PTEN和survivin在卵巢上皮性肿瘤中的表达水平及临床意义

张国梅 (郑州市中心医院妇产科，河南 郑州 450007)

卵巢上皮性肿瘤是女性常见的生殖系统恶性肿瘤之一，死亡率在女性恶性肿瘤中最高。其发生发展是个复杂的过程，多种蛋白和相关因子在其中起重要作用。生存素(survivin)是凋亡蛋白抑制因子家族成员之一，与多种恶性肿瘤的发生发展过程有密切关系〔1〕。有研究发现，同源性磷酸酶张力蛋白(PTEN)是一个多种肿瘤及癌前病变中容易发生突变或缺失的抑癌基因，与肿瘤密切相关〔2〕。本文旨在探讨PTEN和survivin在卵巢上皮性肿瘤中的表达水平及临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2007年1月至2010年1月我院手术切除的卵巢上皮性肿瘤110例，其中良性肿瘤38例，恶性肿瘤72例，另收集癌旁正常卵巢组织20例作为对照组。患者年龄34～62〔平均(57.4±89.71)〕岁。手术切除的卵巢上皮性恶性肿瘤标本全部经病理医生确诊，根据国际妇产科联盟(FIGO，2000年)制定的标准进行病理分期:Ⅰ期10例、Ⅱ15例、Ⅲ期21例、Ⅳ期26例;根据WHO分类标准进行组织学分型:浆液型42例，黏液型20例，透明细胞癌4例，子宫内膜样癌6例;病理分级:高分化18例，中分化26例，低分化28例。淋巴结转移30例，无淋巴结转移42例。所有患者临床资料保存完整，术前未经放、化疗治疗。

1.2 方法 石蜡包埋组织切片采用SABC免疫组化法(武汉博士德)进行PTEN和survivin检测(Abcam)，其中空白对照采用磷酸盐缓冲液(PBS)置换一抗，阳性对照采用已知阳性标本。PTEN以胞质或胞核出现棕色颗粒为阳性;survivin以胞质或胞膜出现棕色颗粒为阳性。在高倍镜下(×200)每张切片随机选取5个视野，计数视野中阳性细胞数和肿瘤细胞的总细胞数，阳性细胞数占总细胞数比例＜1%为阴性，1% ～10%为弱阳性，11%～50%为中度阳性，＞50%为强阳性，其中弱阳性、中度阳性和强阳性视为阳性表达。

1.3 统计学方法 应用SPSS13.0统计软件进行分析，计数资料采用χ2检验。相关性用配对资料的关联分析，用Pearson列联系数表示。

2 结果

2.1 PTEN和survivin蛋白在正常卵巢、良性肿瘤及恶性肿瘤的表达比较 PTEN在正常卵巢、良性肿瘤及恶性肿瘤组织的阳性表达分别为 20例(100%)、35例(92.1%)、28例(38.9%)，PTEN在恶性肿瘤组织的阳性表达明显低于正常卵巢和良性肿瘤组织(P＜0.01)，在正常卵巢和良性肿瘤组织的表达差异无统计学意义(P＞0.05)。survivin在正常卵巢、良性肿瘤及恶性肿瘤组织的阳性表达分别为0、1例(2.6%)、48例(66.7%)，survivin在恶性肿瘤的阳性表达明显高于正常卵巢和良性肿瘤组织(P＜0.01)，在正常卵巢和良性肿瘤组织的表达差异无统计学意义(P＞0.05)。

2.2 卵巢上皮性恶性肿瘤不同临床病理特征与PTEN和survivin蛋白表达的关系 PTEN在卵巢上皮性恶性肿瘤的阳性表达率与FIGO分期、病理分级正相关(P＜0.05，P＜0.01)，与组织分型以及淋巴结转移无关(P＞0.05)。survivin在卵巢上皮性恶性肿瘤的阳性表达率与FIGO分期、病理分级、淋巴结转移正相关(P＜0.05，P＜0.01)，与组织分型无关(P＞0.05)。见表1。

