3种方法检测淋病奈瑟菌的比较分析及意义

马 萍 聂庆东 殷 敏

1.清华大学医院检验科，北京100084；2.清华大学玉泉医院检验科，北京100049

淋病是目前较流行的性传播疾病（sexually transmitted disease，STD）之一，约占全球STD 病例的3/4，在我国亦呈逐步蔓延之势，严重威胁人群健康[1-2]。淋病奈瑟菌（neisseria gonorrhoeae，NG）是淋病的病原体。目前实验室对淋病检测方法多种多样，笔者对来自临床100 例可疑标本分别进行分泌物培养法、分泌物直接涂片法、尿液淋球菌快速检测，分析各自的阳性率及临床实用性，以期为基层医院临床提供准确可靠的诊断依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 资料来源

选取笔者所在医院2008 年3 月～2011 年11 月收治的临床100 例疑似淋球菌感染患者，均有尿频、尿急、尿痛、有脓性分泌物溢出等症状。均在未使用任何药物前或停药3 d 后采集2 份分泌物标本、1 份尿液标本进行检测。

1.2 试剂

1.2.1 分泌物培养法 巧克力平板培养基购自天津市金章科技发展有限公司。

1.2.2 分泌物直接涂片法 选用购自珠海贝索生物技术有限公司生产的快速革兰染色液。

1.2.3 尿液淋球菌快速检测 选用郑州安图绿科生物工程有限公司生产的淋球菌检测试剂盒。

1.3 方法

1.3.1 标本采集 由门诊医生进行分泌物标本采集，以一次性拭子采集男性患者尿道内2 ～4 cm 处脓性分泌物、女性患者宫颈口内侧0.5 ～1.0 cm 处分泌物黏液，取2 份标本分别均匀涂片采用革兰染色后（染色过程详见试剂说明书）镜检，镜检找到白细胞内有肾形革兰阴性双球菌者为阳性。另1 份标本置于无菌试管内，保温及时送检，接种于巧克力平板，在5%CO2环境下培养24 ～48 h，根据菌落形态用氧化酶进行鉴定，并且涂片镜检为革兰阴性双球菌者为阳性。

1.3.2 标本检测 用一次性尿杯采集初段尿标本，1 h 内检测完毕。取2 mL 标本加入反应试管内，垂直滴加3 滴试剂，塞紧管塞，轻轻摇匀。放置5 min 后（轻度患者可延至10 min），再轻轻摇匀1 次（若已产生气泡不必再摇），观察反应管内尿液上部气泡形成情况，20 min 后结果无效。若液面上部形成一层白气泡或液面上层管壁形成一圈细小的白气泡者判读为阳性。

2 结果

100 例可疑标本中，分泌物培养阳性结果35 例、阳性率35%；分泌物直接涂片法找到革兰阴性双球菌（细胞内）39例、阳性率39%；尿液淋病快速检测阳性结果44 例、阳性率44%。培养法一直被世界卫生组织推荐为用于诊断NG 感染的“金标准”[3]，用直接涂片法、尿液淋球菌快速检测法与培养法进行比较，得出直接涂片法、尿液淋球菌快速检测法与培养法的符合率分别是96%、91%。见表1。

表1 直接涂片法、尿液淋球菌快速检测法与培养法检测结果比较（n）

3 讨论

淋病是我国目前最常见的性传播疾病之一。临床主要表现为尿频、尿急、尿痛。男性尿道口可见脓性分泌物，引起尿道炎；女性可表现为阴道分泌物增多，宫颈可见脓性分泌物，引起阴道炎、盆腔炎等。慢性感染者还可导致不育[4]。因此快速确诊是治疗和预防淋病的关键。笔者通过对临床100 例可疑标本分别进行分泌物培养法、分泌物直接涂片法、尿液淋球菌快速检测。结果显示，培养法阳性率为35%，与国内同期其他文献报道结果[5-7]阳性率不是很一致，这可能与受检人群及患者男女比例有关。培养法的阳性率并不是很高，这可能是因为NG 是一种需要复杂营养的脆弱细菌，不耐受干燥和低温，要在5%CO2且湿润的环境下才有可能生长。而且需要尽快接种标本，床旁接种最好，但临床往往达不到这种要求。所以致使培养的阳性率并不是很高，尤其是女性患者易受很多杂菌的干扰，影响NG 的生长。涂片法的阳性率为39%，快速检测的阳性率为44%，以培养法为参考方法与之相比较，该两种方法阳性率均高于培养法，这可能与培养法条件要求比较高，有可能有阳性标本在留取到接种过程中没有存活有关。但该两种方法与培养法的符合率均高于90%。其中快速检测法的阳性率最高，这可能是由于快速法的原理是基于淋球菌具有一种特异性酶反应测定系统，当标本中含有此酶时，就会发生生化反应同时产生气泡。正常情况下尿或分泌物中的杂菌产生此酶的活性很低不足以产生阳性反应。但当杂菌数量大大增加时，就可引起假阳性反应。同时血尿和严重蛋白尿时也可影响结果判断。特别是女性标本，分泌物增多时会干扰快速检测产生假阳性。直接涂片法与培养法的符合率很高，比快速检测的阳性率略低一些，除了快速法的假阳性反应干扰外，也可能与分泌物的取材部位和留取方法有关。

本研究检测的阳性涂片标本按照操作规程规定报告的都是在细胞内找到革兰阴性双球菌。而也有文献报道[8]，未找到细胞内革兰阴性双球菌，细胞外找到的标本进行培养也有53%的标本培养为阳性结果。因此当仅有胞外找到革兰阴性双球菌并不能完全排除淋球菌感染的可能，应高度考虑。革兰染色后镜检和淋病快速检测法与培养法的符合率均在90%以上，且相对于培养法更简便、快速。但存在一定的假阳性率和假阴性率，因此对于没有培养条件的基层医院而言联合检测分泌物涂片法和尿液淋球菌快速检测法，可以互相弥补，以供临床综合诊断，提高淋球菌检测的准确率。

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[4] 李桢，叶峰山，李连青，等.几种淋病奈瑟菌检测方法的比较研究[J].山西医药杂志，2010，39（4）：177-178.

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