紫尿酸双波长叠加光度法测定水中微量铁

陈孝进,王菊纲,彭兰,袁选波,王克仕,万芳,邹志宝,王琳

(湖北省兴山县人民医院检验科,湖北兴山 443700)

紫尿酸双波长叠加光度法测定水中微量铁

陈孝进,王菊纲,彭兰,袁选波,王克仕,万芳,邹志宝,王琳

(湖北省兴山县人民医院检验科,湖北兴山 443700)

在碱性介质中，铁（Ⅱ）与紫尿酸发生显色反应形成一种蓝色配阴离子，该配阴离子具有两个吸收峰，分别位于630 nm和350 nm，吸光度A630，A350之和ΔA与铁(Ⅱ)的含量在0～2 μg／mL范围内线性关系良好，据此建立了测定微量铁的紫尿酸双波长叠加光度法，该法用于水中微量铁的测定，测定结果与火焰原子吸收法（FAAS）相吻合，加标回收率为98%～102%，测定结果的相对标准偏差为1.2%～2.9%（n=5）。

铁；紫尿酸；双波长叠加；分光光度法

邻菲啰啉、硫氰酸钾和磺基水杨酸是光度法测定微量铁的常用显色剂，但灵敏度低或选择性差。近年来，文献报道了不少新的显色体系，如Fe(Ⅲ)–1 ,2-二甲基-3-羟基吡啶-4-酮 (HDMP) 体系、Fe(Ⅱ )–PAR 体系、Fe(Ⅱ )／ Fe(Ⅲ )–2,4,6-三 (2'-吡啶基)-1,3,5-三嗪(TPTZ)体系、Fe(Ⅲ)– 4-(H酸偶氮)-1-苯基-3-甲基吡唑啉酮（HAPMP）体系［1–4］、Fe(Ⅲ)–对二乙氨基苯基荧光酮(P-DMEPF)–TPB体系［5］和 Fe(Ⅲ )–5-氯-4-羟基-3-甲氧基苯基卟啉 ( MTCHPMOP)– Triton X-100 体系［6］等，但有的体系灵敏度仍然较低［1-3］，有的体系虽然灵敏度高但试剂价格偏高或不易获得［4-6］，应用受到限制。

实验发现，在碱性介质中，紫尿酸（VA）可与铁(Ⅱ)发生显色反应形成一种蓝色配阴离子，该配阴离子具有两个吸收峰，分别位于630 nm［ε630=1.80×104L／(mol·cm)］和 350 nm［ε350=2.54×104L／(mol·cm)］，且体系的吸光度A630，A350之和ΔA与铁(Ⅱ)量在一定范围内具有良好的线性关系，据此建立了测定微量铁的紫尿酸双波长叠加光度法。

1 实验部分

1.1 主要仪器与试剂

紫外／可见分光光度计: TU–1810SPC型，北京普析通用仪器公司；

胃癌是具有恶化快、预后差、易复发、死亡率较高等特点的常见的恶性肿瘤之一[1-3]。要对胃癌骨转移进行防治，就有必要全面了解不同临床分期及病理形态类型对胃癌骨转移预后因素的影响，我们回顾性分析60例胃癌骨转移患者的临床资料，探讨其预后影响因素，为寻找规律，为临床医疗决策提供依据。

据了解，“建立综合与分类相结合的个人所得税制”这一改革目标最早出现在“九五”计划中，此后，在“十五”“十一五”“十二五”规划（计划）中，尽管表述不同，但都明确个人所得税改革的方向是推进综合与分类相结合。然而，在此后数次个人所得税法修订中，始终没有在综合征收上取得进展。

取含铁量分别为 0，10.0，20.0，30.0，40.0，50.0 μg的铁标准溶液或10～20 mL水样（含铁量小于50 μg）于25 mL比色管中，补充纯水至20 mL左右，加入VA溶液1.0 mL，混匀，再加入VC溶液1.0 mL，混匀，加入硼砂–NaOH缓冲液2.0 mL并以水定容，混匀，放置10 min，以试剂空白作参比，用1 cm比色皿同时测量630 nm和350 nm波长处的吸光度A630和A350，计算ΔA=A630+A350，以工作曲线法定量。

