107株凝固酶阴性葡萄球菌耐药性分析

熊祝嘉，李小瑛，段志玲，李 玮

煤炭总医院检验科，北京 100028

凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）是人体皮肤黏膜的正常菌群，由于机体免疫功能的下降以及侵入性操作的增加，CNS在临床上导致的感染日益增加。随着近年来抗生素的广泛使用，耐甲氧西林的凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）大量出现，给临床的治疗带来挑战。本研究回顾性分析2010年6月～2011年5月在我院临床送检标本中分离出的107株CNS，旨在为其临床的诊断和治疗提供实验室依据，促进合理使用抗生素，延缓耐药株的出现。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2010年6月～2011年5月从我院临床送检的痰、血液、中段尿、伤口分泌物、胸腹水和穿刺液中分离出的CNS，剔除同一患者相同部位的菌株，共107株。

1.2 方法

1.2.1 菌株分离及药物敏感试验 采用MicroScan Walkaway-40全自动微生物分析仪进行菌种鉴定和药敏试验。药敏结果采用WHONET 5.4软件进行统计分析。按照CLSI（2010年版）规定的折点判定耐药、中介和敏感[1]。质控菌株为ATCC25923。

1.2.2 β-内酰胺酶检测 采用西门子MicroScan WalkAway-40全自动微生物鉴定和药敏系统及配套Positive Combo Panel Type 20进行β-内酰胺酶检测，由仪器专家系统判读并报告结果。以上检测仪器和配套鉴定药敏卡均为德国西门子公司产品。

2 结果

2.1 一般资料情况

107株CNS在临床标本中的分布以中段尿和血液标本为主，具体分布为中段尿42株（39.3%），血液22株（20.6%），痰 18株（16.8%），伤口分泌物 12株（11.2%），胸腹水 8株（7.5%），穿刺液5株（4.7%）。患者年龄为7～91岁，主要集中于65岁以上年龄段，有76例，占71.0%。

2.2 凝固酶阴性葡萄球菌的菌种分布

107株CNS中共包括8种菌种，表皮葡萄球菌51株，占47.7%；腐生葡萄球菌24株，占22.4%；溶血葡萄球菌12株，占11.2%；人葡萄球菌6株，占5.6%；沃氏葡萄球菌5株，占4.7%；模仿葡萄球菌5株，占4.7%；头状葡萄球菌3株，占2.8%；耳葡萄球菌1株，占0.9%。

2.3 β-内酰胺酶检出情况

107株CNS中，检出 MRCNS 82株（76.6%），全部产 β-内酰胺酶；检出甲氧西林敏感的凝固酶阴性葡萄球菌（MSCNS）25株（23.4%），其中，有 20株产 β-内酰胺酶，产酶率为80.0%。

2.4 凝固酶阴性葡萄球菌的耐药性分析

107株CNS未发现万古霉素耐药株。MRCNS呈现高度耐药性和多重耐药性，除了万古霉素（耐药率为0）、利奈唑胺（耐药率为0）、氯霉素（耐药率为82.9%）、复方新诺明（耐药率为68.3%）外，其对其他抗生素的耐药率均大于85%。见表1。

表1 107株凝固酶阴性葡萄球菌对14种常见抗生素的耐药情况

3 讨论

CNS广泛存在，空气、人的皮肤等都有该菌存在或寄殖，是皮肤正常菌群。随着医学新技术的不断开发，特别是介入性操作用于诊断、治疗等，使CNS成为医院感染最重要的病原菌。CNS能产生黏质物，对光滑的生物医学材料具有特殊的吸附作用，在其上形成的生物膜，是其致病的主要原因，机制为在染色体胞间黏附基因簇控制下，首先细胞快速黏附于材料表面，然后表达胞间凝集素，促进多个细胞间黏附，累积成一个细胞层，细菌包埋于黏质物中，形成生物膜，生物膜一旦形成，抗菌药物治疗效果较差[2-3]。CNS引发的感染常与侵入性插管、静脉导管（留置针）以及呼吸器等生物医学材料的使用相关。本研究结果显示，107株CNS主要分布于6种标本中，可引起人体各部位的感染。其中，位于前3位的标本是中段尿 42株（39.3%）、血液 22株（20.6%）、痰 18株（16.8%），与CNS感染的特点相符合。

CNS的耐药性与生物膜的产生有关[2]。生物膜的作用机制是阻断抗生素渗透和水解，钝化抗生素，降低其有效浓度。形成生物膜后，细菌表面抗原位点被覆盖，逃避免疫反应，抗生素不容易穿入，因而表现为抗吞噬和耐药等特点[4]。从本研究结果来看，107株CNS中检出MRCNS 82株（76.6%），全部产 β-内酰胺酶；检出 MSCNS 25株（23.4%），其中，有 20株产β-内酰胺酶（产酶率为80.0%）。细菌产β-内酰胺酶可水解β-内酰胺，使β-内酰胺类抗菌药物水解而失效。MRCNS的耐药性主要是由染色体mecA基因编码产生的独特型青霉素结合蛋白（PBP2a）和由质粒介导产生的大量β-内酰胺酶引起的[5]。mecA基因编码的青霉素结合蛋白使细菌对β-内酰胺类抗生素亲和力降低，从而导致对头孢菌素类药物耐药[6]。本研究结果显示，MRCNS呈现高度耐药性和多重耐药性。MRCNS除了万古霉素（耐药率为0）、利奈唑胺（耐药率为0）、氯霉素（耐药率为82.9%）、复方新诺明（耐药率为68.3%）外，对大多数抗生素的耐药率都大于85%。目前在我院CNS中尚未发现万古霉素耐药株，说明万古霉素针对CNS的感染仍为首选抗生素。

根据本次研究体外药敏结果显示，医院感染CNS的耐药情况较为严重，因而在临床上应尽量减少侵入性操作以降低CNS的感染。CNS感染治疗中需根据药敏结果合理使用抗生素，应选择具有相加和协同的药物联合使用，尽量缩短抗菌药物使用时间，避免不合理的抗生素使用，尤其是预防用药，以减少其对细菌的选择压力，避免耐药株的出现。

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