VEGF-D和VEGFR-3在胃癌淋巴转移中的表达

朱朝勇 (青海红十字医院肿瘤内科，青海 西宁 810000)

胃癌患者淋巴转移直接影响患者预后，也是引起患者死亡的主要因素。其中血管内皮生长因子-D(VEGF-D)是特异性淋巴管生成因子，与肿瘤淋巴转移关系较为紧密。VEGF受体-3(VEGFR-3)特异存在于淋巴管内皮细胞，临床中常用于标记淋巴管，以更好观察新生淋巴管情况用于淋巴管计数〔1〕。VEGF-D常与VEGFR-3结合，诱导毛细淋巴管生长，引起肿瘤中淋巴管增殖，发生淋巴结转移〔2〕。本文分析 VEGF-D和VEGFR-3与肿瘤转移的关系，旨在探索胃癌淋巴转移机制。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择我院2010年4月至2012年4月收治的60例胃癌患者手术切除标本，其中男32例，女28例，年龄25～84〔平均(52.3±2.4)〕岁，所有患者均确诊为胃腺癌，其中45例患者有不典型增生，所有患者术前均未给予其他治疗。胃癌和黏膜组织均术中切除后立即取材，置于－80℃液氮中保存，将病灶和淋巴结行苏木精-伊红(HE)染色病理检查，并进行TNM分期。

1.2 检测方法 分别取癌灶、癌旁、正常黏膜组织(同一患者的正常黏膜组织，距癌灶周边至少5 cm)和部分胃癌标本，采用ELISA试剂盒检测VEGF-D和VEGFR-3，严格按照说明书操作。胃癌组织的VEGF-D和VEGFR-3检测值以绝对表达水平为主，其中肿瘤与正常黏膜组织检测比值为相对比值(T/N)。

1.3 结果判定 VEGF-D和VEGFR-3阳性物质呈棕黄色细颗粒状，淋巴管内皮细胞VEGFR-3染色阳性呈棕黄色。

1.4 统计学方法 应用SPSS17.0统计软件进行分析，计量资料采用±s表示，计数资料使用组间的χ2检验。

2 结果

2.1 VEGF-D和VEGFR-3在胃癌组织和正常黏膜组织中的表达 VEGF-D在胃癌组织中表达低于正常胃黏膜组织，VEGFR-3在胃癌组织中的表达明显高于正常黏膜组织(P＜0.05)。见表1。

表1 VEGF-D和VEGFR-3在胃癌组织和正常黏膜组织中的表达(±s，pg/ml，n=60)

表1 VEGF-D和VEGFR-3在胃癌组织和正常黏膜组织中的表达(±s，pg/ml，n=60)

与胃癌组织比较:1)P＜0.05

组别VEGF-D VEGFR-3胃癌组织190.5±22.5 2 421.8±157.6正常黏膜组织 234.6±26.71) 1 872.2±244.81)

2.2 VEGF-D和VEGFR-3表达与胃癌淋巴转移表达的关系VEGF-D在胃癌组织中的表达水平，与患者的组织学类型、TNM分期、淋巴结转移、淋巴结分期、转移淋巴结数有关，与肿瘤大小、年龄、浸润深度无密切关联。VEGFR-3在胃癌组织中表达，与组织学类型、淋巴结分期、TNM分期、淋巴结转移有关，与其他无密切关联性。见表2。

表2 VEGF-D和VEGFR-3水平与胃癌淋巴转移的关系(±s，pg/ml)

表2 VEGF-D和VEGFR-3水平与胃癌淋巴转移的关系(±s，pg/ml)

