液常规检查的患者。嘱患者禁欲3d~5d,用手淫方法取精,36.5℃~37℃孵育30min,液化后检测。计算机辅助精子质量分析与常规精液分析的对比性研究。
1.2 方法
SRA将整份的标本液化,按WHO所规定的方法和标准检测分析,详细的记录精子活率、活力及密度。为降低误差,CASA和SRA由一名检验师操作,检测进行前,可先进行演习试验,以达到操作过程规范。CASA在整份精液标本中取10μl的样品放置Macro子计数板上,将盖玻片盖好,将精子计数及精液标本的环境温度保持在36.5℃~37℃。一个精液样本在×100倍放大,×250倍放大的显微镜下进行6次检测,以证明系统重复性。记录精子活率、活力和密度,如精子畸形率、精子动态运动指标、圆细胞数量及一般特点。反复性分析及放大不同倍数检测的数据一致性,采用独立样本t检验。人工精液分析各项指标和CASA对比t检验相关性分析。
2.1 CASA的一致性和重复性分析,一个标本反复6次检测, 精子活率、活力和密度等指标的差异都很小,×100倍放大,×250倍放大显微镜下检测数据无显著性差异(P>0.05),显示该检测系统有良好可重复性,放大倍数不同但一致性较好。详细见表1。
2.2 人工检测和CASA的相关性,进行彩色精子检测系统,进行检测精子活率、密度及a+b级的精子与人工精液的分析结果存在很大的相关性,r均>0.9。详细见表2。
对精液进行分析是生殖医学、计划生育、男子不育等临床诊疗及医学研究工作中很重要的检查项目。人工精液分析方法具有直观、检测面广等优点,最大不足是易受检测操作者的主观影响,同一人的反复精液检测结果差异很大,排除患者自身原因,操作者的主观影响很大。特别是精子活率和活力的统计大部分根据检查者的主观理论及经验来判断,判断的准确性直接影响到诊疗的方向及科研工作成果的准确性。精子质量分析仪特点为客观、易操作、快速、自动打印、简便的优点,可比性强,重复性好,降低了人工检测误差,为科研和临床提供了规范化、标准化和科学化的有利条件。
CASA技术避免了SRA的主观影响因素,不但可以快速检测精子活率、活力和密度等参数,还可显示运动轨迹,分析精子运动有关的数据。在保证规范操作的基础上,CASA对精子的密度检测结果是准确的。在行计算机辅助精液分析时计算机采集图像检测数据(范围)为正常精液,所以对少、弱精子进行自动分析,参数设置有误差,检测数据就有差异。CASA系统对精子识别时,应将阈值及灰度设置可全部采集精子而不进行卵+磷脂小体采集等非精子成份物质,这样图像上就可准确看到被分割来的精子,系统标记精液的非精子物质,例如各类圆胞等,要精确统计,在圆细胞数显示一栏输入,更好计算分析时取舍。检测精子活力时,CASA可克服其自身的缺陷。判断精子的活率时,应进行肉眼观察,不能仅靠CASA。在精液CASA检测时,可重点发挥精子动态运动数据检测上的特点。使用两种方法,对精液全面的统计分析,可为临床提供准确的依据。
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