种公羊白色念珠菌的分离与鉴定

柳旭伟

（新疆农业职业技术学院动物科技学院，新疆 昌吉831100）

白色念珠菌（Candida albicans）又称白假丝酵母，是一种条件致病菌，广泛存在于自然界，在蔬菜、水果和土壤中均可检出，也可存在于健康人的皮肤、阴道、口腔和消化道等部位，在人体免疫力下降时，就易引起白色念珠菌感染。外生殖器念珠菌感染包括念珠菌外阴阴道炎和念珠菌龟头炎，在人的方面报道较多，但在动物方面却报道较少。最近我们从奎屯市某养殖场患有龟头炎的种公羊病料中分离到1株白色念珠菌，初步结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 病料来源 奎屯市生产建设兵团129团某养殖场患有龟头炎的种公羊，其症状为阴茎包皮及龟头出现弥散性潮红，干燥光滑，包皮内侧及冠状沟处附有白色奶酪样斑片。

1.2 方法

1.2.1 涂片镜检 取病料少许涂于滴有10%KOH溶液的载玻片上，自然干燥，火焰固定，革兰染色镜检。

1.2.2 分离培养 将病料接种于沙氏葡萄糖琼脂（SDA）平板，37℃培养48～72h。

1.2.3 鉴定培养

1.2.3.1 厚膜孢子试验［1］将含有吐温－80的玉米粉琼脂培养基融化后，倒在无菌载玻片上，凝固后接种上述分离培养物。将玻片置于无菌平皿中，并加湿棉球防止水分蒸发，25℃培养48h。

1.2.3.2 芽管试验［1］培养物接种于1mL无菌健康绵羊血清中，37℃培养2h。

1.2.3.3 生化试验 将培养物接种于葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖、菊糖、甘露醇、山梨醇等生化鉴定培养基，30℃培养24～72h。

1.2.4 致病性试验［2］将10只健康小鼠随机分成2组，每组5只。将收获的菌体用生理盐水以1∶10制成菌悬液。试验组小鼠腹腔注射菌悬液0.1mL／只，对照组腹腔注射生理盐水0.1mL／只。

2 结果

2.1 涂片镜检 可见革兰阳性卵圆形芽孢以及假菌丝。

2.2 分离培养 沙氏葡萄糖琼脂平板上可见有多量圆形、凸起、光滑、湿润奶酪样乳白色菌落。

2.3 鉴定培养（1）厚膜孢子试验：分离菌经吐温－80玉米粉琼脂培养基培养后，镜下观察可见很多顶端、圆形孢子。（2）芽管试验：可见有芽管形成。（3）生化试验：分离菌对葡萄糖及麦芽糖产酸产气，对蔗糖产酸，不发酵乳糖，其他生化培养基均呈阴性反应。

2.4 致病性试验 试验组小鼠接种后陆续出现精神沉郁，饮食欲减退，4～7d内全部死亡。对照组小鼠全部存活。剖检死亡小鼠可见各个脏器都有感染，其中肝和肾最为明显，可见肿胀、坏死以及小脓灶。取病灶涂片、染色镜检，可见与分离菌一致的孢子和假菌丝。重新分离可得到与分离菌特性一致的真菌。

3 小结与讨论

3.1 根据临床症状、直接镜检、病原菌的培养特性、厚膜孢子试验、芽管试验、生化试验以及致病性试验结果，初步确定该病原菌为白色念珠菌。

3.2 生殖器念珠菌病是由白色念珠菌在一定条件下所致生殖器炎症性疾病。主要有念珠菌外阴阴道炎及念珠菌包皮龟头炎。生殖器念珠菌病在人医方面报道较多，在动物方面却报道极少而没有引起足够的重视。生殖器型念珠菌病属于念珠菌的浅部感染，如果不及时治疗将引起继发性感染，而造成巨大的经济损失。

3.3 念珠菌病乃人兽共患病，我们兽医工作者在诊治的过程中一定要做好自身的防护工作。当然，念珠菌是自然界中广泛存在的一大类真菌，只要我们认真做好防护工作，就可以免除感染，防范于未然。

［1］杨正时，房海.人及动物病原细菌学［M］.石家庄：河北科学技术出版社，2003.

［2］孙金福，张中华.鹧鸪念珠菌病的病原分离与鉴定［J］.畜牧与兽医，2004，36（4）：29－30.