Fe(Ⅱ)–VA显色体系在pH 6以上可形成蓝色配合物,而在pH 9～11时体系有最大且稳定的吸光度,选用pH 9.5的硼砂–NaOH缓冲液进行试验,其用量在1.5～2.5 mL时体系有最大且稳定的吸光度，实验选用2.0 mL。

铁含量在0～2 μg／mL范围内符合比耳定律，工作曲线的回归方程为：ΔA=0.774 3c– 0.006 7,r=0.999 9,表观摩尔吸光系数ε=4.34×104L／(mol·cm)。

抗坏血酸(VC)溶液：0.05 mol／L；紫尿酸（VA）溶液：0.04 mol／L；硼砂–NaOH缓冲液：pH 9.5。

1.2 实验方法

原子吸收光度计：WFX1E–2型，北京瑞利仪器公司；

2 结果与讨论

2.1 吸收光谱

Fe(Ⅱ) –VA显色体系及试剂空白均具有两个吸收峰，分别位于630，350 nm和532，330 nm波长处，Δλ分别为98 nm和20 nm，图1是Fe(Ⅱ) –VA显色体系的吸收曲线。

where I0 is the saturation current, V is the employed voltage,n is the ideality factor, q is the charge of electron, T is the absolute temperature, and K is the well-known constant of Boltzmann.

2.2 酸度的影响及缓冲溶液的选择

铁标准溶液：1 000 μg／mL，编号GBW08616，国家标准物质研究中心，使用时稀释成10 μg／mL标准使用液；

参与体系反应的是二价铁离子，实验时在体系中加入VC，一方面可将样品中的三价铁离子还原成二价铁离子，另一方面可防止在碱性条件下二价铁离子被氧化或被水解以提高显色反应的稳定性，0.05 mol／L的VC溶液用量以1.0 mL为宜。

2.3 VA溶液的用量

室温下，当有VC存在时，Fe(Ⅱ)–VA体系在10 min左右即可显色完全，且其在630，350 nm波长处的吸光度至少可稳定1 h。

2.4 铁的价态及VC的影响

近年来，城市化进程越来越快，土地资源日益紧张，高层建筑建设数量持续增加。由于建筑高度在增加，主体负荷在增大，极易出现不规则下沉的情况，引发建筑倾斜、裂缝等问题的出现。对此，为确保建筑施工、运营安全，必须落实沉降监测工作，对沉降监测数据进行科学分析，获得可靠结论，及时采取相应的预防处理措施。

2.5 线性范围及配阴离子的稳定性

我说：“我说这些话没有别的意思，并不是说我肯定要和萍萍结婚了，我和萍萍结婚，不是我一个人能说了算数的，萍萍是不是会同意？我不知道，我是说如果我是萍萍的丈夫。”

0.04 mol／L的VA溶液用量在0.75～1.25 mL时体系有最大且稳定的吸光度，实验选用1.0 mL。

2.6 共存物质的影响

当测定20.0 μg Fe(Ⅱ)时，测量误差在±5%范围内允许下述物质（以 mg计）共存：K+，Na+，,柠檬酸钠(1.0)Zn2+，Mn2+，Se（Ⅳ），SCN–（0.2）；F–，CN–，Cr（Ⅵ），Mo（Ⅵ），Cd2+，Al3+（0.1）；Ag+（0.05）。Cu2+，Co2+，Ni2+有正干扰，当向体系中加入0.2～0.3 mL半胱氨酸盐酸盐溶液（质量分数为1%）时，可消除0.1 mg Cu2+，Ni2+和 0.02 mg Co2+的干扰，同时0.4 mL的半胱氨酸盐酸盐溶液对20 μg Fe(Ⅱ)的测定结果无明显影响。

