痛风舒缓胶囊抗炎镇痛作用研究①

冷 嫚 ，杨丹莉，夏 文，4，吴 芹，龚其海，聂 晶，金 凤，王井洪

(1.遵义医学院药理学教研室暨贵州省基础药理重点实验室贵州 遵义 563000;2.遵义医学院 药学院，贵州遵义 563000;3.贵州景红生物科技有限责任公司，贵州 贵阳 550000;4贵州百灵企业集团制药有限股份公司，贵州 贵阳 550000)

痛风舒缓胶囊(TFSHC)是根据传统验方，加 以改进后制成的新药。该验方在临床应用多年，对痛风疗效确切，无明显不良反应。本研究通过二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀模型观察TFSHC的抗炎作用，通过热板法和醋酸扭体法观察TFSHC的镇痛作用。该研究旨在为该开发TFSHC为6类中药新药提供部分临床前基础药理学资料。

1 材料与方法

1.1 动物 昆明种小鼠，体重18～20 g，由重庆第三军医大学提供，许可证号为SCXK(渝)2007－001;由重庆第三军医大学提供。

1.2 药物 痛风舒缓胶囊(新药发明专利专利号:201010205632.3ZL)，批号:20090920;布洛芬缓释片，惠州大亚制药股份有限公司，批号:090401。

1.3 仪器 电子分析天平，北京赛多利斯天平有限公司，型号:BS 110S;电热恒温水浴箱，北京市光明医疗仪器厂，型号:HH.W21.420型。

1.4 小鼠耳廓肿胀法抗炎试验 取昆明种小鼠40只，随机分为4组，分别灌胃生理盐水、布洛芬(35 mg/kg)、低、高剂量 TFSHC(0.33 g/kg，1g/kg)连续7 d，末次给药1.5 h后，将二甲苯均匀涂于小鼠右耳两面40 μl，将小鼠脱椎处死，沿耳廓基线剪下两耳，称重量，计算肿胀度=右耳－左耳。

1.5 热板法镇痛试验 取昆明小鼠置于热板上，记录小鼠自热板上至出现舔后足反应所需的时间，即为痛阈值，凡小于5 s或大于30 s及跳跃者均淘汰。合格小鼠再测1次痛阈值 ，取两次平均值作为各鼠痛阈值。取合格小鼠40只，将其随机分为四组，分别灌胃生理盐水、布洛芬(35 mg/kg)、低、高剂量 TFSHC(0.33 g/kg，1 g/kg)连续7 d，末次给药后1 h、3 h测量痛阈值。

1.6 冰醋酸致小鼠扭体法 取昆明小鼠40只，雌性，随机分为4组，分别灌胃生理盐水、布洛芬(35 mg/kg)、低、高剂量 TFSHC(0.33 g/kg，1 g/kg)连续7 d，于末次给药后1 h，分别由腹腔注射0.9%醋酸(0.2 ml/只)，观察20 min内出现扭体反应的次数。

2 结果

2.1 TFSHC对二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀的影响 与生理盐水处理组比较，TFSHC低、高剂量对小鼠耳廓肿胀均有显著的抑制肿胀作用(P＜0.05)，布洛芬也有显著的抑制肿胀作用(P＜0.05)。表明TFSHC对二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀有抗炎作用，结果(见表1)。

表1 TFSHC对二甲苯致小鼠耳廓肿胀度的影响(s，n=10)

表1 TFSHC对二甲苯致小鼠耳廓肿胀度的影响(s，n=10)

注:与生理盐水组比较，*P＜0.05

组 别 肿胀度(mg)肿胀抑制率(%)

2.2 TFSHC对热板法小鼠痛阈值的影响 与生理盐水组比较，TFSHC低、高剂量组均能显著提高痛阈值(P＜0.05)，布洛芬也能显著提高痛阈值(P＜0.05)。表明TFSHC对热刺激引起的小鼠疼痛有镇痛作用，结果(见表2)。

表2 TFSHC对热板法小鼠痛阈值的影响(s，n=10)

表2 TFSHC对热板法小鼠痛阈值的影响(s，n=10)

注:与生理盐水组比较，*P＜0.05

组 别 1 h痛阈值(s)3h痛阈值(s)15.77 ±4.69 16.95 ±4.51布洛芬(35mg/kg)23.52 ±7.24* 26.50 ±6.85*TFSHC 低(0.33g/kg)28.11 ±4.55* 30.54 ±6.67*TFSHC 高(1.0g/kg)27.18 ±6.55* 28.26 ±6.62生理盐水*