表1 卵巢上皮性恶性肿瘤不同临床病理特征与PTEN和survivin蛋白表达的关系〔n(%)〕

2.3 PTEN和survivin蛋白在恶性肿瘤表达的相关性 在恶性肿瘤组织中，PTEN和survivin双阳性表达10例，双阴性表达10例，仅PTEN阳性18例，仅survivin阳性34例，PTEN和survivin蛋白在恶性肿瘤表达负相关(r=－0.415 6，P=0.000 4)。

3 讨论

PTEN基因是抑癌基因，由多功能磷酸酶编码，作为磷酸酶在胞质信号传递中起着复杂和重要的作用，在多种肿瘤及癌前病变中容易发生突变或缺失，主要参与细胞生长调节，具有诱导肿瘤细胞凋亡以及抑制肿瘤细胞生长、侵袭转移等功能〔3〕。有研究发现，PTEN蛋白低表达参与前列腺癌、子宫内膜癌等多种恶性肿瘤的演进过程〔4〕。本研究发现，PTEN蛋白在卵巢上皮性恶性肿瘤中阳性表达水平明显低于良性卵巢肿瘤和正常卵巢组织，PTEN在卵巢上皮性恶性肿瘤的阳性表达率与FIGO分期、病理分级正相关，提示PTEN失活在卵巢癌极为常见，在控制卵巢癌发生发展过程负性调控中起一定作用。因此，它可能与卵巢癌的演进有密切关系。

研究发现，survivin基因是作用最强的凋亡抑制基因，在正常成熟的器官、组织、细胞中测不到survivin的表达，选择性表达于常见的恶性肿瘤和胚胎组织中，如乳腺癌、结肠癌、肺癌、前列腺癌、卵巢癌、黑色素瘤、白血病、肾癌、淋巴瘤等，与肿瘤的恶性程度、侵袭性、预后及肿瘤的耐药作用有关。其生物学功能主要包括参与细胞周期的调控、抑制细胞凋亡和参与血管形成，参与肿瘤发生和发展的作用机制。本文发现，survivin在正常卵巢组织和卵巢良性上皮性肿瘤组织中基本无表达，在恶性上皮性肿瘤组织阳性表达率明显升高，而且survivin在卵巢上皮性恶性肿瘤的阳性表达率与FIGO分期、病理分级、淋巴结转移正相关，提示survivin基因可能通过抑制卵巢癌细胞凋亡而对卵巢癌的发生发展、转移起重要作用〔5〕。

通过相关分析发现，PTEN和survivin蛋白在恶性肿瘤的表达负相关，可能因为是PTEN基因失活，失去磷酸酶的作用，使得survivin蛋白维持34位点苏氨酸的磷酸化，从而抑制细胞凋亡，促进卵巢癌的发生〔6〕。提示survivin基因的表达与PTEN基因的失活在卵巢癌的发生中有协同作用。同时，在卵巢癌中出现PTEN阳性和survivin阳性共表达现象，提示在卵巢癌的发生过程中可能有其他分子生物学机制参与，有待进一步研究。因此，联合检测PTEN和survivin蛋白表达对于评价卵巢癌的恶性程度、转移和预后具有重要临床价值。

1 耿海燕，邵淑丽.Survivin和p53蛋白在卵巢上皮性肿瘤中的表达、相关性及意义〔J〕.中国现代药物应用，2010;4(3):8-9.

2 Ang S，Chen H，Hirota K，et al.Disruption of oxygen homeostasis underlies congenital Chuvash polythemia〔J〕.Nat Geney，2002;32(4):614-21.

3 李锁严，杨薇薇，温秋婷，等.上皮性卵巢癌中PTEN和HIF-1的表达及其相关性〔J〕.临床与实验病理学杂志，2009;25(4):361-3.

4 Waite KA，Eng C.Proteain PTEN:form and function〔J〕.AmJ Hum Genet，2002;70(4):829-44.

5 Sui L，Dong Y，Ohno M，et al.Survivin expression and its correlation with cell proliferation and prognosis in epithelial ovarian tumors〔J〕.Int J Oncol，2002;21(2):315-20.

6 朱巧英，沈宇飞，胡建铭，等.卵巢上皮性肿瘤中PTEN和survivin的表达及意义〔J〕.实用医学杂志，2009;25(18):3009-10.