不同方法学检测乙型肝炎血清标志物结果评价

卢桂香

乙型肝炎在我国有很高的发病率，乙型肝炎血清标志物的检查是诊断该病的主要手段。传统的检测方法为酶联免疫吸附试验（ELISA），近年来时间分辨免疫荧光法（TRFIA）和电化学发光法（ECLIA）的应用也越来越多[1]。笔者采用3种方法对乙型肝炎血清标志物进行检测，比较3种方法的检测灵敏度及精神度，现将结果总结报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

90例病例均为我院2011年1月～2011年12月采用采用电化学发光法（ECLIA）证实的乙型肝炎病毒（HBV）感染患者，所有患者均符合乙型肝炎的诊断标准，其中男性患者61例，女性患者29例；年龄18～55岁。同时选取45例体检健康者的血清。

1.2 仪器试剂

ELISA检测使用安图生物公司PHOMO酶标仪，试剂盒由珠海丽珠生物公司提供；TRFIA检测使用上海新波生物技术公司生产的ANYTEST时间分辨免疫荧光分析仪，试剂盒由上海新波生物提供；ECLIA检测使用德国LIAISON电化学发光免疫分析仪及配套的试剂。

1.3 结果判定

根据试剂盒中的说明书中给出的Cut-off值对检测结果进行判断。患者血液经夹心法检测，检测结果＞Cut-off值为阳性，经竞争法检测，检测结果＜Cut-off值为阳。

1.4 统计学方法

采用SPSS17.0软件进行数据的统计与分析，检测结果的一致性使用Kappa检验，抽样误差的影响通过μ检验进行排除。检测结果一致性的程度分为6个区段：极强，Kappa系数0.81-1.0；高度，Kappa系数0.61～0.8；中度，Kappa系数0.41～0.6；弱，Kappa系数0.21～0.4；微弱，0～0.2；极差，Kappa系数＜0。

2 结果

2.1 ELISA与ECLIA方法检测结果比较

所有患者的血清中的乙型肝炎标志物采用ELISA与ECLIA方法检测的结果比较见表1。

2.2 TRFIA与ECLIA方法检测结果比较

所有患者的血清中的乙型肝炎标志物采用TRFIA与ECLIA方法检测的结果比较见表2。

表1 ELISA与ECLIA方法检测乙型肝炎标志物的结果比较

3 讨论

目前，全球的乙型肝炎病毒携带者据报道有将近3亿人，而我国的乙型肝炎病毒携带者大约有1.3亿[2]，是世界上的乙肝高发国。乙型肝炎血清标志物是乙肝患者的临床诊断标准，其检测方法是临床技术人员一直以来高度重视的方面。其最早的检测方法为免疫扩散试验、对流免疫电泳试验等，目前比较常用的检测方法为酶联免疫吸附试验、电化学发光法、时间分辨免疫荧光法、聚合酶链反应(PCR)检测以及更高级的免疫PCR检测方法等[3]。其中电化学发光法是目前临床上敏感性及特异性均最好的检测方法。本组研究中，以电化学发光法作为参考方法，而酶联免疫吸附试验及时间分辨免疫荧光法的检测与之进行比较。

从本组研究结果可以得出，目前使用最多的酶联免疫吸附试验与电化学发光法在HBeAG的检测上具有极强的一致性，而其余四项的检测为高度一致性。说明酶联免疫吸附试验一直具有很好的特异性。但其敏感性仍有略微的不足[4]。本组研究显示，时间分辨免疫荧光法和电化学发光法在HBsAg、HBeAg、抗HBe、抗HBc的检测上具有极强的一致性，而在抗HBs的检测上具有高度一致性。但在检测健康者血清时反应出时间分辨免疫荧光法的特异并不是十分理想。但目前时间分辨免疫荧光法的试剂已经国产化，从而大大的降低了试验的成本，在一定情况下可以替代进口的试剂[5]。

综上所述，目前实验室中所使用的血清乙型肝炎标志物的检测方法具有较高的一致性，可以用于实验室之间的相互确认试验。

[1]陈佑明,黄敬,熊符,等.时间分辨荧光免疫分析法和免疫放射分析法检测HBsAg的对比分析[J].标记免疫分析与临床,2006,13(1):50-51.

[2]毛一雷，杜顺达.进一步完善原发性肝癌的术前评估体系[J].中华外科杂志，2010，48（20）：1530-1533.

[3]奚锦芳.86名临床检验人员HBV血清标志物结果分析[J].当代医学,2010,16(15):88-89.

[4]刘伶.乙型肝炎病毒(HBV)荧光定量检测与免疫学标志物检测的比较与分析[J].当代医学,2009,15(16):61-62.

[5]赵秀英,陈俊梅,辛永梅,等.不同方法检测乙型肝炎病毒血清标志物的差异[J].肝脏,2008,13(4):303-305.