严 珂 ,周细根 ,罗 勇 ,梁生林
(1.吉安市妇幼保健院药剂室;2.井冈山大学医学院药理学教研室;3.井冈山大学医学院2009级药学本科班,江西 吉安 343000)
龙葵为茄科属植物龙葵的全草,性寒﹑味苦﹑有小毒,具有清热解毒﹑利水消肿等功效[1]。现代药理研究表明,龙葵全草含多种甾体生物碱,包括澳洲茄边碱、澳洲茄碱等[2],具有抗肿瘤[3-4]、抗菌[5-6]、保肾[7]、保肝[8]、提高免疫功能[9]、祛痰止咳[10]等作用。但龙葵的镇痛作用少有报道。本研究探讨龙葵水煎剂腹腔注射对小鼠热板法致痛的镇痛作用,旨在为进一步开发利用龙葵提供实验依据。
1)动物:昆明种小鼠,体质量(22±2)g,雌性,由井冈山大学医学实验动物中心提供。
2)药品与试剂:哌替啶注射液(宜昌人福药业有限责任公司,规格:2 mL:100 mg,批号:021003),龙葵(2010年11月采于江西吉安,经井冈山大学医学院药学系彭才圣副教授鉴定为茄科属植物龙葵),生理盐水。
3)主要仪器:HSS-1B型恒温浴槽(成都仪器厂生产),天平,秒表,注射器等。
1)龙葵水煎剂的制备:取切成小段的干燥龙葵50 g,用蒸馏水浸泡30 min,加10倍量蒸馏水(第一次多加2倍量)用文火煎煮3次,每次0.5 h,合并3次煎出液,静置过滤去渣,浓缩为50 mL备用(即生药质量浓度为1 g·mL-1,并以此作为高剂量组的给药浓度,再用蒸馏水配制中剂量组的给药浓度0.75 g·mL-1和低剂量组的给药浓度 0.5 g·mL-1)。
2)哌替啶溶液的制备:用蒸馏水将哌替啶注射液配成 0.002 5 g·mL-1。
3)实验仪器的设定:将HSS-1B型恒温浴槽中的水槽盖取掉,往水槽中加水至以放入镇痛槽后水不溢出为准;镇痛槽放入恒温浴槽后用支承板上左右两侧的螺套和压紧板压住镇痛槽;将水槽的出水及回水口用一根橡胶管连通;开启电源开关;在电源接通的状态下,将设定钮子开关置于“设定”后,调节温度调节旋钮,直到显示器显示出所需要的55℃,设定完成后将设定钮子开关置于“液温”,仪器显示温度逐渐达到设定值,直至稳定显示槽内实际液温(55±0.1)℃[11-12]。
4)实验动物的筛选与分组:将小鼠置于(55±0.1)℃镇痛槽内,以舔后爪出现时间作为痛阈的指标。当出现舔后爪时,立即记录时间(即痛阈值),然后取出小鼠。用此法筛选出痛阈值在5~30 s的雌性小鼠60只供实验用。将筛选好的60只小鼠,按随机数字表法分为5组,每组12只,即生理盐水对照组,哌替啶溶液组,高、中、低剂量龙葵水煎剂组。
5)给药与痛阈测定方法:生理盐水对照组给予生理盐水,哌替啶溶液组给予0.002 5 g·mL-1的哌替啶溶液,龙葵水煎剂高、中、低剂量组分别给予1﹑0.75﹑0.5 g·mL-1的龙葵水煎剂,均腹腔注射给药,给药量均为 0.1 mL·(10 g)-1。 于给药前及用药后 15、30、60 min测量各组小鼠痛阈值,如果用药后放入镇痛槽内60 s仍无反应,即将小鼠取出,其痛阈值按60 s计算。
应用SPSS 11.0统计软件进行统计学处理。计量资料用±s表示,组间﹑组内比较采用t检验。以P<0.05为差异有统计学意义。
各组给药前痛阈值比较差异均无统计学意义(P>0.05),哌替啶溶液组及高、中、低剂量龙葵水煎剂组给药后15、30、60 min与生理盐水对照组相同时点比较差异均有统计学意义(P<0.01)。给药后15、30、60 min与自身给药前比较:生理盐水对照组差异无统计学意义(P>0.05),其余各组差异均有统计学意义(P<0.01)。见表1。
表1 各组给药前后痛阈值比较 ±s,t/s
表1 各组给药前后痛阈值比较 ±s,t/s
*P<0.01与生理盐水对照组比较;△P<0.01与自身给药前比较。
给药后15 min 30 min 60 min生理盐水对照组 12 17.48±3.57 17.44±5.97 17.12±4.30 17.88±4.38哌替啶溶液组 12 17.64±3.54 46.75±7.15*△ 38.62±6.64*△ 33.42±4.63*△龙葵水煎剂高剂量组 12 17.67±3.30 52.18±8.17*△ 52.74±7.56*△ 48.36±6.36*△龙葵水煎剂中剂量组 12 17.53±2.36 35.67±5.01*△ 43.68±4.45*△ 47.12±6.88*△龙葵水煎剂低剂量组 12 17.60±3.00 28.11±6.32*△ 30.33±4.41*△ 29.30±5.58*△组 别 n 给药前
龙葵具有清热解毒,利水消肿等功效。现代药理研究[3-10]表明,龙葵具有抗肿瘤、抗菌、保肾、保肝、提高免疫功能、祛痰止咳等作用。龙葵目前以民间应用为主,主要用于治疗感冒发热,牙痛,痢疾,泌尿系感染,乳腺炎,白带,癌症;外用治痈疖疔疮,蛇咬伤等。
为探讨龙葵是否具有镇痛作用,本实验采用热板法疼痛模型对龙葵水煎剂进行了镇痛作用的初步研究,实验结果显示,各剂量龙葵水煎剂明显提高热板法所致小鼠的痛阈值,与生理盐水对照组比较和自身给药前比较差异均有统计学意义,表明龙葵水煎剂具有明显的镇痛作用,为其进一步研究提供了初步的实验依据。其镇痛有效成份及作用机制有待于进一步研究。
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