钟正贤, 张 颖, 卢文杰, 牙启康
(广西中医药研究院, 广西 南宁 530022)
多叶越南槐(SophoratonkinensisGagnep.var.polyphylla S.)为豆科槐属植物,与山豆根(越南槐)Sophoratonkinensis是同科同属同种的根,是越南槐的一个变种。生长于石山区,分布于广西、广东、云南、贵州和江西等省[1],在广西主要分布于红水河流域,如都安、马山、忻城、武鸣等地[2]。其性寒,味苦,具有清热解毒、消肿利咽之功效,常用于火毒蕴结,咽喉肿痛,齿龈肿痛等疾患的治疗。市场上山豆根日益面临枯竭的现状,因其与山豆根性状和药效相似,广西民间把多叶越南槐当作山豆根药材来使用,《广西中药材标准》1990版也将多叶越南槐作为山豆根药材的植物来源之一收载。为探索多叶越南槐药材能否作为山豆根的代用品,为资源利用和临床应用提供科学依据。且多叶越南槐药理基础研究又未见报道,因此,笔者对多叶越南槐和山豆根进行了药理作用对比研究,现将研究结果报道如下。
1.1 药物及试剂 多叶越南槐醇提物(4.25 g生药/g膏);山豆根醇提物(4.14 g生药/g膏),由广西中医药研究院中药化学研究所提供。实验时用蒸馏水研磨配制成药液备用。阿司匹林肠溶片为武汉远大制药集团股份有限公司产品,批号:081101。联苯双酯,为浙江万邦药业有限公司产品,批号:100717。人参蜂王浆,为北京市东风保健营养品有限公司,批号:201011806。乳酸,为南京建成生物研究所产品,批号:20101229。尿素氮,为长春汇力生物技术有限公司产品,批号:201010。血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)试剂盒,均为长春汇力生物技术有限公司产品,批号为2010021和2010048。
1.2 动物 昆明种小鼠,体重18~22 g,部分12~14 g,雌雄各半。由广西医科大学实验动物中心提供,清洁级,许可证号:SCXK桂2003—0003。小鼠分性别饲养于空调实验室内,室温:(22±2)℃,相对湿度:(60±2)%,喂颗粒标准饲料,自由饮水和摄食。
1.3 仪器 722型光栅分光光度计,上海分析仪器三厂产品。FA1004-型万分之一电子天平,上海精密科学仪器有限公司产品。
2.1 对巴豆油所致小鼠耳廓肿胀的抑制作用[3]取小鼠60只,雌雄各半,随机分为空白对照组,山豆根高、低剂量(3.6、1.8 g /kg)组,多叶越南槐高、低剂量(3.6、1.8 g/kg)组和阳性药阿斯匹林(0.2 g/kg)组,每组10只。用药各组均灌胃给药,空白对照组给予等量的蒸馏水,每天1次,连续7 d。于末次给药30 min后,用微量注射器取0.05 mL 2%巴豆油溶液涂于小鼠右耳,待4 h后处死小鼠。立即用口径为8 mm的打孔器,沿着小鼠左右耳廓相同部位打孔取材,然后在电子天平上分别称重,以两耳片重量(mg)的差值作为肿胀程度指标,并求出百分抑制率(%)。结果见表1。
表1 多叶越南槐和山豆根对巴豆油引起小鼠耳廓肿胀的影响 ±s ,n=10)
结果表明,与空白对照组比较,多叶越南槐和山豆根高、低剂量组及阿司匹林组均明显降低小鼠耳廓肿胀度,提示多叶越南槐和山豆根均具有明显的抗炎作用。相比较,多叶越南槐抗炎作用比山豆根稍强,但差异无显著性意义。
2.2 对醋酸所致小鼠扭体次数的影响[3]分组及给药同2.1。于末次给药后1 h,每只小鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2 mL/只,立即观察并记录20 min内各小鼠的扭体次数。比较给药组与对照组之间的差异,评价受试药物的镇痛作用。结果见表2。
表2 多叶越南槐和山豆根对醋酸所致小鼠扭体反应的影响 ±s ,n=10)
结果表明,与空白对照组比较,多叶越南槐和山豆根高、低剂量组及阿司匹林组均明显减少小鼠扭体次数,提示多叶越南槐和山豆根均具有明显的镇痛作用,且2者作用强度相当。
2.3 对小鼠凝血时间的影响[3]分组及给药同2.1。末次给药1 h后,用内径为1 mm的玻璃毛细管插入小鼠眦球后静脉丛取血,至毛细玻璃管血柱达5 cm为止,每隔30 s 折断毛细玻璃管一小段,同时用肉眼观察血柱是否移动,仔细检查有无凝血丝出现,计算从毛细管采血到凝血丝出现的时间,进行组间比较。结果见表3。
表3 多叶越南槐和山豆根对小鼠凝血时间的影响 ±s ,n=10)