2.3 TFSHC对冰醋酸引起的小鼠扭体的影响

与生理盐水处理组比较，TFSHC高剂量能显著减少醋酸所致的小鼠扭体次数(P＜0.05)，布洛芬组也能显著减少醋酸所致的小鼠扭体次数(P＜0.05)。表明TFSHC高剂量对醋酸刺激引起小鼠的疼痛有镇痛作用，结果(见表3)。

表3 TFSHC对冰醋酸致小鼠扭体反应的影响(x ± s，n=10)

3 讨论

痛风是一种严重危害人类健康的疾病，其发病机制与嘌呤代谢障碍及尿酸排泄减少密切相关，其中急性痛风关节炎发病急，症状重，严重影响病人的生活质量［1］。目前用于缓解急性痛风性关节炎的药物主要包括:秋水仙碱，消炎痛等。这些药物虽能一定程度改善症状，但秋水仙碱有肝、肾损害、呼吸抑制等严重不良反应;消炎痛对胃肠道有明显的刺激作用，容易引起胃肠粘膜糜烂和溃疡、甚至上消化道出血的危险等［2］。故现亟待寻找有效、安全的新药。

近10余年来，随着生活水平的提高和饮食结构的不合理改变，我国痛风的发病率呈现日益增高的趋势。痛风性关节炎急性发作时可表现为关节红肿热痛和活动受限［3］。传统医学中，本病属于“痹证”范畴，病因主要由于过食膏粱厚味，脾胃运化失常，湿热蕴结，络脉淤滞所致，症见关节红肿热痛等症，当以清热利湿、舒筋止痛为法［4，5］。TFSHC由白芍、威灵仙、牛寄奴、金钱草、泽泻等组成，有清热散结，化瘀止痛的功效。现代药理学研究已证实白芍具有镇痛作用、扩血管等作用;威灵仙具有舒筋止痛等作用;金钱草具有利尿通淋，清热解毒，抗炎等作用;泽泻具有降血脂及利尿等作用。全方协同具有清热利湿去痹、舒筋通络止痛之功效。

抗炎实验的炎症肿胀模型有以下几种方法:通过致炎因子如异性蛋白(鸡蛋清)、颗粒性异物(酵母、角叉菜胶)、化学物(二甲苯、松节油、甲醛)等引起局部毛细血管通透性增加，制作局部炎症肿胀模型［6］。本实验选择了通过在耳部局部涂抹二甲苯建立小鼠耳廓肿胀炎症模型，观察TFSHC的抗炎效应。实验结果显示:与生理盐水处理组比较，TFSHC低、高剂量对小鼠耳廓肿胀均有显著的抑制肿胀作用(P＜0.05)，布洛芬也有显著的抑制肿胀作用(P＜0.05)，表明TFSHC与布洛芬均对二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀有抗炎作用。与布洛芬组相比较，低、高剂量TFSHC组均无统计学差异。

镇痛实验中，通过热刺激法、醋酸扭体法制造小鼠疼痛的模型，观察TFSHC的镇痛作用。热板法实验结果显示:与生理盐水组比较，TFSHC低、高剂量组均能显著提高小鼠痛阈值(P＜0.05)，布洛芬也能显著提高小鼠痛阈值(P＜0.05)。与布洛芬组相比较，TFSHC组提高小鼠痛阈值的趋势更明显，但无统计学差异。研究结果表明TFSHC对热板法所致小鼠足疼痛都具有镇痛作用。醋酸扭体法的实验结果显示:与生理盐水处理组比较，TFSHC高剂量能减少醋酸所致的小鼠扭体次数(P＜0.05)，布洛芬组也能显著减少醋酸所致的小鼠扭体次数(P＜0.05)。与布洛芬组相比较，低、高剂量TFSHC组均无统计学差异。研究结果表明TFSHC对醋酸刺激引起小鼠的扭体疼痛具有缓解作用。

本研究揭示TFSHC具有明显的抗炎镇痛效应，该研究结果为开发TFSHC为6类中药新药提供了部分临床前药理学资料。

［1］叶任高，陆再英.内科学［M］.第6版.北京:人民卫生出版社，2003.862.

［2］江瀛，徐领城.痛风的药物治疗进展［J］.海峡药学，2010，22(1):100-102.

［3］Miao Z，Li C，Chen Y，et al.Dietary and lifestyle changes associated with high prevalence of hyperuricemia and gout in Shandong coastal cities of eastern China［J］.J Rheumatol，2008，35(9):1859 －1864.

［4］李振彬.痛风的病机及中药治疗［J］.中国中西医结合杂志，2011，31(4):459-460.

［5］张玉祥，王希，黄少斌.痛风定冲剂抗炎镇痛作用的实验研究［J］.时珍国医国药，2006，17(12):2505-2506.

［6］陈奇.中药药理学研究方法学［M］.第2版.北京:人民卫生出版社，2006.346.