不同激素对树兰组织培养的影响

孙 瑶，黄康康

(浙江省杭州市农业科学研究院，浙江 杭州 310024)

树兰为兰科树兰属热带兰，原产于厄瓜多尔，是一种具有很高观赏价值的热带气生兰，深受台湾兰花爱好者的青睐，但在国内尚属少见［1-2］。谷祝平等［3］、潘学峰等［4］曾利用树兰种子诱导形成的原球茎进行扩繁取得成功，但种子间差异很大，利用种子扩繁不利于亲本性状的保持［1］。为了加速繁育速度，缩短育种周期，在工厂化育苗中常采用组织培养的方式［5-6］。树兰是濒危兰花物种，数量稀少，因此研究树兰组织培养技术，构建一套简便高效的再生体系，对树兰的快繁研究具有重要意义。现将作者的试验结果总结如下。

1 材料与方法

1.1 材料

供试材料为树兰 (Epidendrum Yellow)无菌苗的茎段和丛芽，由课题组组培室提供。

1.2 方法

取健壮无菌试管苗，以1/2 MS为基本培养基，每升附加8 g琼脂粉，30 g蔗糖和2 g活性炭，添加不同浓度的NAA(0.2，0.5，1.0 mg·L-1)和6-BA(0.5，1.0，2.0，3.0，4.0 mg·L-1)。试验设15个处理。每瓶接种5个外植体，每处理接种10瓶，pH值调至5.8，培养温度25℃左右，每天光照时间14 h，光照强度1 500～2 000 lx，培养40～50 d后统计数据。

2 结果与分析

2.1 对愈伤组织和芽诱导的影响

外植体接入诱导培养基上约20 d后开始膨大，产生愈伤组织，但不同激素组合对树兰茎段愈伤组织的诱导作用差异显著，以NAA 1.0 mg·L-1+6-BA 3.0 mg·L-1诱导出的愈伤组织最好，诱导率达50.0%(表1)，且愈伤组织呈黄绿色、表面湿润、松软，生长状态好。

表1 NAA、6-BA不同配比组合对愈伤组织诱导的影响

在激素对树兰茎段的诱导过程中发现，经40～50 d的培养后，有些茎段分化成芽 (表2)，且不同激素组合对芽的诱导效果不同。以NAA 1.0 mg·L-1+6-BA1.0 mg· L-1和 NAA 1.0 mg·L-1+6-BA 0.5 mg·L-1诱导出的芽最多，诱导率分别达52.0%和48.0%，且植物生长健壮。

表2 NAA、6-BA不同配比组合对芽分化的影响

2.2 对生根的影响

从表3可以看出，不同NAA和6-BA配比组合对树兰组培苗生根的影响不同。NAA 0.5 mg·L-1+6-BA 2.0 mg·L-1的激素组合对生根的诱导率最低，只有87.5%。其余各生长调节剂组合对生根的诱导率均达90%以上。

表3 NAA、6-BA不同配比组合对组培苗生根的影响

3 小结和讨论

本实验中树兰原球茎的诱导率和芽的分化率较低，这可能是由于这2个实验均是在同一种培养基中统计所致，也即是说茎段培养40～50 d后，同一个组培瓶中出现原球茎和芽并存的情况。如NAA 1.0 mg·L-1+6-BA 1.0 mg·L-1培养基中原球茎的诱导率为30%，芽分化率为52%，即在该培养基中培养40～50 d后30%茎段转变成原球茎，另外52%的茎段分化成芽，诱导和分化率总和则为82%。表明树兰的诱导和分化相对容易，可以在同一种培养基 中 完 成。其 中 NAA 1.0 mg·L-1+6-BA 1.0 mg·L-1配方中诱导和分化总和最高，达82%。此外，树兰生根相对容易，在各培养基中的生根率均在87.5%以上，其中在培养基NAA 1.0 mg·L-1+6-BA 1.0 mg·L-1上的生根率达100%。因此，推断树兰的诱导、分化和生根可以在同一个培养基上完成。张先云等［7］的研究也表明杂交兰的从诱导、增殖、分化到生根可以用同一种培养基。这样大大缩短了生产和试验周期、简化了操作程序、降低了成本。

根据已有研究可知，不同品种间的差异性较为显著。本文仅对树兰的一个品种进行了研究，不能对不同品种的培养效果进行评价。因此对具有广泛品种适应性的培养基还有待于进一步研究。

［1］ 魏翠华.树兰离体培养和植株再生 (简报)［J］.亚热带植物科学，2006，35(2):64-65.

［2］ 龙雅宜.初识奇妙的兰科观赏植物 (中)［J］.花木盆景:花卉园艺版，2007(12):7-11.

［3］ 谷祝平，徐涛.树兰原球茎增殖中体细胞胚发生的研究 ［J］.兰州大学学报:自然科学版，1990，26(1):76-79.

［4］ 潘学峰，凌梅，王安石.树兰未成熟种子离体快繁技术［J］.热带生物学报，2010，1(2):158-164.

［5］ 江金兰，周辉明，罗庆国.6-BA、NAA不同配比对大花蕙兰丛生芽增殖的影响 ［J］.浙江农业科学，2009(1):85-86.

［6］ 马华升，王伟科，王佳.培养基、激素和添加物对大花蕙兰原球茎诱导增殖的影响 ［J］.浙江农业科学，2005(6):452-456.

［7］ 张先云，袁秀云，马杰.杂交兰的组织培养与快速繁殖技术研究 ［J］.河南科学，2009，27(4):419-421.