结果表明,与空白对照组比较,多叶越南槐高剂量组及山豆根高、低剂量组均明显延长小鼠凝血时间。提示多叶越南槐和山豆根均具有一定的抗凝血作用,且2者作用相当。
2.4 对四氯化碳(CCL4)所致肝损伤模型的影响[4]取小鼠70只,随机分为空白对照组,模型组,联苯双酯(0.2 g/kg)组,山豆根高、低剂量(3.6、1.8 g/kg)组,多叶越南槐高、低剂量(3.6、1.8 g/kg)组,每组10只。给药各组灌胃给药,空白对照组给予同体积蒸馏水。动物每天灌胃给药1次,连续用药7 d。末次给药1 h后除正常对照组外,各组小鼠腹腔注射1%四氯化碳(CCL4)花生油溶液10 mL/kg(体重)。16 h后从小鼠眼眶静脉丛取血,分离血清。然后取血清按临床试剂盒方法,测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性。结果见表4。
表4 多叶越南槐和山豆根对CCL4引起急性肝损伤小鼠
结果表明,多叶越南槐和山豆根高、低剂量组对CCL4引起急性肝损伤小鼠血清ALT、AST活性升高有明显抑制作用。提示多叶越南槐和山豆根均具有一定的保肝降酶作用,且作用强度相当。
2.5 对幼年小鼠免疫器官重量的影响[5]取12~14 g幼年小鼠60只,雌雄各半。随机分为空白对照组,阳性药人参蜂王浆(10 mL/kg)组,多叶越南槐高、低剂量(3.6、1.8 g/kg)组,山豆根高、低剂量(3.6、1.8 g/kg)组,每组10只。用药各组分别每日灌胃给药1次,连续10 d。于末次给药后24 h,拉颈椎处死,称体重,摘出胸腺及脾脏称重,以胸腺或脾脏重量(mg)与体重(g)之比作为胸腺或脾脏指数。结果见表5。
表5 多叶越南槐对小鼠免疫器官重量影响 ±s ,n=10)
结果表明,与空白对照组比较,阳性药人参蜂王浆,多叶越南槐和山豆根高、低剂量组均能增加小鼠胸腺指数和脾脏指数,提示多叶越南槐和山豆根具有一定细胞免疫增强作用。且2者作用相当。
2.6 对小鼠抗疲劳能力的影响[5]取小鼠60只,雌雄各半,随机分为空白对照组,山豆根高、低剂量(3.6、1.8 g/kg)组,多叶越南槐高、低剂量(3.6、1.8 g/kg)组和阳性药人参蜂王浆(10 mL/kg)组,每组10只。分别每日灌胃给药1次,连续10 d。末次给药后1 h,给小鼠负重(约体重的10%保险丝),放入水温30 ℃左右的水槽中游泳,并记录小鼠开始游泳至体力耗尽沉入水面下8 s不能浮出水面为止的时间,为体力耗竭时间。并在耗竭游泳实验后的各组小鼠立即从水中取出,让小鼠休息30 min后,摘除眼球取血,按临床试剂盒方法测定血液中乳酸(BLA)和尿素氮(BUN)的含量。结果见表6。
表6 多叶越南槐和山豆根对小鼠抗疲劳能力的影响 ±s ,n=10)
结果表明,与空白对照组比较,多叶越南槐和山豆根高、低剂量组和阳性药人参蜂王浆组均能延长小鼠游泳时间,高剂量组明显降低血中乳酸及尿素氮含量。提示多叶越南槐和山豆根具有一定的抗疲劳作用。相比较,两者抗疲劳作用强度差异不大。
目前对越南槐的研究和利用主要集中在山豆根上,其它种类少有报道。加大对其它越南槐种类的研究,寻找新的药源或发现新的有效成分,将会使越南槐的利用和开发前景更加广阔。根据越南槐的临床功用及药理作用研究报道,笔者对多叶越南槐和山豆根设计了抗凝、抗炎、镇痛、抗肝损、抗疲劳等药理实验比较。结果表明,多叶越南槐和山豆根均能减轻小鼠耳廓肿胀;减少小鼠扭体次数;降低肝损伤小鼠血清转氨酶活性;延长凝血时间;并延长小鼠游泳时间,具有一定的抗凝、抗炎、镇痛、降转氨酶和抗疲劳等药理作用。相比较,多叶越南槐和山豆根的药理作用强度差异不大。推测这些药理作用可能与该植物共同所含的黄酮类、酚类、生物碱等化学物质有关,本研究结果为扩大多叶越南槐的科学应用提供了实验依据,对于其他方面的药理作用仍待进一步研究。
[1]谢宗万.中药材品种论述[M].2版.上海:上海科学技术出版社,1990:142~144.
[2]覃海宁,刘演.广西植物名录[M].北京:科学出版社,2010:209.
[3]钟正贤,李燕婧,张颖,等.黑草水提物的药理作用研究[J].云南中医中药杂志,2010,31(10):50.
[4]钟正贤,李燕婧,陈学芬,等.相思子碱的药理作用研究[J].中医药导报,2009,15(1):8.
[5]谢莹,陈全斌,罗达伟,等.高纯度甜茶苷抗疲劳及免疫调节功能研究[J].时珍国医国药,2010,21(6):1412.