2.7 测量精密度

对含铁分别为10.0，40.0 μg的铁标准溶液和2份水样平行测定5次，测定结果见表1。由表1可知，测定结果的相对标准偏差（RSD）小于3%，表明本法的测量精密度良好。

表1 精密度试验结果

2.8 加标回收试验

取3份水样进行加标回收试验，试验结果见表2。由表2可知，加标回收率为98%～102%，测量准确度满足分析要求。

表2 回收试验结果(n=3)

2.9 样品分析

取均匀水样200 mL，加入1.0 mol／L的盐酸0.6～0.8 mL并加热浓缩至80 mL左右,冷却后定容至100 mL(此样液pH约为5～6),每次分取10～20 mL样液(含铁量小于50 μg)于25 mL比色管中,按1.2实验方法测定并与国标法（FAAS）［7］进行对照，测定结果见表3，由表3可知，本法结果与国标法相吻合。

3 结语

紫尿酸双波长叠加光度法具有灵敏度较高、选择性良好、试剂价廉易得和操作简便、快速的优点，应用于水中微量铁的测定,获得满意的结果。

表3 水样分析结果 mg／L

［1］华南平，王振平，王轶凡，等.羟基吡啶酮分光光度法测定铁(Ⅲ)［J］.光谱实验室 , 2004,21(5): 889–891.

［2］吴小华，陈建荣，缪吉根.酸性介质中PAR与Fe(Ⅱ)显色反应的研究及其应用［J］.理化检验：化学分册, 1999,35(7):324–325.

［3］董春洲，杨敏，王文芳. 2,4,6-三(2'-吡啶基)-1,3,5-三嗪分光光度法测定Fe(Ⅱ)和Fe(Ⅲ)的研究［J］.分析试验室, 2004，23(1): 76–78.

［4］邬春华，古昆，杨光宇， 等. 4-(H酸偶氮)-1-苯基-3-甲基吡唑啉酮与铁(Ⅲ)显色反应的研究［J］.冶金分析，1999,19(4):14–15.

［5］孙雪花，马红燕，田锐，等. 对二乙氨基苯基荧光酮分光光度法测定铁的研究［J］.化学试剂 , 2007，29(5): 293–294.

［6］王玉枝，李庆宏，熊劲芳，等.新显色剂5-氯-4-羟基-3-甲氧基苯基卟啉的合成及其与Fe(Ⅲ)的显色反应研究［J］.分析科学学报 , 2002，18(1): 39–41.

［7］GB／T 5750.6-2006 生活饮用水标准检验法［S］.

Determination of Iron in Water by DW-Spectrophotometry with Absorbance Addition

Chen Xiaojin, Wang Jugang, Peng Lan, Yuan Xuanbo, Wang Keshi, Wan Fang, Zou Zhibao, Wang Lin
(The People's Hospital of Xingshan County , Xingshan 443711, China)

A new dual-wavelength spectrophotometry for the determination of iron by measurement with absorbance addition was proposed.In a base medium，iron(Ⅱ) reacted with violuric acid to form a blue complex with 2 absorption peaks at wavelengths of 630 nm and 350 nm. Applying the measurement mode of “absorbance addition at 2 wavelengths”,i.e.，by taking the sum of values of the absorbances at 630 nm and 350 nm（ΔA=A630+A350），a linear relationship between the sum of absorbances and the mass concentration of iron was obtained in the range of 0 – 2 μg／mL. The determination result of trace iron in water was in good agreement with that obtained by FAAS. The recoveries were 98% – 102%, and the RSD were 1.2% – 2.9%(n=5).

iron; violuric acid; mode of absorbance addition at two wavelength; spectrophotometry

O657.32

A

1008–6145(2012)02–0072–03

10.3969／j.issn.1008–6145.2012.02.022

联系人：陈孝进； E-mail: cxjin126@sina.com

2011–12–15