实时荧光PCR检测HBVDNA与ELISA检测HBV M结果分析

张咏梅 张智博

(漯河市疾病预防控制中心 河南漯河 462000)

乙型肝炎是一种全球性传染性疾病,我国是乙型肝炎病毒感染高发地区,HBsAg阳性率曾平均为10.1%[1],虽然近年来随着疾病预防控制的加强,我国乙肝病毒感染率有明显下降,但情况仍不容乐观。ELISA检测乙肝在临床上已应用多年,HBsAg和/或者HBeAg阳性,已成为判定HBV感染的标志。实时荧光PCR法检测HBV DNA,则可使HBV-DNA检测值相对量化,从数据上直接观察到感染者是否复制,从而为观察乙肝的疗效及制订预防措施提供依据,逐步降低我国乙肝病毒感染者人数。本文对我中心2010年至2011年的322例ELISA检测判定HBV感染者的实时荧光PCR检测结果之间的关系进行了分析。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2010年至2011年,来我中心进行ELISA检测HBV M,判定为HBV感染者及其实时荧光PCR检测结果,共323例,其中男性209例,女性114例,年龄从15～74岁,HBV感染者判定符合《全国病毒性肝炎防治方案》[2](2000版)诊断标准要求。

1.2 方法

1.2.1 HBV M测定 采用ELISA法检测HBV M,试剂采用广东省珠海市丽珠试剂股份有限公司生产的酶联免疫试剂盒,按试剂盒操作说明书进行检测。

1.2.2 HBV DNA测定 采用实时荧光PCR法检测HBV DNA,仪器:美国伯乐公司生产的IQ5全自动实时荧光PCR仪,试剂:上海科华生物工程股份有限公司生产的乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒,按试剂盒使用说明书进行检测,检测值≥500为阳性,检测值0.00则为阴性。

2 结果

322 例乙肝病毒感染者HBV DNA检测结果与HBV M之间的关系见表1。

表1 乙肝HBV M检测结果与HBV DNA检测值之间关系

323 例乙肝病毒感染者,其HBV DNA阳性者为175例,阳性率为54.18%,其中,HBsAg、HBeAg、HBcAb或HBsAg、HBeAg阳性者,其HBV DNA阳性率及病毒含量均最高,而HBsAg、HBeAb、HBcAb或HBsAg、HBcAb阳性者,其HBV DNA阳性率及含量处于中间水平,仅HBsAg阳性者,其HBV DNA阳性率及含量均在较低水平。且第1、第2组与第3、第4组之间有显著性差异(χ2=49.49,P<0.01);第3、第4组与第5组之间,有显著性差异。(χ2=57.66,P<0.01)。

3 讨论

我国是乙型肝炎病毒感染者高发区,判断乙肝病毒的含量、复制及活动情况,对乙型肝炎的监测预防及乙肝患者的治疗效果的判定,有十分重要的意义,传统的ELISA检测方法,方便快速经济,可以判断乙肝病人不同的感染期,实时荧光PCR检测HBV DNA,是病毒在人体内复制的最直接的标志,和传统方法相比,具有结果精确灵敏,相对定量的优点。ELISA检测方法中,把HBeAg阳性,做为判断其病毒复制及传染的依据,从荧光PCR检测HBV DNA结果发现,HBeAg阳性者93例,HBV DNA阳性者92例,二者存在正相关关系,与文献[3]报导一致,具有相似的流行病学意义。但是,HBeAg阴性,也有相当一部分感染者病毒是可以复制传染的,尤其是HBcAb同时为阳性者,复制率达到50%以上,因此,不能把HBeAg做为判定HBV病毒复制传染的唯一标志,最好是2种方法同时进行检测,以利于治疗和对预后进行判定,对乙型肝炎患者的治疗用药起到更好的的指导作用。

[1] 刘崇伯,中国病毒乙型肝炎的流行征及预防[J].中国公共卫生,1997,13(9):515.

[2] 中华医学会,传染病与寄生虫病学分会,肝病学分会联合修订.病毒性肝炎防治方案[J].中华传染病杂志,2001,19(1):56.

[3] 张健,李宁,吕维红.HBV-DNA定量测定对乙肝五项的评价意义[J].华中医学杂志,2001,25(1):15～17.