病理 n VEGF-D VEGF-D≤1＞1VEGFR-3VEGFR-3(T/N)≤1 ＞1肿瘤大小(cm)＜5 37 188.2±28.6 23 14 2 147.7±157.6 18 19≥5 23 264.8±26.9 9 14 2 879.3±245.2 10 13组织学类型分化型 15 112.5±27.4 12 3 1 865.8±754.3 9 6未分化型 45 274.3±35.6 23 24 2 874.2±354.7 22 23年龄(岁)＜65 35 345.8±59.6 19 16 2 365.6±542.3 20 15≥65 25 198.2±54.7 14 11 2 478.8±456.2 10 15浸润深度T1～T2 10 271.5±84.6 8 2 2 305.6±536.7 5 5 T3～T4 50 223.4±49.7 30 20 2 673.5±456.6 27 23淋巴结分期N0 22 173.6±26.7 18 4 1 924.6±337.8 18 4 N1 16 187.4±35.9 9 7 2 438.7±443.7 4 12 N2 22 208.9±23.8 6 16 2 965.7±358.9 5 17转移淋巴结数0枚 19 183.5±42.7 15 4 1 965.5±257.9 15 4 1～6枚 17 219.3±39.7 8 9 2 732.9±453.3 5 12≥7枚 24 245.5±37.9 9 15 2 624.9±257.6 8 16 TNM分期Ⅰ+Ⅱ 21 147.6±45.9 17 4 1 687.6±249.6 17 4Ⅲ+Ⅳ 39 284.6±33.7 17 22 2 789.3±358.4 9 30淋巴结转移无 22 186.3±45.4 18 4 1 886.4±423.7 18 4有 38 253.4±38.5 18 20 2 745.6±386.4 13 25 VEGFR-3≤1 33 29 4＞1 27 5 22

3 讨论

胃癌常通过淋巴转移，肿瘤细胞能直接浸润病灶周围组织，通过对淋巴结转移进行有效评估，有利于制定治疗方案，改善预后〔3〕。研究发现，胃癌组织存在大量新生淋巴管、微淋巴管等淋巴组织，肿瘤组织生长过度会破坏淋巴管结构，挤压淋巴管，使淋巴管数目减少，引起管腔变窄〔4〕。

VEGFR-3是第一个被验证为毛细淋巴管内皮细胞特异性的标志物，VEGFR-3失活后，阳性淋巴管会扩大肿瘤周围淋巴管，导致肿瘤淋巴管转移〔5〕。VEGFR-3在胃癌早期存在于人体组织和淋巴管内皮细胞，晚期存在于淋巴管中，在早期血管生成过程中的作用较明显;VEGFR-3血管表达逐渐减少后，仅在淋巴皮内皮细胞表达。VEGFR-3是 VEGF-D的受体，受VEGF-D的诱导，因此利用VEGFR-3标注淋巴管有利于探究淋巴转移的分子机制〔6〕。通过VEGFR-3定位淋巴管的特异性，通过观察淋巴管组织学类型、TNM分期、浓度梯度，有利于进一步确定胃癌淋巴转移中的表达。本文研究中，VEGFR-3在胃癌组织中表达与患者组织学类型、淋巴结分期、TNM分期、淋巴结转移有关，与其他无密切关联性。

VEGF-D可以与内皮细胞受体VEGFR-3结合，刺激内皮细胞增殖，引起微淋巴管增生，加速肿瘤细胞转移，常诱导肿瘤内形成淋巴管，播散淋巴结〔7〕。本文研究中，VEGF-D在胃癌组织中表达低于正常胃黏膜，表明VEGF-D对胃癌发展起着重要作用，VEGF-D会通过诱导淋巴管生成参与肿瘤发展变化。VEGF-D阳性表达的胃癌组织中，会刺激胃癌组织淋巴生成〔8〕。同时，VEGF-D与患者的组织学类型、TNM分期、淋巴结转移、淋巴结分期、转移淋巴结数有关，与肿瘤大小、年龄、浸润深度无关，表明VEGF-D高表达增强了癌细胞转移的特性〔9，10〕。

VEGFR-3与配体VEGF-D结合，诱导内皮细胞增殖，对新生淋巴管内皮细胞及血管调控起着调节作用。本文研究表明VEGF-D阳性胃癌组织中，受体VEGFR-3的表达也较高，表明VEGF-D高表达与肿瘤淋巴转移关系密切。同时，VEGF-D又促进激活淋巴管内皮细胞VEGFR-3受体，导致淋巴管增生，增大内皮细胞间的缝隙，使肿瘤细胞进入淋巴管。VEGF-D激活VEGFR-3受体，从而导致胃癌组织淋巴管增生，引起肿瘤细胞通过淋巴管扩散，诱发淋巴结转移。

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